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籼稻第8染色体内源新功能着丝粒的形成特征解析

摘要第2-4页
Abstract第4-5页
符号说明第9-10页
第一章 文献综述第10-25页
    1.1 着丝粒DNA序列或遗传学特征第10-17页
        1.1.1 真核生物着丝粒DNA序列或遗传学特征第10页
        1.1.2 植物着丝粒DNA序列或遗传学特征第10-11页
        1.1.3 栽培稻着丝粒DNA序列或遗传学特征第11-17页
    1.2 新着丝粒的研究进展第17-20页
        1.2.1 真核生物新着丝粒的研究进展第17页
        1.2.2 植物新着丝粒的研究进展第17-18页
        1.2.3 水稻新着丝粒的研究进展第18-20页
    1.3 Oligo-FISH的发展与应用第20-22页
        1.3.1 FISH的发展第20页
        1.3.2 Oligo-FISH的简介第20-21页
        1.3.3 Oligo-FISH的应用第21-22页
    1.4 第三代测序的发展与应用简介第22页
    1.5 ChIP-seq和RNA-seq的发展与应用第22-23页
    1.6 着丝粒表观遗传特征研究进展第23-24页
    1.7 本研究的目的与意义第24-25页
第二章 材料与方法第25-37页
    2.1 实验材料第25-26页
        2.1.1 植物材料第25页
        2.1.2 细菌人工染色体(BAC)载体与菌株第25页
        2.1.3 着丝粒特异抗体(CENH3)的制备第25页
        2.1.4 主要的实验设备和工具第25页
        2.1.5 引物合成第25-26页
    2.2 实验方法第26-37页
        2.2.1 荧光原位杂交(FISH)第26-30页
            2.2.1.1 寡核苷酸探针的设计和制备第26-28页
            2.2.1.2 BAC探针与CentO探针的制备第28页
            2.2.1.3 Oligo-FISH第28-29页
            2.2.1.4 双链探针FISH第29-30页
            2.2.1.5 二次FISH杂交第30页
            2.2.1.6 显微镜成像第30页
        2.2.2 BAC文库的构建与筛选第30-34页
            2.2.2.1 高分子量水稻基因组DNA的提取第30页
            2.2.2.2 BAC文库的构建第30-31页
            2.2.2.3 BAC文库单克隆的PCR筛选第31-33页
            2.2.2.4 BAC单克隆DNA的提取(Qiagen Plasmid Midi kit)第33-34页
        2.2.3 BAC三代测序与组装第34页
        2.2.4 染色体免疫共沉淀(ChIP)与测序分析第34-36页
            2.2.4.1 染色体免疫共沉淀第34-36页
            2.2.4.2 ChIP-seq与数据可视化分析第36页
        2.2.5 转录组测序(RNA-seq)与数据可视化第36-37页
第三章 结果与分析第37-54页
    3.1 第8染色体着丝粒卫星序列缺失的细胞学鉴定第37-39页
    3.2 中籼3037 BAC文库的构建第39页
    3.3 中籼3037第8染色体着丝粒区域基因BAC克隆的筛选第39-44页
    3.4 阳性BAC克隆的细胞学验证第44-45页
    3.5 BAC克隆的三代测序分析第45-47页
    3.6 Del 8组蛋白CENH3结合区域定位分析第47-51页
    3.7 新着丝粒区域基因的表观修饰特征分析第51-54页
第四章 小结与讨论第54-57页
    4.1 水稻双色Oligo-FISH技术为染色体的鉴别提供便利第54页
    4.2 三代测序在重复序列的测定和组装上的应用第54-55页
    4.3 序列缺失导致内源新着丝粒扩张第55-57页
参考文献第57-68页
致谢第68-69页
攻读硕士学位期间参与发表的学术论文第69-70页

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