| 致谢 | 第4-5页 |
| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 文献综述 | 第10-18页 |
| 1.1 包涵体 | 第10-15页 |
| 1.1.1 活性包涵体的发现 | 第10-11页 |
| 1.1.2 包涵体形态与结构 | 第11页 |
| 1.1.3 包涵体形成的生物学特性 | 第11-12页 |
| 1.1.4 融合蛋白途径促进活性包涵体形成 | 第12-13页 |
| 1.1.5 活性包涵体的应用 | 第13-15页 |
| 1.2 D-氨基酸氧化酶 | 第15-18页 |
| 1.2.1 D氨基酸水平与DAAO的调控 | 第15-16页 |
| 1.2.2 DAAO的实际应用 | 第16-18页 |
| 2 引言 | 第18-19页 |
| 2.1 研究目的和意义 | 第18页 |
| 2.2 研究内容 | 第18-19页 |
| 3 材料与方法 | 第19-24页 |
| 3.1 材料 | 第19-20页 |
| 3.1.1 基因、质粒和菌株 | 第19页 |
| 3.1.2 仪器与设备 | 第19页 |
| 3.1.3 试剂 | 第19-20页 |
| 3.1.4 抗生素及部分缓冲液的配置 | 第20页 |
| 3.1.5 本实验中所用的引物 | 第20页 |
| 3.2 实验方法 | 第20-24页 |
| 3.2.1 载体构建的反应体系 | 第20-21页 |
| 3.2.2 野生型和突变体hDAAO表达载体的构建 | 第21-22页 |
| 3.2.3 融合不同标签的wt-hDAAO表达载体的构建 | 第22页 |
| 3.2.4 重组蛋白的表达与检测 | 第22页 |
| 3.2.5 包涵体的纯化及湿重分析 | 第22-23页 |
| 3.2.6 hDAAO的活性检测 | 第23页 |
| 3.2.7 玉米SR的L-Ser消旋活性的偶联反应 | 第23-24页 |
| 4 结果与分析 | 第24-31页 |
| 4.1 表达载体的构建 | 第24页 |
| 4.2 N端密码偏性优化结合tRNA共表达对hDAAO包涵体产量和活性的影响 | 第24-26页 |
| 4.3 融合标签对hDAAO活性包涵体产量和活性的影响 | 第26-28页 |
| 4.4 去除tevS对融合hDAAO活性包涵体表达的影响 | 第28-29页 |
| 4.5 hDAAO-cv的底物特异性检测 | 第29页 |
| 4.6 重组ZmSR的L-丝氨酸消旋活性的偶联分析 | 第29-31页 |
| 5 讨论 | 第31-33页 |
| 5.1 融合标签和tevS序列对蛋白质的性质研究 | 第31页 |
| 5.2 N端密码子优化对蛋白质的表达性质分析 | 第31-32页 |
| 5.3 稀有tRNA丰度对密码子偏性突变体的性质研究 | 第32页 |
| 5.4 密码子偏性优化对hDAAO的底物特异性研究 | 第32-33页 |
| 结论 | 第33-34页 |
| 参考文献 | 第34-44页 |
| 附录 | 第44-45页 |
| 个人简介 | 第45页 |
