| 摘要 | 第3-8页 |
| ABSTRACT | 第8-12页 |
| 第1章 引言 | 第16-26页 |
| 第2章 实验材料 | 第26-32页 |
| 2.1 实验仪器及分析软件 | 第26-27页 |
| 2.2 实验试剂 | 第27-31页 |
| 2.2.1 组织RNA提取试剂 | 第27-28页 |
| 2.2.2 常规PCR和电泳试剂 | 第28-29页 |
| 2.2.3 PCR产物纯化、基因克隆、细菌培养与质粒抽提试剂 | 第29-30页 |
| 2.2.4 养鱼用试剂 | 第30页 |
| 2.2.5 原位杂交试剂 | 第30-31页 |
| 2.2.6 显微注射的材料和试剂 | 第31页 |
| 2.2.7 茜素红染色试剂 | 第31页 |
| 2.3 实验动物 | 第31-32页 |
| 第3章 实验方法 | 第32-45页 |
| 3.1 技术路线图 | 第32-33页 |
| 3.2 观察斑马鱼牙齿的发育 | 第33页 |
| 3.2.1 茜素红染色 | 第33页 |
| 3.2.2 HE切片染色 | 第33页 |
| 3.2.3 扫描电镜 | 第33页 |
| 3.3 RT-PCR检测同源基因在斑马鱼中的表达 | 第33-35页 |
| 3.3.1 斑马鱼总RNA抽提 | 第33-34页 |
| 3.3.2 RNA浓度测定 | 第34页 |
| 3.3.3 逆转录合成cDNA | 第34-35页 |
| 3.3.4 引物设计、RT-PCR扩增 | 第35页 |
| 3.4 合成原位杂交探针 | 第35-41页 |
| 3.4.1 引物设计、PCR扩增、产物纯化 | 第35-37页 |
| 3.4.2 基因克隆 | 第37-39页 |
| 3.4.3 质粒DNA的小量制备 | 第39-40页 |
| 3.4.4 体外合成反义RNA探针 | 第40-41页 |
| 3.5 原位杂交 | 第41-42页 |
| 3.6 体外合成C32基因的mRNA | 第42-43页 |
| 3.7 显微注射 | 第43-44页 |
| 3.7.1 拉针、断针与上样 | 第43页 |
| 3.7.2 注射 | 第43-44页 |
| 3.7.3 合成MO | 第44页 |
| 3.8 结果分析 | 第44-45页 |
| 第4章 实验结果 | 第45-56页 |
| 4.1 斑马鱼牙齿的观察结果 | 第45-47页 |
| 4.2 确定同源基因的拷贝数 | 第47-48页 |
| 4.3 RT-PCR检测同源基因表达 | 第48-49页 |
| 4.4 原位杂交检测同源基因的时空表达谱 | 第49-51页 |
| 4.5 敲低表达的结果 | 第51-54页 |
| 4.6 拯救实验和过量表达的结果 | 第54-56页 |
| 第5章 分析与讨论 | 第56-60页 |
| 5.1 斑马鱼牙齿的观察 | 第56页 |
| 5.2 同源基因时空表达谱的检测 | 第56-58页 |
| 5.3 同源基因功能作用的研究 | 第58-60页 |
| 第6章 结论 | 第60-61页 |
| 第7章 参考文献 | 第61-63页 |
| 附录 | 第63-77页 |
| 附录一 pBSK- Vector载体序列信息 | 第63-66页 |
| 附录二 pCS2+ Vector载体序列信息 | 第66-69页 |
| 附录三 C32基因在各物种中的同源基因的比对结果 | 第69-73页 |
| 附录四 斑马鱼中同源基因之间的比对结果 | 第73-76页 |
| 附录五 zgc:153440的cDNA序列 | 第76-77页 |
| 英文缩略词表 | 第77-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |