摘要 | 第6-12页 |
ABSTRACT | 第12-18页 |
英文缩略词表 | 第23-24页 |
绪论 | 第24-29页 |
第一部分 过表达GATA4小鼠骨髓间充质干细胞分泌的exosome改善心梗心功能的作用 | 第29-75页 |
第一节 材料 | 第29-30页 |
1.1 实验动物 | 第29页 |
1.2 主要试剂 | 第29-30页 |
1.3 主要仪器 | 第30页 |
第二节 方法 | 第30-43页 |
2.1 Exosome的提取方法 | 第30-31页 |
2.2 BCA检测exosome蛋白浓度 | 第31页 |
2.3 ELISA检测exosome纯度 | 第31-32页 |
2.4 电镜检测exosome形态 | 第32-33页 |
2.5 Exosome与BMSCs共培养后免疫荧光染色检测 | 第33-34页 |
2.6 Exosome与BMSCs共培养后RT-PCR检测心肌特异性分子 | 第34-36页 |
2.7 采用流式细胞技术检测细胞的凋亡率 | 第36-37页 |
2.8 Western-blot检测各凋亡因子的表达 | 第37-39页 |
2.9 心脏彩超评估心梗心功能 | 第39-40页 |
2.10 小动物活体成像评估心脏局部荧光强度 | 第40页 |
2.11 番茄凝集素评估心脏血管密度 | 第40页 |
2.12 Tunel技术评估心梗局部心肌细胞的凋亡数量 | 第40-42页 |
2.13 免疫组化技术评估心梗心肌局部c-kit数量 | 第42-43页 |
第三节 结果 | 第43-69页 |
3.1 BCA检测结果 | 第43页 |
3.2 ELISA检测结果 | 第43-44页 |
3.3 Exosome电镜结果 | 第44-45页 |
3.4 共培养后免疫荧光结果 | 第45-49页 |
3.5 RT-PCR实验结果 | 第49-51页 |
3.6 exosome抗凋亡结果 | 第51-53页 |
3.7 Western-blot结果 | 第53-57页 |
3.8 心脏彩超评估心梗心功能结果 | 第57-62页 |
3.9 小动物活体成像结果 | 第62-64页 |
3.10 番茄凝集素评估血管数量 | 第64-66页 |
3.11 Tunel技术评估心梗部位心肌细胞凋亡数量 | 第66-68页 |
3.12 免疫组化技术评估c-kit表达量结果 | 第68-69页 |
第四节 讨论 | 第69-75页 |
第二部分 采用Agilent microRNA芯片检测过表达GATA4小髓间充质干细胞分泌exosome内有关细胞分化及抗凋亡的microRNA | 第75-101页 |
第一节 材料 | 第75-76页 |
1.1 主要试剂 | 第75页 |
1.2 主要仪器设备 | 第75-76页 |
第二节 方法 | 第76-77页 |
2.1 Agilent miRNA芯片检测过程 | 第76-77页 |
第三节 结果 | 第77-97页 |
3.1 样本质检 | 第77-78页 |
3.2 原始数据 | 第78-80页 |
3.3 对原始数据行聚类分析 | 第80-82页 |
3.4 对样品行两两比较差异miRNA分析结果 | 第82-87页 |
3.5 散点图 | 第87-91页 |
3.6 过表达GATA4-BMSCsexosome与空载体-BMSCsexosome差异microRNA对有关细胞分化及抗凋亡的microRNA统计 | 第91-93页 |
3.7 根据差异microRNA完成GO分析 | 第93页 |
3.8 根据microRNA对应的靶基因完成pathway分析 | 第93-97页 |
第四节 讨论 | 第97-101页 |
第三部分 采用TMT标记定量蛋白质组学分析过表达GATA4小鼠骨髓间充质干细胞分泌exosome内有关细胞分化及抗凋亡蛋白 | 第101-131页 |
第一节 材料 | 第101-102页 |
1.1 主要试剂 | 第101-102页 |
1.2 主要仪器 | 第102页 |
第二节 方法 | 第102-106页 |
2.1 样品制备 | 第102-103页 |
2.2 基于液相色谱-质谱联用技术的定量蛋白质组学研究 | 第103-104页 |
2.3 生物信息学分析 | 第104-106页 |
第三节 结果 | 第106-126页 |
3.1 技术路线 | 第106页 |
3.2 实验结果总述 | 第106-107页 |
3.3 定量数据总览 | 第107页 |
3.4 重复性分析 | 第107-108页 |
3.5 蛋白注释 | 第108页 |
3.6 差异表达蛋白的功能分类 | 第108-118页 |
3.7 差异表达蛋白的“分子功能”富集情况 | 第118-122页 |
3.8 聚类分析 | 第122-126页 |
第四节 讨论 | 第126-131页 |