摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
缩略语表 | 第7-12页 |
第一章 前言 | 第12-21页 |
1.1 克伦特罗的理化性质及危害 | 第12页 |
1.2 克伦特罗检测方法 | 第12-14页 |
1.2.1 高效液相色谱法(HPLC) | 第13页 |
1.2.2 液相色谱/质谱联用法(LC-MS/MS) | 第13页 |
1.2.3 气相色谱/质谱联用法(GC-MS) | 第13-14页 |
1.2.4 酶联免疫法(ELISA) | 第14页 |
1.3 免疫层析技术 | 第14-19页 |
1.3.1 免疫层析技术原理 | 第14-15页 |
1.3.2 免疫层析试纸条的构成 | 第15-16页 |
1.3.3 免疫层析试纸条的分类 | 第16-17页 |
1.3.4 免疫层析技术的应用 | 第17-18页 |
1.3.5 免疫层析试纸条发展方向 | 第18-19页 |
1.5 主要研究内容和意义 | 第19-21页 |
1.5.1 主要研究内容 | 第19-20页 |
1.5.2 研究意义 | 第20-21页 |
第二章 建立胶体金免疫层析试纸条定量检测猪尿中克伦特罗的方法 | 第21-37页 |
摘要 | 第21页 |
2.1 前言 | 第21-22页 |
2.2 材料与仪器 | 第22页 |
2.2.1 主要试剂及材料 | 第22页 |
2.2.2 主要仪器设备 | 第22页 |
2.2.3 主要试剂的配制 | 第22页 |
2.3 实验方法 | 第22-26页 |
2.3.1 胶体金的制备及鉴定 | 第22-23页 |
2.3.2 胶体金标记抗克伦特罗单克隆抗体 | 第23页 |
2.3.3 CLE 试纸条的制备以及组装 | 第23-24页 |
2.3.4 胶体金读取仪检测流程及性能评价 | 第24页 |
2.3.5 CLE 胶体金试纸条免疫反应动力学分析 | 第24页 |
2.3.6 环境检测温度对试纸条影响 | 第24页 |
2.3.7 不同离子强度对试纸条的影响 | 第24-25页 |
2.3.8 不同 pH 对试纸条的影响 | 第25页 |
2.3.9 CLE 竞争抑制曲线的测定 | 第25页 |
2.3.10 CLE 胶体金试纸条特异性试验 | 第25页 |
2.3.11 试纸条最低检测灵敏度以及精密度 | 第25-26页 |
2.3.12 与 ELISA 方法学的比较 | 第26页 |
2.4 结果与讨论 | 第26-35页 |
2.4.1 胶体金质量评价 | 第26页 |
2.4.2 CLE 胶体金免疫层析试纸条的研制 | 第26-27页 |
2.4.3 胶体金读取仪读取原理及性能评价 | 第27-28页 |
2.4.4 CLE 胶体金试纸条 T、C 线免疫反应动力学曲线的测定 | 第28-29页 |
2.4.5 环境温度对胶体金试纸条 T/C 值的影响 | 第29-30页 |
2.4.6 尿样中盐离子浓度及 pH 值对胶体金试纸条 T/C 值的影响 | 第30-32页 |
2.4.7 试纸条定量检测标准曲线测定 | 第32-33页 |
2.4.8 CLE 胶体金试纸条特异性研究 | 第33-34页 |
2.4.9 试纸条最低检测灵敏度以及精密度的测定 | 第34页 |
2.4.10 与 ELISA 方法学的比较 | 第34-35页 |
2.5 小结 | 第35-37页 |
第三章 建立胶体金试纸条定量检测猪肉中克伦特罗的方法 | 第37-46页 |
摘要 | 第37页 |
3.1 引言 | 第37-38页 |
3.2 材料与仪器 | 第38页 |
3.2.1 主要试剂及材料 | 第38页 |
3.2.2 主要仪器设备 | 第38页 |
3.2.3 主要试剂的配制 | 第38页 |
3.3 实验方法 | 第38-40页 |
3.3.1 样品前处理的优化 | 第38-39页 |
3.3.2 胶体金试纸条免疫动力学分析 | 第39页 |
3.3.3 定量标准曲线的拟合 | 第39-40页 |
3.3.4 试纸条的准确度以及精密度的确定 | 第40页 |
3.3.5 试纸条检测猪肉组织样本最低灵敏度以及回收率的确定 | 第40页 |
3.3.6 方法学的比较 | 第40页 |
3.4 结果与讨论 | 第40-44页 |
3.4.1 样品前处理优化 | 第40-41页 |
3.4.2 试纸条免疫动力学曲线 | 第41-42页 |
3.4.3 胶体金试纸条定量检测方法学的建立及评价 | 第42-43页 |
3.4.4 猪肉组织样本加标回收实验及与方法学的比较 | 第43-44页 |
3.5 小结 | 第44-46页 |
第四章 纳米免疫磁珠富集猪肉中的克伦特罗 | 第46-56页 |
摘要 | 第46页 |
4.1 引言 | 第46页 |
4.2 材料与仪器 | 第46-47页 |
4.2.1 主要试剂及材料 | 第46页 |
4.2.2 主要仪器设备 | 第46-47页 |
4.2.3 主要试剂的配制 | 第47页 |
4.3 方法 | 第47-49页 |
4.3.1 生物素化标记抗体的制备 | 第47页 |
4.3.2 磁珠偶联链酶亲和素(SA)优化 | 第47页 |
4.3.3 抗体标记磁珠的优化 | 第47-48页 |
4.3.4 免疫磁珠吸附条件的优化 | 第48页 |
4.3.5 磁珠用量优化 | 第48页 |
4.3.6 洗脱条件优化 | 第48-49页 |
4.3.7 样品加标试验 | 第49页 |
4.4 结果与讨论 | 第49-55页 |
4.4.1 链酶亲和素磁珠的制备 | 第49-50页 |
4.4.2 抗体标记磁珠的优化 | 第50-51页 |
4.4.3 吸附条件的优化 | 第51-53页 |
4.4.4 免疫磁珠用量对吸附效率的影响 | 第53页 |
4.4.5 洗脱条件优化 | 第53-54页 |
4.4.6 加标回收实验 | 第54-55页 |
4.5 小结 | 第55-56页 |
第五章 结论与展望 | 第56-59页 |
5.1 结论 | 第56-57页 |
5.1.1 胶体金试纸条的制备及建立胶体金试纸条定量检测猪尿中的克伦特罗的方法 | 第56页 |
5.1.2 建立胶体金试纸条定量检测猪肉中克伦特罗方法 | 第56-57页 |
5.1.3 纳米免疫磁珠富集猪肉中的克伦特罗 | 第57页 |
5.2 展望 | 第57-59页 |
5.2.1 探讨研究猪尿不同因子对试纸条免疫学影响 | 第57页 |
5.2.2 猪肉组织样品前处理优化 | 第57页 |
5.2.3 试纸条稳定性 | 第57-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-67页 |
附录1 试剂材料 | 第67-69页 |
附录2 仪器设备 | 第69-70页 |
个人介绍 | 第70页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第70页 |