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橡胶树白粉菌MAT相关基因(STE2,HMG,Alpha-box)的克隆和表达分析

摘要第5-6页
Abstract第6页
1 橡胶树白粉菌研究进展第9-15页
    1.1 橡胶树及橡胶树白粉病的防治第9-10页
    1.2 真菌交配型基因及橡胶树白粉菌相关研究第10-13页
        1.2.1 真菌交配型基因的发现及命名第10页
        1.2.2 真菌交配型基因功能研究进展第10-13页
        1.2.3 橡胶树白粉菌交配型基因的研究第13页
    1.3 实时荧光定量PCR概述第13-15页
        1.3.1 实时荧光PCR原理第13-14页
        1.3.2 实时荧光定量PCR的应用第14-15页
2 本研究目的意义第15-16页
3 技术路线第16-17页
4 研究内容第17-18页
5 材料与方法第18-22页
    5.1 供试材料第18-19页
        5.1.1 橡胶树品系第18页
        5.1.2 供试菌株第18-19页
    5.2 实验仪器及试剂第19-22页
        5.2.1 实验仪器第19-20页
        5.2.2 实验试剂第20-22页
6 实验方法第22-29页
    6.1 橡胶树白粉菌总DNA和RNA的提取第22-24页
        6.1.1 橡胶树白粉菌总DNA的提取第22页
        6.1.2 橡胶树白粉菌总RNA的提取第22-24页
    6.2 橡胶白粉菌RNA质量检测及反转录第24页
    6.3 橡胶树白粉菌交配型基因的引物设计第24-25页
    6.4 橡胶树白粉菌交配型相关基因DNA和cDNA片段序列的PCR扩增第25页
    6.5 目的片段克隆与测序第25-26页
        6.5.1 PCR产物回收及回收产物与载体连接第25-26页
        6.5.2 E.coli DH5α感受态细胞转化及测序第26页
    6.6 构建MAT基因编码氨基酸序列系统发育树第26-27页
    6.7 生物信息学分析第27页
    6.8 橡胶白粉菌交配型相关基因的实时荧光定量第27-29页
        6.8.1 橡胶树白粉菌交配型实时荧光定量引物的设计与检测第27-28页
        6.8.2 橡胶树白粉菌交配型相关基因实时荧光定量方法第28-29页
7 结果与分析第29-63页
    7.1 橡胶树白粉菌总DNA和总RNA的提取第29-30页
    7.2 橡胶树白粉菌MAT基因DNA和cDNA序列的获得第30-32页
    7.3 MAT基因氨基酸序列系统发育树第32-34页
    7.4 蛋白质预测分析第34-48页
        7.4.1 OH-MAT2蛋白质序列分析第34-38页
        7.4.2 OH-MAT1-2蛋白质序列分析第38-43页
        7.4.3 OH-MAT1-1蛋白质序列分析第43-48页
        7.4.4 OH-MAT2、OH-MAT1-2、OH-MAT1-1基因小结第48页
    7.5 橡胶树白粉菌不同侵染时间MAT基因表达分析第48-55页
        7.5.1 橡胶树白粉菌不同侵染时间OH-MAT2基因表达分析第48-50页
        7.5.2 橡胶树白粉菌不同侵染时间OH-MAT1-2基因表达分析第50-52页
        7.5.3 橡胶树白粉菌不同侵染时间OH- MAT1-1基因表达分析第52-54页
        7.5.4 OH-MAT2、OH-MAT1-2、OH-MAT1-1基因表达分析小结第54-55页
    7.6 不同地点橡胶树白粉菌MAT基因比对分析第55-63页
        7.6.1 不同地点橡胶树白粉菌的克隆与进化分析第55-59页
        7.6.2 不同橡胶树白粉菌之间的比较与分析第59-62页
        7.6.3 不同地点橡胶树白粉菌的克隆与进化分析小结第62-63页
8 结论与讨论第63-66页
    8.1 结果分析第63页
    8.2 与不同真菌之间MAT基因的比较分析第63-66页
参考文献第66-69页
附录第69-79页
致谢第79页

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