中文摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
前言 | 第16-28页 |
材料和方法 | 第28-64页 |
1.主要仪器 | 第28-29页 |
2.试剂与耗材 | 第29-33页 |
3.常用试剂配方 | 第33-43页 |
3.1 人原代羊膜成纤维细胞培养试剂 | 第33-35页 |
3.2 蛋白提取试剂配制 | 第35-36页 |
3.3 蛋白定量试剂配制 | 第36-37页 |
3.4 Western Blotting试剂配制 | 第37-41页 |
3.5 免疫荧光染色检测试剂配制 | 第41-42页 |
3.6 药物配制 | 第42-43页 |
4.实验材料 | 第43-44页 |
5.实验方法 | 第44-64页 |
5.1 人原代羊膜成纤维细胞培养 | 第44-45页 |
5.2 细胞加药处理 | 第45-46页 |
5.3 总RNA提取、逆转录、普通PCR和实时荧光定量PCR | 第46-50页 |
5.4 蛋白提取和Western Blotting | 第50-53页 |
5.5 免疫组织化学检测 | 第53-56页 |
5.6 细胞免疫荧光 | 第56页 |
5.7 siRNA干扰实验 | 第56-57页 |
5.8 样本SAA1、IL-1β 和IL-6 ELIA测定 | 第57-61页 |
5.9 样本cortisol和PGE2 EIA测定 | 第61-63页 |
5.10 统计学分析 | 第63-64页 |
实验结果 | 第64-90页 |
1. SAA1在人胎膜组织中的表达和分布 | 第64-66页 |
2. 糖皮质激素和促炎性细胞因子共同诱导人羊膜成纤维细胞SAA1的表达 | 第66-70页 |
2.1 皮质醇剂量依赖性的诱导人羊膜成纤维细胞SAA1的表达 | 第66-68页 |
2.2 IL-1β 剂量依赖性的诱导人羊膜成纤维细胞SAA1的表达 | 第68页 |
2.3 皮质醇和促炎性细胞因子协同诱导人羊膜成纤维细胞SAA1的表达 | 第68-70页 |
3. SAA1诱导人羊膜成纤维细胞促炎性基因的表达 | 第70-74页 |
3.1 SAA1诱导羊膜成纤维细胞促炎性细胞因子IL-1β、IL-6 的表达 | 第70-71页 |
3.2 SAA1诱导羊膜成纤维细胞COX-2 的表达和前列腺素的合成 | 第71-74页 |
4. SAA1诱导人羊膜成纤维细胞促炎性基因表达的机制 | 第74-87页 |
4.1 NF-κB介导了SAA1对羊膜成纤维细胞IL-1β、IL-6 和COX-2 的诱导作用 | 第74-77页 |
4.2 MAPK介导了SAA1对羊膜成纤维细胞NF-κB信号通路的激活 | 第77-83页 |
4.3 TLR4介导了SAA1对羊膜成纤维细胞MAPK信号通路的激活 | 第83-87页 |
5. 足月阴道分娩与足月择期剖宫产组羊膜组织皮质醇和SAA1水平的差异 | 第87-90页 |
5.1 足月羊膜组织中进入产程后皮质醇浓度的变化 | 第88-89页 |
5.2 足月羊膜组织中进入产程后SAA1浓度的变化 | 第89-90页 |
小结 | 第90-92页 |
结论 | 第92-93页 |
讨论 | 第93-103页 |
1. SAA1在胎膜中的表达及其意义 | 第93-95页 |
2.糖皮质激素和促炎性细胞因子对羊膜SAA1的诱导作用及其意义 | 第95-99页 |
3. SAA1诱导羊膜成纤维细胞促炎症基因表达的机制 | 第99-103页 |
展望 | 第103-104页 |
参考文献 | 第104-113页 |
致谢 | 第113-115页 |
攻读博士学位期间发表学术论文 | 第115-117页 |