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肌节同源盒蛋白同系物2(Msx2)对小鼠晶状体早期形态发育的转录调控作用

摘要第4-7页
Abstract第7-12页
英文缩略语第13-17页
第一部分 :肌节同源盒基因同系物2条件基因敲除小鼠晶状体早期发育过程变化的研究第17-33页
    1 前言第17-18页
    2 材料与方法第18-23页
        2.1 实验材料第18-19页
            2.1.1 实验动物第18页
            2.1.2 实验试剂第18-19页
            2.1.3 实验设备第19页
        2.2 实验方法第19-23页
            2.2.1 实验主要试剂的配制第19页
            2.2.2 小鼠胚胎标本制备第19-20页
            2.2.3 小鼠或胚鼠基因组DNA提取和基因型鉴定第20页
            2.2.4 LacZ报道基因活性全胚染色第20-21页
            2.2.5 苏木素-伊红染色观察Msx2cko小鼠晶状体发育过程的变化第21页
            2.2.6 免疫组织化学方法观察Msx2基因敲除小鼠晶状体细胞BrdU标记的变化第21-22页
            2.2.7 利用Tunel方法检测Msx2cko小鼠晶状体组织细胞凋亡的变化第22-23页
    3 结果第23-30页
        3.1 Cre/loxp系统介导的Msx2条件性基因敲除第23-25页
        3.2 Msx2cko小鼠晶状体的早期发育第25-28页
        3.3 凋亡增加也会引起晶状体发育迟缓第28-30页
    4 讨论第30-32页
    5 结论第32-33页
第二部分 :肌节同源盒基因同系物2对晶状体发育的转录调控作用第33-48页
    1 前言第33-34页
    2 材料与方法第34-40页
        2.1 实验材料第34-35页
            2.1.1 实验动物第34页
            2.1.2 实验设备第34页
            2.1.3 实验细胞、试剂第34-35页
        2.2 实验方法第35-40页
            2.2.1 实验主要试剂的配制第35页
            2.2.2 RNA探针制作第35-36页
            2.2.3 胚胎准备第36-37页
            2.2.4 整胚包埋小鼠胚胎标本原位杂交染色第37-38页
            2.2.5 免疫荧光第38-39页
            2.2.6 统计分析晶状体细胞的增殖与凋亡第39页
            2.2.7 小鼠晶状体基因芯片microarray分析第39页
            2.2.8 实时定量PCR分析验证凋亡相关的差异表达基因第39页
            2.2.9 应用GraphpadPrism5.0统计分析软件进行统计学分析第39-40页
    3 结果第40-45页
        3.1 Msx2对FoxE3的转录调节作用第40-41页
        3.2 Pax6、Sox2、Ap2α和β-晶体蛋白的表达第41页
        3.3 基因芯片检测结果第41-44页
        3.4 实时定量PCR结果第44-45页
    4 讨论第45-47页
    5 结论第47-48页
第三部分 :对Doxycycline诱导表达Msx2-GFP的Alpha-TN4细胞株的蛋白质组研究第48-55页
    1 前言第48-49页
    2 材料与方法第49-51页
        2.1 实验材料第49-50页
            2.1.1 细胞第49页
            2.1.2 主要实验仪器与设备第49页
            2.1.3 试剂第49-50页
        2.2 实验方法第50-51页
            2.2.1 细胞培养及诱导第50页
            2.2.2 蛋白提取第50页
            2.2.3 固相pH梯度双向凝胶电泳第50-51页
    3 实验结果第51-53页
        3.1 共聚焦免疫荧光显微镜检测Doxycycline诱导细胞株表达Msx2-GFP第51页
        3.2 双向电泳结果第51-53页
    4 讨论第53-54页
    5 结论第54-55页
本研究创新性的自我评价第55-56页
参考文献第56-60页
综述第60-70页
    参考文献第67-70页
攻读学位期间取得的研究成果第70-71页
致谢第71-72页
个人简介第72页

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