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过表达GATA4小鼠骨髓间充质干细胞分泌的外泌体改善心梗心功能作用及机制

摘要第6-12页
ABSTRACT第12-18页
英文缩略词表第23-24页
绪论第24-29页
第一部分 过表达GATA4小鼠骨髓间充质干细胞分泌的exosome改善心梗心功能的作用第29-75页
    第一节 材料第29-30页
        1.1 实验动物第29页
        1.2 主要试剂第29-30页
        1.3 主要仪器第30页
    第二节 方法第30-43页
        2.1 Exosome的提取方法第30-31页
        2.2 BCA检测exosome蛋白浓度第31页
        2.3 ELISA检测exosome纯度第31-32页
        2.4 电镜检测exosome形态第32-33页
        2.5 Exosome与BMSCs共培养后免疫荧光染色检测第33-34页
        2.6 Exosome与BMSCs共培养后RT-PCR检测心肌特异性分子第34-36页
        2.7 采用流式细胞技术检测细胞的凋亡率第36-37页
        2.8 Western-blot检测各凋亡因子的表达第37-39页
        2.9 心脏彩超评估心梗心功能第39-40页
        2.10 小动物活体成像评估心脏局部荧光强度第40页
        2.11 番茄凝集素评估心脏血管密度第40页
        2.12 Tunel技术评估心梗局部心肌细胞的凋亡数量第40-42页
        2.13 免疫组化技术评估心梗心肌局部c-kit数量第42-43页
    第三节 结果第43-69页
        3.1 BCA检测结果第43页
        3.2 ELISA检测结果第43-44页
        3.3 Exosome电镜结果第44-45页
        3.4 共培养后免疫荧光结果第45-49页
        3.5 RT-PCR实验结果第49-51页
        3.6 exosome抗凋亡结果第51-53页
        3.7 Western-blot结果第53-57页
        3.8 心脏彩超评估心梗心功能结果第57-62页
        3.9 小动物活体成像结果第62-64页
        3.10 番茄凝集素评估血管数量第64-66页
        3.11 Tunel技术评估心梗部位心肌细胞凋亡数量第66-68页
        3.12 免疫组化技术评估c-kit表达量结果第68-69页
    第四节 讨论第69-75页
第二部分 采用Agilent microRNA芯片检测过表达GATA4小髓间充质干细胞分泌exosome内有关细胞分化及抗凋亡的microRNA第75-101页
    第一节 材料第75-76页
        1.1 主要试剂第75页
        1.2 主要仪器设备第75-76页
    第二节 方法第76-77页
        2.1 Agilent miRNA芯片检测过程第76-77页
    第三节 结果第77-97页
        3.1 样本质检第77-78页
        3.2 原始数据第78-80页
        3.3 对原始数据行聚类分析第80-82页
        3.4 对样品行两两比较差异miRNA分析结果第82-87页
        3.5 散点图第87-91页
        3.6 过表达GATA4-BMSCsexosome与空载体-BMSCsexosome差异microRNA对有关细胞分化及抗凋亡的microRNA统计第91-93页
        3.7 根据差异microRNA完成GO分析第93页
        3.8 根据microRNA对应的靶基因完成pathway分析第93-97页
    第四节 讨论第97-101页
第三部分 采用TMT标记定量蛋白质组学分析过表达GATA4小鼠骨髓间充质干细胞分泌exosome内有关细胞分化及抗凋亡蛋白第101-131页
    第一节 材料第101-102页
        1.1 主要试剂第101-102页
        1.2 主要仪器第102页
    第二节 方法第102-106页
        2.1 样品制备第102-103页
        2.2 基于液相色谱-质谱联用技术的定量蛋白质组学研究第103-104页
        2.3 生物信息学分析第104-106页
    第三节 结果第106-126页
        3.1 技术路线第106页
        3.2 实验结果总述第106-107页
        3.3 定量数据总览第107页
        3.4 重复性分析第107-108页
        3.5 蛋白注释第108页
        3.6 差异表达蛋白的功能分类第108-118页
        3.7 差异表达蛋白的“分子功能”富集情况第118-122页
        3.8 聚类分析第122-126页
    第四节 讨论第126-131页

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