| Abstract | 第5-7页 |
| 摘要 | 第8-11页 |
| Abbreviations | 第11-17页 |
| 第一章 研究背景和文献综述 | 第17-46页 |
| 1.1 简述代谢综合征及相关疾病 | 第17-22页 |
| 1.1.1 代谢综合征的定义、发生和预防 | 第17-19页 |
| 1.1.2 胰岛素抵抗和二型糖尿病 | 第19-20页 |
| 1.1.3 非酒精性脂肪肝 | 第20-22页 |
| 1.2 AMPK蛋白对能量代谢稳态的调节 | 第22-36页 |
| 1.2.1 AMPK蛋白的结构和磷酸化修饰机制 | 第22-26页 |
| 1.2.2 AMPK蛋白对葡萄糖稳态的调控 | 第26-29页 |
| 1.2.3 AMPK蛋白对脂肪酸稳态的调控 | 第29-32页 |
| 1.2.4 AMPK蛋白在细胞生长、凋亡和炎症中的作用 | 第32-36页 |
| 1.3 蛋白TBC1D1和Rab8A的研究进展及生理学功能 | 第36-41页 |
| 1.3.1 TBC1D1蛋白的结构、磷酸化以及活性的调控 | 第36-37页 |
| 1.3.2 TBC1D1蛋白在糖脂代谢中的作用 | 第37-38页 |
| 1.3.3 小G蛋白Rab8A的调控和生理学意义 | 第38-41页 |
| 1.4 激素IGF1对全身代谢的调控 | 第41-44页 |
| 1.4.1 IGF1的合成与分泌 | 第41-42页 |
| 1.4.2 IGF1生理功能和作用的研究现状 | 第42-44页 |
| 1.5 总结 | 第44-46页 |
| 第二章 IGF1的分泌及其对代谢类疾病的调控 | 第46-128页 |
| 2.1 前言 | 第46-47页 |
| 2.2 实验材料与方法 | 第47-60页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第47页 |
| 2.2.2 抗体 | 第47-50页 |
| 2.2.3 小鼠构建 | 第50-51页 |
| 2.2.4 小鼠繁育和鉴定 | 第51-52页 |
| 2.2.5 小鼠体质比分析 | 第52页 |
| 2.2.6 葡萄糖耐受和胰岛素耐受实验 | 第52-53页 |
| 2.2.7 血生化和激素水平分析 | 第53页 |
| 2.2.8 原代细胞的分离、转染及IGF1分泌实验 | 第53-55页 |
| 2.2.9 肝脏内甘油三酯含量的测定 | 第55-56页 |
| 2.2.10 组织裂解和免疫沉淀反应 | 第56页 |
| 2.2.11 Rab8A蛋白GDP结合形式与GTP结合形式的Pull down实验 | 第56-57页 |
| 2.2.12 蛋白质免疫印迹和14-3-3 Overlay | 第57页 |
| 2.2.13 RNA提取和Q-PCR定量 | 第57-58页 |
| 2.2.14 组织切片和成像 | 第58页 |
| 2.2.15 免疫荧光染色和成像 | 第58-59页 |
| 2.2.16 统计分析 | 第59-60页 |
| 2.3 结果 | 第60-116页 |
| 2.3.1 成功构建TBC1D1蛋白丝氨酸231位点全身性突变的小鼠 | 第60-61页 |
| 2.3.2 TBC1D1~(S231A)突变的小鼠具有显著性增加的生长表型 | 第61-64页 |
| 2.3.3 TBC1D1~(S231A)突变的小鼠出现年龄依赖性的肥胖和代谢综合征 | 第64-66页 |
| 2.3.4 TBC1D1~(S231A)突变的小鼠表现为全身性显著性活化的IGF1 Receptor-PKB(AKT) -mTORC1信号通路 | 第66-73页 |
| 2.3.5 TBC1D1~(S231A)突变的小鼠表现为显著性增加的IGF1蛋白的内分泌、旁分泌和自分泌 | 第73-76页 |
| 2.3.6 TBC1D1~(S231A)突变的小鼠表现为正常的GH、IGF2、IGFBP3的分泌水平以及正常的GH下游的信号通路 | 第76-80页 |
| 2.3.7 在肝脏原代细胞中,TBC1D1蛋白表达量的改变显著性的调控IGF1囊泡的分泌速率 | 第80-82页 |
| 2.3.8 TBC1D1~(S231A)突变小鼠的肝脏原代细胞中IGF1蛋白的高分泌可以激活IGF1 Receptor-PKB(AKT)信号通路 | 第82-86页 |
| 2.3.9 在肝脏原代细胞中,抑制AMPK激酶的活性可以增加IGF1囊泡的分泌速率并激活IGF1 Receptor-PKB(AKT)信号通路 | 第86-92页 |
| 2.3.10 在肝脏原代细胞中,AMPKα1亚基介导了AMPK蛋白对IGF1囊泡分泌水平的调控 | 第92-94页 |
| 2.3.11 在肝脏原代细胞中,敲降LKB1蛋白可以增加IGF1囊泡的分泌速率并激活IGF1 Receptor-PKB(AKT)信号通路 | 第94-96页 |
| 2.3.12 Rab8A通过调节IGF1囊泡的分泌速率改变IGF1 Receptor-PKB(AKT)信号通路的活性 | 第96-100页 |
| 2.3.13 TBC1D1蛋白通过影响Rab8A的酶活性调节IGF1囊泡的分泌水平 | 第100-103页 |
| 2.3.14 TBC1D1蛋白全身性敲除的小鼠表现为显著性下降的生长趋势 | 第103-106页 |
| 2.3.15 成功构建TBC1D1~(S231A/)IGF1~(+/-)小鼠,恢复TBC1D1~(S231A)突变小鼠血液中IGF1的蛋白水平到野生型小鼠 | 第106-108页 |
| 2.3.16 TBC1D1~(S231A)/IGF1~(+/-)小鼠表现为显著性下降的生长趋势 | 第108-110页 |
| 2.3.17 TBC1D1~(S231A)/IGF1~(+/-)小鼠具有显著性下降的脂肪积累和肥胖程度 | 第110-111页 |
| 2.3.18 TBC1D1~(S231A)/IGF1~(+/-)小鼠恢复了TBC1D1~(S231A)突变小鼠中IGF1Receptor-PKB(AKT)-mTORC1信号通路的活化 | 第111-112页 |
| 2.3.19 TBC1D1~(S231A)/IGF1~(+/-)小鼠恢复了TBC1D1~(S231A)突变小鼠中的脂肪酸合成 | 第112-116页 |
| 2.4 讨论 | 第116-128页 |
| 参考文献 | 第128-146页 |
| 致谢 | 第146-147页 |
| 博士期间已发表的论文 | 第147-148页 |
