| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-21页 |
| 1.DNA损伤修复分子与疾病 | 第9-11页 |
| ·运动失调性毛细血管扩张症(A-T)与ATM蛋白 | 第9-10页 |
| ·运动失调性毛细血管扩张症样疾病(ATLD)与Mre11蛋白 | 第10页 |
| ·Nijmegen破损综合症(NBS)与NBN蛋白 | 第10-11页 |
| ·NBS变异疾病与RAD50蛋白 | 第11页 |
| 2.DNA损伤修复 | 第11-15页 |
| ·DNA损伤感应 | 第11-12页 |
| ·DNA损伤信号传导 | 第12-13页 |
| ·DNA损伤修复途径和机制 | 第13-15页 |
| ·DNA损伤修复途径 | 第13-14页 |
| ·非同源末端连接(NHEJ) | 第13页 |
| ·同源重组 | 第13-14页 |
| ·DNA损伤修复机制 | 第14-15页 |
| 3.MRN复合物和ATM激酶在端粒保护中的作用 | 第15-17页 |
| 4.MRN复合物基因突变与癌症发病率的关系 | 第17-19页 |
| 5.Mre11基因研究现状及本实验的研究目的和意义 | 第19-21页 |
| 第二章 材料和方法 | 第21-38页 |
| 1.材料 | 第21-27页 |
| ·表达载体 | 第21-22页 |
| ·野生型黑腹果蝇21h胚胎cDNA文库表达载体 | 第21页 |
| ·诱饵蛋白表达载体(pGBKT7-BD) | 第21页 |
| ·S2细胞中蛋白表达载体(pMK33/pMtHy vector) | 第21-22页 |
| ·筛选文库 | 第22页 |
| ·酵母菌株 | 第22-24页 |
| ·CG1945酵母菌 | 第22页 |
| ·AH109酵母菌 | 第22-23页 |
| ·Y187酵母菌 | 第23-24页 |
| ·试剂 | 第24-26页 |
| ·实验仪器 | 第26-27页 |
| 2.方法 | 第27-38页 |
| ·酵母双杂交 | 第27-29页 |
| ·酵母双杂交系统的原理 | 第27-28页 |
| ·酵母双杂交系统操作的基本程序 | 第28页 |
| ·酵母双杂交系统研究进展 | 第28页 |
| ·Matchmaker 3酵母双杂交系统 | 第28-29页 |
| ·诱饵蛋白表达载体构建(pGBKT7-BD-Mre11N335) | 第29-31页 |
| ·PCR模板 | 第29页 |
| ·PCR引物序列 | 第29页 |
| ·PCR反应体系 | 第29-30页 |
| ·PCR反应条件 | 第30-31页 |
| ·酵母菌转化 | 第31页 |
| ·诱饵蛋白自激活检测 | 第31-32页 |
| ·酵母双杂交筛选 | 第32-33页 |
| ·酵母菌共转 | 第33页 |
| ·酵母杂交 | 第33页 |
| ·移码突变 | 第33-35页 |
| ·免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP) | 第35-38页 |
| 第三章 实验结果 | 第38-47页 |
| 1.酵母双杂交实验初步筛选 | 第38页 |
| 2.共转 | 第38页 |
| 3.酵母杂交(yeast mating) | 第38-39页 |
| 4.移码突变 | 第39-46页 |
| ·移码突变实验鉴定 | 第39-45页 |
| ·移码突变后酵母杂交 | 第45-46页 |
| 5.免疫共沉淀 | 第46-47页 |
| 第四章 讨论 | 第47-49页 |
| 第五章 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 英文缩略词表 | 第56-57页 |
| 在读期间研究成果 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
