摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
第一章 文献综述 | 第12-25页 |
1 植物激素定义及种类 | 第12页 |
2 油菜素内酯研究进展 | 第12-21页 |
2.1 油菜素内酯发现历史 | 第12-14页 |
2.2 油菜素内酯化学结构 | 第14页 |
2.3 BR生理功能与应用 | 第14-18页 |
2.3.1 BR与植物细胞伸长和分裂 | 第15-16页 |
2.3.2 BR与植物光形态建成 | 第16页 |
2.3.3 BR对植物抗逆性的影响 | 第16-17页 |
2.3.4 BR对植物生殖发育和衰老影响 | 第17页 |
2.3.5 BR在生产中的应用 | 第17-18页 |
2.4 油菜素内酯信号转导 | 第18-19页 |
2.5 油菜素内酯受体蛋白 | 第19-21页 |
2.5.1 BRI1的发现 | 第19-20页 |
2.5.2 BRI1结构与作用 | 第20页 |
2.5.3 BRI1基因表达与功能 | 第20-21页 |
3 杜仲研究进展 | 第21-23页 |
3.1 杜仲生物学形态特征 | 第22页 |
3.2 杜仲药用研究进展 | 第22-23页 |
3.3 杜仲胶用研究进展 | 第23页 |
4 本研究的目的及意义 | 第23-25页 |
第二章 杜仲BR受体蛋白基因克隆及生物信息学分析 | 第25-42页 |
1 前言 | 第25-26页 |
2 材料与方法 | 第26-34页 |
2.1 实验材料 | 第26-27页 |
2.1.1 材料 | 第26页 |
2.1.2 主要试剂及培养基 | 第26-27页 |
2.1.3 仪器设备 | 第27页 |
2.2 实验方法 | 第27-34页 |
2.2.1 EuBRI1基因PCR引物设计 | 第27-28页 |
2.2.2 杜仲DNA提取及cDNA制备 | 第28-30页 |
2.2.3 目的片段扩增 | 第30-31页 |
2.2.4 目的片段胶回、连接及转化 | 第31-32页 |
2.2.5 重组子筛选与测序 | 第32-34页 |
2.2.6 EuBRI基因生物信息学分析 | 第34页 |
3 结果与分析 | 第34-40页 |
3.1 杜仲DNA提取 | 第34-35页 |
3.2 杜仲RNA提取 | 第35页 |
3.3 杜仲EuBRI1基因克隆 | 第35-36页 |
3.4 杜仲EuBRI1生物信息学分析 | 第36-40页 |
4 讨论 | 第40-42页 |
第三章 杜仲EuBRI1基因时空表达分析 | 第42-52页 |
1 前言 | 第42页 |
2 材料与方法 | 第42-46页 |
2.1 植物材料 | 第42页 |
2.2 主要试剂 | 第42-43页 |
2.3 主要仪器 | 第43页 |
2.4 EuBRI1基因荧光定量PCR引物设计 | 第43页 |
2.5 杜仲RNA提取及反转录 | 第43-44页 |
2.6 EuBRI1基因实时定量分析 | 第44-46页 |
3 结果分析 | 第46-50页 |
3.1 EuBRI1基因在杜仲不同部位中表达分析 | 第46-48页 |
3.2 EuBRI1基因在杜仲茎皮和叶不同生长时间的表达分析 | 第48-50页 |
3.3 EuBRI1基因在杜仲果不同发育时期表达分析 | 第50页 |
4 讨论 | 第50-52页 |
第四章 EuBRI1过表达载体遗传转化 | 第52-67页 |
1 前言 | 第52页 |
2 材料 | 第52-54页 |
2.1 实验材料 | 第52-53页 |
2.2 主要试剂及配方 | 第53-54页 |
2.3 主要仪器及设备 | 第54页 |
3 实验方法 | 第54-60页 |
3.1 pSH-35S-EuBRI1质粒扩繁 | 第54-55页 |
3.1.1 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第54-55页 |
3.1.2 大肠杆菌感受态细胞的DNA转化 | 第55页 |
3.1.3 质粒DNA提取 | 第55页 |
3.1.4 阳性克隆菌种的保存 | 第55页 |
3.2 农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第55-57页 |
3.2.1 农杆菌感受态细胞的制备 | 第55-56页 |
3.2.2 pSH-35S-EuBRI1转化农杆菌感受态细胞 | 第56页 |
3.2.3 含重组质粒的农杆菌菌液PCR鉴定 | 第56-57页 |
3.3 花絮浸染法遗传转化拟南芥 | 第57-58页 |
3.3.1 拟南芥培养 | 第57-58页 |
3.3.2 遗传转化拟南芥 | 第58页 |
3.4 转基因株系筛选及鉴定 | 第58-60页 |
3.4.1 转基因株系筛选 | 第58-59页 |
3.4.2 转基因株系鉴定 | 第59页 |
3.4.3 转基因植株EuBRI1基因表达量分析 | 第59-60页 |
4 结果分析 | 第60-65页 |
4.1 农杆菌质粒PCR鉴定 | 第60-61页 |
4.2 转基因株系筛选及鉴定 | 第61-63页 |
4.3 转基因植株表型分析 | 第63-65页 |
5 讨论 | 第65-67页 |
第五章 结论、创新与展望 | 第67-69页 |
1 结论 | 第67-68页 |
2 创新 | 第68页 |
3 展望 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-77页 |
缩略词表 | 第77-79页 |
附录 | 第79-80页 |
致谢 | 第80-83页 |