致谢 | 第4-5页 |
摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
1 文献综述 | 第11-17页 |
1.1 丛枝菌根真菌概述 | 第11页 |
1.2 AM真菌的形态结构 | 第11-12页 |
1.3 AM真菌与宿主共生的功能 | 第12-14页 |
1.3.1 AM真菌促进植物矿质营养元素的吸收 | 第12-13页 |
1.3.2 提高植物的抗逆性 | 第13-14页 |
1.3.3 AM真菌对根际微生物的调控作用 | 第14页 |
1.4 植物激素和AM菌根共生的相关性 | 第14-15页 |
1.5 生长素转运蛋白PIN基因家族 | 第15-17页 |
1.5.1 PIN蛋白的结构 | 第15-16页 |
1.5.2 PIN蛋白的研究进展 | 第16-17页 |
2 引言 | 第17-18页 |
3 材料与方法 | 第18-33页 |
3.1 实验材料 | 第18-19页 |
3.1.1 供试基质 | 第18页 |
3.1.2 供试植物及供试真菌 | 第18页 |
3.1.3 载体与菌株 | 第18页 |
3.1.4 试剂及培养基 | 第18-19页 |
3.1.5 酶及试剂 | 第19页 |
3.1.6 常用仪器设备 | 第19页 |
3.2 转录组分析 | 第19-21页 |
3.2.1 侵染条件下取样 | 第19-20页 |
3.2.2 台盼蓝染色步骤 | 第20页 |
3.2.3 改良Trizol法提取玉米根部总RNA | 第20-21页 |
3.2.4 上机测序 | 第21页 |
3.2.5 生物信息分析流程 | 第21页 |
3.3 玉米PIN基因家族的生物信息学分析 | 第21-22页 |
3.4 玉米PIN基因在AM真菌侵染条件下的诱导表达模式分析 | 第22-23页 |
3.4.1 改良Trizol法提取玉米根部总RNA | 第22页 |
3.4.2 反转录 | 第22-23页 |
3.4.3 荧光定量PCR反应 | 第23页 |
3.5 ZmPIN1a、ZmPIN5c、ZmPINY基因以及其相应启动子的克隆 | 第23-27页 |
3.6 表达载体构建与农杆菌转化 | 第27-30页 |
3.6.1 表达载体构建 | 第27-29页 |
3.6.2 农杆菌转导 | 第29-30页 |
3.7 百脉根毛状根体系的建立 | 第30-31页 |
3.7.1 百脉根种子的萌发 | 第30页 |
3.7.2 侵染 | 第30页 |
3.7.3 除菌 | 第30-31页 |
3.7.4 阳性根验证 | 第31页 |
3.7.5 扩繁 | 第31页 |
3.7.6 接种AM真菌 | 第31页 |
3.8 水稻的遗传转化及转基因水稻的获得 | 第31-33页 |
3.8.1 农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第31-32页 |
3.8.2 阳性转基因水稻植株的获得 | 第32-33页 |
4 结果与分析 | 第33-51页 |
4.1 AM真菌侵染玉米后的转录组分析 | 第33-40页 |
4.1.1 文库构建及测序 | 第33页 |
4.1.2 AM真菌侵染后的基因表达差异分析 | 第33-35页 |
4.1.3 差异基因GO富集分析 | 第35-36页 |
4.1.4 差异基因KEGG富集分析 | 第36-39页 |
4.1.5 响应AM真菌侵染的ZmPIN基因表达分析 | 第39-40页 |
4.2 生物信息学分析 | 第40-45页 |
4.2.1 ZmPIN基因家族的鉴定和结构分析 | 第40-42页 |
4.2.2 玉米生长素转运体PIN蛋白系统进化树的构建 | 第42-44页 |
4.2.3 玉米生长素转运体PIN蛋白的序列比对及保守基序分析 | 第44页 |
4.2.4 ZmPIN基因的组织表达模式分析 | 第44-45页 |
4.3 AM真菌促进玉米侧根的生长 | 第45-47页 |
4.3.1 玉米共生的检测 | 第45-46页 |
4.3.2 玉米响应AM真菌侵染后的表观特征 | 第46页 |
4.3.3 玉米根部总RNA分离 | 第46-47页 |
4.4 ZmPIN基因在AM真菌侵染条件下的诱导表达模式分析 | 第47-48页 |
4.5 转基因验证候选基因在AM真菌介导调节玉米侧根生长中的功能 | 第48-51页 |
4.5.1 ZmPIN1a、ZmPIN5、,ZmPINy基因以及其相应启动子的克隆 | 第48页 |
4.5.2 表达载体构建与农杆菌转化 | 第48-49页 |
4.5.3 百脉根毛状根的遗传转化及转基因毛状根的获得 | 第49-50页 |
4.5.4 水稻的遗传转化及转基因水稻的获得 | 第50-51页 |
讨论 | 第51-53页 |
结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-58页 |
附录 | 第58-62页 |
作者简介 | 第62页 |