| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-10页 |
| 第一部分 文献综述 | 第10-21页 |
| 1 Ghrelin 基因的研究进展 | 第10-20页 |
| ·Ghrelin 的结构及体内分布 | 第10-11页 |
| ·Ghrelin 的分子结构 | 第10-11页 |
| ·Ghrelin 的分布 | 第11页 |
| ·Ghrelin 的主要生物学效应 | 第11-13页 |
| ·促进生长激素释放 | 第12页 |
| ·增加摄食，调节能量代谢 | 第12-13页 |
| ·对胃肠道功能的影响 | 第13页 |
| ·作用于其他激素 | 第13页 |
| ·Ghrelin 对生殖系统的调节作用 | 第13-20页 |
| ·Ghrelin 对生殖内分泌的调节 | 第13-15页 |
| ·Ghrelin 对雄性生殖系统的作用 | 第15-16页 |
| ·Ghrelin 对雌性生殖系统的调节 | 第16-20页 |
| 2 研究目的和意义 | 第20-21页 |
| 第二部分 小梅山猪Ghrelin 基因的克隆及其在生殖轴中的表达 | 第21-46页 |
| 1 实验材料 | 第21-24页 |
| ·试验动物 | 第21页 |
| ·网络资源及软件 | 第21页 |
| ·菌株和克隆载体 | 第21页 |
| ·主要试剂及试剂盒 | 第21-22页 |
| ·PCR 扩增引物 | 第22页 |
| ·主要仪器设备 | 第22页 |
| ·主要溶液的配制 | 第22-24页 |
| 2 实验方法 | 第24-32页 |
| ·Ghrelin 基因部分cDNA 的克隆与序列分析 | 第24-28页 |
| ·器皿的处理 | 第24页 |
| ·猪生殖轴及胃组织的获取 | 第24页 |
| ·猪各个组织总RNA 的提取及纯化 | 第24-25页 |
| ·反转录—cDNA 链的获得 | 第25-26页 |
| ·小梅山猪Ghrelin 基因PCR 扩增 | 第26-27页 |
| ·引物合成 | 第26页 |
| ·引物的处理 | 第26-27页 |
| ·PCR 扩增 | 第27页 |
| ·目的片段的纯化回收 | 第27-28页 |
| ·PCR 产物的克隆与鉴定 | 第28-31页 |
| ·PCR 产物与克隆载体的连接 | 第28-29页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第29页 |
| ·受体菌的培养 | 第29页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第29页 |
| ·质粒的转化 | 第29-30页 |
| ·阳性克隆的PCR 鉴定 | 第30-31页 |
| ·序列测定与分析 | 第31页 |
| ·Ghrelin m RNA 组织表达谱 | 第31页 |
| ·样品采集 | 第31页 |
| ·RNA 提取 | 第31页 |
| ·RT-PCR | 第31页 |
| ·荧光定量RCR 反应 | 第31-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-42页 |
| ·Ghrelin cDNA 的克隆与序列分析 | 第32-36页 |
| ·小梅山猪总RNA 的检测 | 第32-33页 |
| ·Ghrelin 基因的PCR 扩增和阳性克隆的PCR 鉴定 | 第33-34页 |
| ·核酸序列测定和分析 | 第34-36页 |
| ·Ghrelin mRNA 的组织表达谱 | 第36-38页 |
| ·Ghrelin mRNA 表达实时荧光定量检测 | 第38-42页 |
| ·PCR 产物的特异性检测 | 第38-40页 |
| ·Ghrelin 和β-actin 基因扩增效率一致性的判定 | 第40-41页 |
| ·Ghrelin 在生殖轴中的相对表达变化 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-46页 |
| ·Ghrelin 序列的同源性分析 | 第42-43页 |
| ·各组织Ghrelin mRNA 表达分析 | 第43-46页 |
| 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第58页 |
