摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-12页 |
英文缩略语 | 第13-17页 |
第一部分 :肌节同源盒基因同系物2条件基因敲除小鼠晶状体早期发育过程变化的研究 | 第17-33页 |
1 前言 | 第17-18页 |
2 材料与方法 | 第18-23页 |
2.1 实验材料 | 第18-19页 |
2.1.1 实验动物 | 第18页 |
2.1.2 实验试剂 | 第18-19页 |
2.1.3 实验设备 | 第19页 |
2.2 实验方法 | 第19-23页 |
2.2.1 实验主要试剂的配制 | 第19页 |
2.2.2 小鼠胚胎标本制备 | 第19-20页 |
2.2.3 小鼠或胚鼠基因组DNA提取和基因型鉴定 | 第20页 |
2.2.4 LacZ报道基因活性全胚染色 | 第20-21页 |
2.2.5 苏木素-伊红染色观察Msx2cko小鼠晶状体发育过程的变化 | 第21页 |
2.2.6 免疫组织化学方法观察Msx2基因敲除小鼠晶状体细胞BrdU标记的变化 | 第21-22页 |
2.2.7 利用Tunel方法检测Msx2cko小鼠晶状体组织细胞凋亡的变化 | 第22-23页 |
3 结果 | 第23-30页 |
3.1 Cre/loxp系统介导的Msx2条件性基因敲除 | 第23-25页 |
3.2 Msx2cko小鼠晶状体的早期发育 | 第25-28页 |
3.3 凋亡增加也会引起晶状体发育迟缓 | 第28-30页 |
4 讨论 | 第30-32页 |
5 结论 | 第32-33页 |
第二部分 :肌节同源盒基因同系物2对晶状体发育的转录调控作用 | 第33-48页 |
1 前言 | 第33-34页 |
2 材料与方法 | 第34-40页 |
2.1 实验材料 | 第34-35页 |
2.1.1 实验动物 | 第34页 |
2.1.2 实验设备 | 第34页 |
2.1.3 实验细胞、试剂 | 第34-35页 |
2.2 实验方法 | 第35-40页 |
2.2.1 实验主要试剂的配制 | 第35页 |
2.2.2 RNA探针制作 | 第35-36页 |
2.2.3 胚胎准备 | 第36-37页 |
2.2.4 整胚包埋小鼠胚胎标本原位杂交染色 | 第37-38页 |
2.2.5 免疫荧光 | 第38-39页 |
2.2.6 统计分析晶状体细胞的增殖与凋亡 | 第39页 |
2.2.7 小鼠晶状体基因芯片microarray分析 | 第39页 |
2.2.8 实时定量PCR分析验证凋亡相关的差异表达基因 | 第39页 |
2.2.9 应用GraphpadPrism5.0统计分析软件进行统计学分析 | 第39-40页 |
3 结果 | 第40-45页 |
3.1 Msx2对FoxE3的转录调节作用 | 第40-41页 |
3.2 Pax6、Sox2、Ap2α和β-晶体蛋白的表达 | 第41页 |
3.3 基因芯片检测结果 | 第41-44页 |
3.4 实时定量PCR结果 | 第44-45页 |
4 讨论 | 第45-47页 |
5 结论 | 第47-48页 |
第三部分 :对Doxycycline诱导表达Msx2-GFP的Alpha-TN4细胞株的蛋白质组研究 | 第48-55页 |
1 前言 | 第48-49页 |
2 材料与方法 | 第49-51页 |
2.1 实验材料 | 第49-50页 |
2.1.1 细胞 | 第49页 |
2.1.2 主要实验仪器与设备 | 第49页 |
2.1.3 试剂 | 第49-50页 |
2.2 实验方法 | 第50-51页 |
2.2.1 细胞培养及诱导 | 第50页 |
2.2.2 蛋白提取 | 第50页 |
2.2.3 固相pH梯度双向凝胶电泳 | 第50-51页 |
3 实验结果 | 第51-53页 |
3.1 共聚焦免疫荧光显微镜检测Doxycycline诱导细胞株表达Msx2-GFP | 第51页 |
3.2 双向电泳结果 | 第51-53页 |
4 讨论 | 第53-54页 |
5 结论 | 第54-55页 |
本研究创新性的自我评价 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-60页 |
综述 | 第60-70页 |
参考文献 | 第67-70页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第70-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
个人简介 | 第72页 |