| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 缩略词表 | 第11-15页 |
| 1 前言 | 第15-17页 |
| 2 材料 | 第17-25页 |
| 2.1 实验材料 | 第17页 |
| 2.2 主要仪器设备 | 第17-18页 |
| 2.3 主要试剂 | 第18-19页 |
| 2.4 主要试剂的配制 | 第19-25页 |
| 3 实验方法 | 第25-37页 |
| 3.1 大鼠心肌缺血/再灌注模型的构建 | 第25-28页 |
| 3.1.1 大鼠心肌缺血/再灌注模型的构建 | 第25页 |
| 3.1.2 TTC染色 | 第25页 |
| 3.1.3 HE染色 | 第25-26页 |
| 3.1.4 免疫组化 | 第26-27页 |
| 3.1.5 TUNEL | 第27页 |
| 3.1.6 血清样本收集 | 第27页 |
| 3.1.7 NO检测 | 第27-28页 |
| 3.1.8 ET-1检测 | 第28页 |
| 3.2 CMECs的分离、鉴定 | 第28-30页 |
| 3.2.1 CMECs的分离 | 第28-29页 |
| 3.2.2 CMECs的传代 | 第29页 |
| 3.2.3 CMECs的复苏与冻存 | 第29页 |
| 3.2.4 CMECs细胞鉴定 | 第29-30页 |
| 3.3 CMECs缺氧/复氧模型的构建 | 第30-31页 |
| 3.3.1 构建CMECs缺氧/复氧模型 | 第30-31页 |
| 3.3.2 LDH检测 | 第31页 |
| 3.3.3 MTS检测 | 第31页 |
| 3.4 H9c2缺氧/复氧模型的构建 | 第31页 |
| 3.5 CMECs与H9c2共培养体系 | 第31-32页 |
| 3.5.1 H9c2与CMECs共培养 | 第31-32页 |
| 3.5.2 CMECs与H9c2共培养 | 第32页 |
| 3.6 RT-PCR | 第32-33页 |
| 3.6.1 细胞RNA提取 | 第32页 |
| 3.6.2 cDNA反转录 | 第32-33页 |
| 3.6.3 实时荧光定量PCR(Real-Time PCR) | 第33页 |
| 3.7 Western Blotting | 第33-35页 |
| 3.7.1 细胞蛋白提取 | 第33页 |
| 3.7.2 BCA法测定样品蛋白质浓度 | 第33页 |
| 3.7.3 免疫印迹 | 第33-35页 |
| 3.8 统计学分析 | 第35-37页 |
| 4 实验结果 | 第37-55页 |
| 4.1 成功建立大鼠心肌I/R模型 | 第37-41页 |
| 4.1.1 TTC染色鉴定大鼠心肌I/R模型 | 第37-38页 |
| 4.1.2 I/R诱导心脏形态异变 | 第38页 |
| 4.1.3 I/R诱导心脏组织心肌和内皮细胞凋亡 | 第38-39页 |
| 4.1.4 I/R诱导心脏炎性相关因子表达升高 | 第39-40页 |
| 4.1.5 I/R诱导大鼠NO/ET-1的比值降低 | 第40-41页 |
| 4.2 CMECs的分离与鉴定 | 第41-43页 |
| 4.2.1 CMECs分离 | 第41页 |
| 4.2.2 CMECs荧光鉴定 | 第41-42页 |
| 4.2.3 CMECs功能鉴定 | 第42-43页 |
| 4.3 成功建立CMECs缺氧/复氧损伤模型 | 第43-45页 |
| 4.3.1 CMECs缺氧/复氧损模型的构建 | 第43页 |
| 4.3.2 H/R降低CMECs血管形成能力 | 第43-45页 |
| 4.3.3 H/R诱导CMECs的炎性相关因子表达升高 | 第45页 |
| 4.4 成功建立H9c2缺氧/复氧损伤模型 | 第45-47页 |
| 4.4.1 H9c2缺氧/复氧模型的构建 | 第45-46页 |
| 4.4.2 H/R诱导H9c2的炎性相关因子表达上升 | 第46-47页 |
| 4.5 CMECs与H9c2共培养 | 第47-50页 |
| 4.5.1 CMECs缺氧/复氧损伤后上清促进H9c2的增殖 | 第47-48页 |
| 4.5.2 CMECs缺氧/复氧损伤后上清减轻H9c2H/R损伤 | 第48页 |
| 4.5.3 CMECs缺氧/复氧损伤后上清抑制H9c2炎性相关因子的表达 | 第48-49页 |
| 4.5.4 H9c2与CMECs共培养H/R后H9c2的Bak表达下降,Bcl-2表达上调 | 第49-50页 |
| 4.5.5 CMECs缺氧/复氧后NO高表达 | 第50页 |
| 4.6 H9c2与CMECs共培养 | 第50-55页 |
| 4.6.1 H9c2缺氧/复氧后上清加重CMECsH/R损伤 | 第50-51页 |
| 4.6.2 H9c2H/R损伤后上清促进CMECsH/R后炎性相关因子的表达 | 第51-52页 |
| 4.6.3 H9c2缺氧/复氧损伤后上清抑制CMECs迁移 | 第52页 |
| 4.6.4 CMECs与H9c2共培养H/R后CMECs炎性相关因子表达上调 | 第52-55页 |
| 讨论 | 第55-59页 |
| 结论 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-65页 |
| 综述 | 第65-77页 |
| 参考文献 | 第72-77页 |
| 致谢 | 第77-79页 |
| 研究生期间参与的基金项目及学术会议 | 第79-80页 |
