摘要 | 第8-9页 |
英文摘要 | 第9-10页 |
1 前言 | 第11-20页 |
1.1 大肠杆菌概述 | 第11-13页 |
1.1.1 大肠杆菌的多样性 | 第11页 |
1.1.2 大肠杆菌的致病性 | 第11-12页 |
1.1.3 大肠杆菌的耐药现状 | 第12-13页 |
1.2 黏菌素的概述 | 第13-15页 |
1.2.1 黏菌素的发展史 | 第14页 |
1.2.2 黏菌素耐药机制 | 第14页 |
1.2.3 mcr-1的发现及现状 | 第14-15页 |
1.3 抗菌药物敏感性试验及判定标准 | 第15-17页 |
1.3.1 制定折点的组织及折点分类 | 第15-16页 |
1.3.2 野生型折点的研究进展 | 第16-17页 |
1.4 抗菌药物的体外药效学研究 | 第17-18页 |
1.4.1 最小抑菌浓度与最小杀菌浓度 | 第17页 |
1.4.2 抗菌药物后效应 | 第17-18页 |
1.4.3 防耐药突变浓度和突变选择窗 | 第18页 |
1.5 研究目的与意义 | 第18-20页 |
2 材料与方法 | 第20-32页 |
2.1 技术路线 | 第20-21页 |
2.2 试验材料 | 第21-23页 |
2.2.1 菌株 | 第21页 |
2.2.2 试剂 | 第21页 |
2.2.3 主要仪器设备 | 第21-22页 |
2.2.4 培养基和常用溶液配制 | 第22-23页 |
2.3 试验方法 | 第23-32页 |
2.3.1 样本采集 | 第23页 |
2.3.2 大肠杆菌的分离 | 第23页 |
2.3.3 大肠杆菌的鉴定 | 第23-25页 |
2.3.4 大肠杆菌的保存 | 第25页 |
2.3.5 黏菌素对猪源大肠杆菌最小抑菌浓度的测定 | 第25-26页 |
2.3.6 最小杀菌浓度的测定 | 第26页 |
2.3.7 防突变浓度的测定 | 第26页 |
2.3.8 抗菌后效应的研究 | 第26-27页 |
2.3.9 黏菌素对大肠杆菌野生型折点的确定 | 第27-28页 |
2.3.10 PCR检测河南地区黏菌素耐药菌株中的mcr-1及其他耐药基因 | 第28-30页 |
2.3.11 接合试验 | 第30-32页 |
3 结果与分析 | 第32-44页 |
3.1 大肠杆菌的分离鉴定 | 第32-35页 |
3.1.1 选择性培养基初步分离 | 第32页 |
3.1.2 革兰氏染色镜检 | 第32-33页 |
3.1.3 生化鉴定 | 第33-34页 |
3.1.4 PCR扩增16SrRNA鉴定大肠杆菌种属 | 第34页 |
3.1.5 分离菌株的地域分布 | 第34-35页 |
3.2 黏菌素对猪源大肠杆菌的最小抑菌浓度 | 第35页 |
3.3 黏菌素对20株致病性猪源大肠杆菌的MIC、MBC和MPC | 第35-36页 |
3.4 黏菌素对猪源大肠杆菌的体外抗菌后效应 | 第36-37页 |
3.5 黏菌素对猪源大肠杆菌CO_(WT)的确定 | 第37-38页 |
3.5.1 猪源大肠杆菌临床分离株的MIC值分布直方图分析 | 第37页 |
3.5.2 正态分布检验结果 | 第37页 |
3.5.3 非线性回归分析及CO_(WT)的确定 | 第37-38页 |
3.6 PCR检测河南地区黏菌素耐药菌株中的mcr-1及其他耐药基因 | 第38-42页 |
3.6.1 PCR检测mcr-1耐药基因 | 第38页 |
3.6.2 mcr-1阳性大肠杆菌的基因环境检测结果 | 第38-39页 |
3.6.3 mcr-1阳性菌株的耐药表型 | 第39-40页 |
3.6.4 mcr-1阳性菌株中其他耐药基因的检测 | 第40-42页 |
3.7 接合试验结果 | 第42-44页 |
4 讨论 | 第44-50页 |
4.1 黏菌素体外药效学特点 | 第44页 |
4.2 黏菌素对猪源大肠杆菌CO_(WT)的确定 | 第44-45页 |
4.3 黏菌素的应用及耐药现状分析 | 第45-47页 |
4.4 mcr-1的流行性分析 | 第47-48页 |
4.5 mcr-1的基因环境分析 | 第48页 |
4.6 mcr-1与其他耐药基因共存 | 第48-50页 |
5 结论 | 第50-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-61页 |
附录 | 第61-62页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第62页 |