| 摘要 | 第8-9页 |
| 英文摘要 | 第9页 |
| 1 引言 | 第10-20页 |
| 1.1 蓝舌病病毒概述 | 第10-13页 |
| 1.1.1 环状病毒属的构成 | 第10页 |
| 1.1.2 蓝舌病的认知历史 | 第10页 |
| 1.1.3 蓝舌病病毒的形态结构和理化特性 | 第10-11页 |
| 1.1.4 蓝舌病病毒的复制 | 第11页 |
| 1.1.5 蓝舌病的流行病学特性 | 第11-12页 |
| 1.1.6 蓝舌病的临床症状和病理变化 | 第12-13页 |
| 1.1.7 蓝舌病的防控 | 第13页 |
| 1.2 蓝舌病病毒的基因和所编码蛋白的分子生物学特征 | 第13-16页 |
| 1.2.1 L1基因和VP1蛋白 | 第13-14页 |
| 1.2.2 L2基因和VP2蛋白 | 第14页 |
| 1.2.3 L3基因和VP3蛋白 | 第14页 |
| 1.2.4 M4基因和VP4蛋白 | 第14页 |
| 1.2.5 M5基因和NS1蛋白 | 第14页 |
| 1.2.6 M6基因和VP5蛋白 | 第14-15页 |
| 1.2.7 S7基因和VP7蛋白 | 第15页 |
| 1.2.8 S8基因和NS2蛋白 | 第15页 |
| 1.2.9 S9基因和VP6、NS4蛋白 | 第15页 |
| 1.2.10 S10基因和NS3、NS3a蛋白 | 第15-16页 |
| 1.3 蓝舌病的诊断方法 | 第16-18页 |
| 1.3.1 病毒分离鉴定 | 第16页 |
| 1.3.2 蓝舌病血清学检测方法 | 第16-17页 |
| 1.3.3 蓝舌病分子生物学检测方法 | 第17-18页 |
| 1.4 蓝舌病抗原表位的研究进展 | 第18页 |
| 1.5 蓝舌病VP7蛋白单克隆抗体的制备 | 第18-19页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-25页 |
| 2.1 材料 | 第20-21页 |
| 2.1.1 菌种、单抗细胞、血清样本 | 第20页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第20页 |
| 2.1.3 实验动物 | 第20页 |
| 2.1.4 主要仪器与耗材 | 第20-21页 |
| 2.1.5 主要溶液配制 | 第21页 |
| 2.2 方法 | 第21-25页 |
| 2.2.1 蓝舌病病毒VP7蛋白的表达与鉴定 | 第21页 |
| 2.2.2 重组VP7蛋白的纯化 | 第21-22页 |
| 2.2.3 重组蛋白的抗原性鉴定 | 第22页 |
| 2.2.4 单克隆抗体腹水的制备 | 第22页 |
| 2.2.5 单克隆抗体腹水的纯化 | 第22页 |
| 2.2.6 单克隆抗体的特异性试验 | 第22-23页 |
| 2.2.7 蓝舌病病毒抗体检测竞争ELISA方法的建立与应用 | 第23-24页 |
| 2.2.8 C-ELISA试剂盒组装 | 第24-25页 |
| 3 结果与分析 | 第25-34页 |
| 3.1 蓝舌病病毒VP7蛋白的表达及纯化 | 第25-26页 |
| 3.2 VP7蛋白抗原性鉴定 | 第26页 |
| 3.3 VP7蛋白群特异性鉴定 | 第26-27页 |
| 3.4 单抗制备及纯化 | 第27-28页 |
| 3.5 单克隆抗体的特异性试验 | 第28页 |
| 3.6 优化C-ELISA反应条件 | 第28页 |
| 3.7 判定标准的确立 | 第28-29页 |
| 3.8 竞争ELISA方法的特异性实验 | 第29页 |
| 3.9 符合率实验 | 第29-30页 |
| 3.10 重复性实验 | 第30页 |
| 3.11 敏感性分析 | 第30-31页 |
| 3.12 保存实验 | 第31页 |
| 3.13 检测方法的应用 | 第31-32页 |
| 3.14 C-ELISA试剂盒组装 | 第32-34页 |
| 3.14.1 试剂盒的组成 | 第32-33页 |
| 3.14.2 试剂盒的使用说明书 | 第33-34页 |
| 4 讨论 | 第34-37页 |
| 4.1 蓝舌病病毒VP7蛋白及其单克隆抗体在蓝舌病检测中的意义 | 第34-35页 |
| 4.2 蓝舌病病毒抗体检测竞争ELISA方法的建立和应用 | 第35-37页 |
| 5 结论 | 第37-38页 |
| 致谢 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-46页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第46页 |