摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6页 |
1 橡胶树白粉菌研究进展 | 第9-15页 |
1.1 橡胶树及橡胶树白粉病的防治 | 第9-10页 |
1.2 真菌交配型基因及橡胶树白粉菌相关研究 | 第10-13页 |
1.2.1 真菌交配型基因的发现及命名 | 第10页 |
1.2.2 真菌交配型基因功能研究进展 | 第10-13页 |
1.2.3 橡胶树白粉菌交配型基因的研究 | 第13页 |
1.3 实时荧光定量PCR概述 | 第13-15页 |
1.3.1 实时荧光PCR原理 | 第13-14页 |
1.3.2 实时荧光定量PCR的应用 | 第14-15页 |
2 本研究目的意义 | 第15-16页 |
3 技术路线 | 第16-17页 |
4 研究内容 | 第17-18页 |
5 材料与方法 | 第18-22页 |
5.1 供试材料 | 第18-19页 |
5.1.1 橡胶树品系 | 第18页 |
5.1.2 供试菌株 | 第18-19页 |
5.2 实验仪器及试剂 | 第19-22页 |
5.2.1 实验仪器 | 第19-20页 |
5.2.2 实验试剂 | 第20-22页 |
6 实验方法 | 第22-29页 |
6.1 橡胶树白粉菌总DNA和RNA的提取 | 第22-24页 |
6.1.1 橡胶树白粉菌总DNA的提取 | 第22页 |
6.1.2 橡胶树白粉菌总RNA的提取 | 第22-24页 |
6.2 橡胶白粉菌RNA质量检测及反转录 | 第24页 |
6.3 橡胶树白粉菌交配型基因的引物设计 | 第24-25页 |
6.4 橡胶树白粉菌交配型相关基因DNA和cDNA片段序列的PCR扩增 | 第25页 |
6.5 目的片段克隆与测序 | 第25-26页 |
6.5.1 PCR产物回收及回收产物与载体连接 | 第25-26页 |
6.5.2 E.coli DH5α感受态细胞转化及测序 | 第26页 |
6.6 构建MAT基因编码氨基酸序列系统发育树 | 第26-27页 |
6.7 生物信息学分析 | 第27页 |
6.8 橡胶白粉菌交配型相关基因的实时荧光定量 | 第27-29页 |
6.8.1 橡胶树白粉菌交配型实时荧光定量引物的设计与检测 | 第27-28页 |
6.8.2 橡胶树白粉菌交配型相关基因实时荧光定量方法 | 第28-29页 |
7 结果与分析 | 第29-63页 |
7.1 橡胶树白粉菌总DNA和总RNA的提取 | 第29-30页 |
7.2 橡胶树白粉菌MAT基因DNA和cDNA序列的获得 | 第30-32页 |
7.3 MAT基因氨基酸序列系统发育树 | 第32-34页 |
7.4 蛋白质预测分析 | 第34-48页 |
7.4.1 OH-MAT2蛋白质序列分析 | 第34-38页 |
7.4.2 OH-MAT1-2蛋白质序列分析 | 第38-43页 |
7.4.3 OH-MAT1-1蛋白质序列分析 | 第43-48页 |
7.4.4 OH-MAT2、OH-MAT1-2、OH-MAT1-1基因小结 | 第48页 |
7.5 橡胶树白粉菌不同侵染时间MAT基因表达分析 | 第48-55页 |
7.5.1 橡胶树白粉菌不同侵染时间OH-MAT2基因表达分析 | 第48-50页 |
7.5.2 橡胶树白粉菌不同侵染时间OH-MAT1-2基因表达分析 | 第50-52页 |
7.5.3 橡胶树白粉菌不同侵染时间OH- MAT1-1基因表达分析 | 第52-54页 |
7.5.4 OH-MAT2、OH-MAT1-2、OH-MAT1-1基因表达分析小结 | 第54-55页 |
7.6 不同地点橡胶树白粉菌MAT基因比对分析 | 第55-63页 |
7.6.1 不同地点橡胶树白粉菌的克隆与进化分析 | 第55-59页 |
7.6.2 不同橡胶树白粉菌之间的比较与分析 | 第59-62页 |
7.6.3 不同地点橡胶树白粉菌的克隆与进化分析小结 | 第62-63页 |
8 结论与讨论 | 第63-66页 |
8.1 结果分析 | 第63页 |
8.2 与不同真菌之间MAT基因的比较分析 | 第63-66页 |
参考文献 | 第66-69页 |
附录 | 第69-79页 |
致谢 | 第79页 |