摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
主要符号表 | 第12-13页 |
前言 | 第13-19页 |
1 镉暴露途径与现状 | 第13-14页 |
2 镉的雌激素作用 | 第14-15页 |
3 环境雌激素与乳腺癌 | 第15-16页 |
4 E-screen法检测外源性雌激素 | 第16-19页 |
研究内容与方法 | 第19-31页 |
1 主要试剂与仪器 | 第19-22页 |
1.1 细胞来源 | 第19页 |
1.2 主要仪器及材料 | 第19页 |
1.3 主要试剂 | 第19-20页 |
1.4 主要试剂配制 | 第20-22页 |
2 实验方法 | 第22-29页 |
2.1 细胞常规培养 | 第22-23页 |
2.1.1 细胞冻存与复苏 | 第22页 |
2.1.2 细胞换液与传代 | 第22-23页 |
2.2 细胞去雌激素培养 | 第23页 |
2.3 筛选出雌激素敏感性人乳腺癌MCF-7细胞 | 第23-24页 |
2.4 镉促进人乳腺癌MCF-7细胞增殖的敏感浓度及作用时间 | 第24页 |
2.5 镉对人乳腺癌MCF-7细胞集落形成能力的影响 | 第24-25页 |
2.6 雌激素受体抑制剂无毒性作用浓度的测定 | 第25页 |
2.7 雌激素受体抑制剂对镉致人乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响 | 第25-26页 |
2.8 镉对人乳腺癌MCF-7细胞周期的影响 | 第26-27页 |
2.9 镉对人乳腺癌MCF-7细胞雌激素受体蛋白表达的影响 | 第27-29页 |
2.9.1 细胞处理与蛋白提取 | 第27页 |
2.9.2 标准曲线绘制与蛋白定量 | 第27-28页 |
2.9.3 SDS-PAGE电泳与转膜 | 第28页 |
2.9.4 免疫反应与化学显影 | 第28-29页 |
3 统计学分析 | 第29-31页 |
结果 | 第31-41页 |
1 人乳腺癌MCF-7细胞去雌激素培养 | 第31页 |
2 筛选出雌激素敏感人乳腺癌MCF-7细胞 | 第31-32页 |
3 镉诱导人乳腺癌MCF-7细胞增殖 | 第32-34页 |
3.1 镉促进人乳腺癌MCF-7细胞增殖的时间及浓度 | 第32-34页 |
3.2 镉促进人乳腺癌MCF-7细胞的集落形成 | 第34页 |
4 镉具有类雌激素样作用 | 第34-41页 |
4.1 雌激素受体抑制剂对人乳腺癌MCF-7细胞无毒性作用浓度 | 第34-35页 |
4.2 雌激素受体抑制剂拮抗镉对细胞的促进增殖作用 | 第35-36页 |
4.3 雌激素受体抑制剂拮抗镉促进的细胞S期比例增加 | 第36-38页 |
4.4 雌激素受体抑制剂拮抗镉诱导的雌激素受体蛋白增高 | 第38-41页 |
讨论 | 第41-51页 |
1 国内外外源性雌激素检测标准 | 第41页 |
2 常用外源性雌激素检测方法 | 第41-44页 |
2.1 体内实验方法检测外源性雌激素 | 第42页 |
2.2 体外实验方法检测外源性雌激素 | 第42-43页 |
2.3 E-screen法的优点与局限 | 第43-44页 |
3 镉促进人乳腺癌MCF-7细胞增殖 | 第44-46页 |
4 镉具有类雌激素样作用 | 第46-51页 |
4.1 雌激素受体抑制剂对镉促进细胞周期的影响 | 第46-47页 |
4.2 雌激素受体抑制剂对镉促进细胞ER表达的影响 | 第47-51页 |
结论 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
附录 | 第58-59页 |