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体外三维骨关节炎模型的构建与骨关节修复材料的生物学评价

摘要第5-8页
ABSTRACT第8-11页
缩略词简表第12-19页
第一章 绪论第19-46页
    1.1 引言第19页
    1.2 天然关节第19-23页
        1.2.1 关节的整体结构与功能第19-20页
        1.2.2 关节润滑系统的工作机理第20-22页
        1.2.3 关节力学支撑系统的工作机理第22-23页
    1.3 骨关节炎的发生、病理研究与治疗现状第23-34页
        1.3.1 骨关节炎的发生第23-25页
        1.3.2 骨关节炎的病理研究第25-32页
            1.3.2.1 骨关节炎的进展性加重与关节功能的丧失第25-27页
            1.3.2.2 骨关节炎中细胞因子的分泌和细胞响应第27-31页
            1.3.2.3 骨关节炎模型的研究第31-32页
        1.3.3 骨关节炎治疗的现状、瓶颈与发展趋势第32-34页
    1.4 生物材料在OA治疗中的研究与发展第34-43页
        1.4.1 关节润滑材料和软骨表层修复材料用于关节润滑的研究现状第34-37页
            1.4.1.1 人工滑液的临床使用现状第34-35页
            1.4.1.2 合成仿生滑液材料的研究现状第35-36页
            1.4.1.3 软骨表层修复材料的相关研究第36-37页
        1.4.2 组织工程化水凝胶引导软骨再生用于OA治疗的研究现状第37-41页
            1.4.2.1 水凝胶支架用于软骨修复和OA治疗第37-39页
            1.4.2.2 种子细胞用于软骨修复和OA治疗的研究状况第39-41页
            1.4.2.3 抗炎水凝胶用于OA治疗的研究第41页
        1.4.3 软骨下骨及软骨全层修复材料的研究现状第41-43页
            1.4.3.1 软骨下骨修复材料的研究现状第42页
            1.4.3.2 骨软骨一体化修复材料的研究现状第42-43页
    1.5 论文的研究目的、意义及主要内容第43-46页
第二章 体外3D骨关节炎模型的构建及其生物学特性研究第46-87页
    2.1 引言第46-47页
    2.2 材料与方法第47-58页
        2.2.1 实验材料第47-48页
        2.2.2 实验设备第48-49页
        2.2.3 实验方法第49-58页
            2.2.3.1 原代软骨细胞、病变滑膜细胞和巨噬细胞的取与培养第49页
            2.2.3.2 体外正常透明软骨模型的构建第49-50页
            2.2.3.3 体外巨噬免疫细胞的激活第50页
            2.2.3.4 体外骨关节炎模型的构建第50-52页
            2.2.3.5 扫电子显微镜测试第52页
            2.2.3.6 ELISA蛋白定量测试第52-53页
            2.2.3.7 qRT-PCR检测相关标志物的mRNA表达第53-56页
            2.2.3.8 软骨基质定量测试第56页
            2.2.3.9 组织学及免疫荧光染色检测第56-57页
            2.2.3.10 数据处理与分析第57-58页
    2.3 实验结果及讨论第58-85页
        2.3.1 体外3D炎症模型组分的选择和鉴定第58-61页
        2.3.2 体外3D骨关节炎模型的构建及炎症环境的鉴定第61-64页
        2.3.3 炎症模型中的软骨部分的组织学变化分析第64-65页
        2.3.4 炎症模型中炎症通路的激活与炎症相关因子表达情况分析第65-69页
        2.3.5 炎症模型中软骨基质合成代谢通路的相关变化分析第69-76页
        2.3.6 炎症模型中软骨基质分解代谢通路的相关变化分析第76-81页
        2.3.7 炎症模型中炎症、基质合成和分解代谢通路调控的综合分析第81-85页
    2.4 本章小结第85-87页
第三章 聚电解质仿生关节滑液体系的构建、润滑性能及生物学性能的研究第87-111页
    3.1 引言第87-89页
    3.2 材料与方法第89-95页
        3.2.1 实验材料第89-90页
        3.2.2 实验设备第90页
        3.2.3 实验方法第90-95页
            3.2.3.1 仿生滑液体系HPA/HPM的制备、存储、灭菌与溶解第90-91页
            3.2.3.2 仿生滑液体系临界胶束浓度测试第91页
            3.2.3.3 原代软骨细胞和滑膜干细胞的取第91页
            3.2.3.4 仿生滑液体系细胞增殖毒性测试第91-92页
            3.2.3.5 仿生滑液体系润滑性能测试第92-93页
            3.2.3.6 体外透明软骨模型的构建及与仿生滑液体系的共培养第93-94页
            3.2.3.7 qRT-PCR检测相关基因的mRNA表达第94页
            2.2.3.8 GAG软骨基质定量分析第94-95页
            2.2.3.9 组织学及免疫荧光染色分析第95页
            3.2.3.10 数据处理与分析第95页
    3.3 实验结果及讨论第95-109页
        3.3.1 仿生滑液组分的临界胶束浓度分析第95-96页
        3.3.2 仿生滑液组分的细胞增殖毒性分析第96-99页
        3.3.3 仿生滑液体系工作浓度的确定第99-100页
        3.3.4 仿生滑液体系的润滑性能分析第100-103页
        3.3.5 仿生滑液体系对正常软骨模型的组织学及表型影响第103-107页
        3.3.6 仿生滑液体系对正常软骨模型中滑液分泌相关表型的影响第107-108页
        3.3.7 仿生滑液体系对滑膜系统的组织表型的影响第108-109页
    3.4 本章小结第109-111页
第四章 仿生滑液体系在关节炎环境下的功能性保持及对炎症的生物学影响第111-137页
    4.1 引言第111-112页
    4.2 材料与方法第112-118页
        4.2.1 实验材料第112-113页
        4.2.2 实验设备第113页
        4.2.3 实验方法第113-118页
            4.2.3.1 体外骨关节炎模型的构建及与仿生滑液体系的共培养第113-115页
            4.2.3.2 仿生滑液体系在炎症环境下的流变学性能测试第115页
            4.2.3.3 仿生滑液体系在炎症环境下的润滑性能测试第115页
            4.2.3.4 qRT-PCR检测相关基因在mRNA水平上的表达第115-117页
            4.2.3.5 软骨基质变化定量检测第117页
            4.2.3.6 组织学及免疫荧光染色测试第117页
            4.2.3.7 酶联免疫吸附ELISA蛋白定量测试第117-118页
            4.2.3.8 数据处理与分析第118页
    4.3 实验结果及讨论第118-135页
        4.3.1 仿生滑液体系在炎症环境下的流变学性能变化分析第118-121页
        4.3.2 仿生滑液体系在炎症环境下的润滑性能变化分析第121-123页
        4.3.3 仿生滑液体系对OA模型中炎症通路及炎症微环境的影响第123-126页
        4.3.4 仿生滑液体系对OA模型中软骨组织学和基质积累的影响第126-128页
        4.3.5 仿生滑液体系对OA模型中软骨基质合成/分解代谢平衡的影响第128-135页
    4.4 本章小结第135-137页
第五章 氨基葡萄糖改性水凝胶的构建及其介导BMSCS向软骨分化的研究第137-164页
    5.1 引言第137-138页
    5.2 材料与方法第138-145页
        5.2.1 实验材料第138-139页
        5.2.2 实验设备第139-140页
        5.2.3 实验方法第140-145页
            5.2.3.1 N-丙烯酰氨基葡萄糖的制备及表征第140页
            5.2.3.2 氨基葡萄糖改性聚乙二醇水凝胶的构建第140页
            5.2.3.3 骨髓间充质干细胞和成软骨细胞系ATDC5的培养第140-141页
            5.2.3.4 N-丙烯酰胺基葡萄糖的细胞毒性检测及诱导ATDC5软骨分化第141页
            5.2.3.5 氨基葡萄糖改性水凝胶内细胞增殖分析及诱导软骨分化第141-142页
            5.2.3.6 氨基葡萄糖改性水凝胶的力学性能分析第142页
            5.2.3.7 qRT-PCR检测相关mRNA表达第142-144页
            5.2.3.8 软骨基质定量测试第144页
            5.2.3.9 组织学及免疫组织化学染色测试第144页
            5.2.3.10 改性氨糖水凝胶小鼠皮下培植实验第144-145页
            5.2.3.11 数据处理与分析第145页
    5.3 实验结果及讨论第145-163页
        5.3.1 N-丙烯酰胺基葡萄糖的结构与细胞相容性第145-148页
        5.3.2 N-丙烯酰胺基葡萄糖对软骨分化的作用分析第148-150页
        5.3.3 氨基葡萄糖改性PEG水凝胶的结构与组分表征第150-152页
        5.3.4 氨基葡萄糖改性PEG水凝胶对细胞增殖的影响第152-154页
        5.3.5 氨基葡萄糖改性PEG水凝胶介导hBMSCs向软骨分化分析第154-158页
        5.3.6 氨基葡萄糖改性水凝胶对软骨分化中基质异化和炎症的影响第158-161页
        5.3.7 氨基葡萄糖改性PEG水凝胶小鼠皮下异位成软骨分析第161-163页
    5.4 本章小结第163-164页
第六章 β-TCP/PVA双层一体化凝胶用于软骨全层修复的研究第164-179页
    6.1 引言第164-165页
    6.2 材料与方法第165-169页
        6.2.1 实验材料第165-166页
        6.2.2 实验设备第166页
        6.2.3 实验方法第166-169页
            6.2.3.1 β-TCP/PVA双层一体化水凝胶的制备第166-167页
            6.2.3.2 一体化水凝胶的润滑性能分析第167页
            6.2.3.3 一体化水凝胶上层软骨细胞贴附性能表征第167页
            6.2.3.4 一体化水凝胶下层诱导间充质干细胞成骨分化第167页
            6.2.3.5 qRT-PCR检测相关mRNA表达第167-168页
            6.2.3.6 钙沉积定量分析第168-169页
            6.2.3.7 组织学及免疫组织化学分析第169页
            6.2.3.8 数据处理与分析第169页
    6.3 实验结果及讨论第169-177页
        6.3.1 β-TCP/PVA双层一体化水凝胶的组分与结构分析第169-171页
        6.3.2 β-TCP/PVA一体化水凝胶上层润滑性能分析第171-172页
        6.3.3 β-TCP/PVA一体化水凝胶对软骨细胞贴附的影响第172-175页
        6.3.4 β-TCP/PVA一体化水凝胶下层对间充质干细胞成骨分化的影响第175-177页
    6.4 本章小结第177-179页
结论第179-181页
展望第181-182页
论文创新性第182-183页
参考文献第183-202页
攻读博士期间取得的研究成果第202-206页
致谢第206-207页
附录第207页

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