| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 主要英文缩写词 | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 第1章 绪论 | 第10-18页 |
| 1.1 研究背景及意义 | 第10-15页 |
| 1.1.1 HIV 概述及艾滋病的治疗现状 | 第10-12页 |
| 1.1.2 Vpu 蛋白的研究进展 | 第12-13页 |
| 1.1.3 SPR 技术在药物筛选中的应用 | 第13-15页 |
| 1.2 研究目的及内容 | 第15-18页 |
| 1.2.1 研究目的 | 第15页 |
| 1.2.2 研究内容 | 第15-18页 |
| 第2章 建立基于 SPR 技术的 Vpu蛋白靶向药物筛选方法 | 第18-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-21页 |
| 2.1.1 菌株、质粒与细胞株 | 第18页 |
| 2.1.2 相关试剂 | 第18-19页 |
| 2.1.3 相关溶液 | 第19-20页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第20-21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-26页 |
| 2.2.1 质粒转化与提取 | 第21页 |
| 2.2.2 巴斯德毕赤酵母表达系统表达 Vpu 蛋白并纯化 | 第21-24页 |
| 2.2.3 蛋白免疫印迹法和考马斯亮蓝染色 | 第24-25页 |
| 2.2.4 BCA 蛋白定量 | 第25页 |
| 2.2.5 利用 SPR 技术建立 Vpu 蛋白靶向药物筛选方法 | 第25-26页 |
| 2.3 实验结果 | 第26-31页 |
| 2.3.1 利用毕赤酵母表达系统表达 Vpu 蛋白并纯化 | 第26-30页 |
| 2.3.2 建立 Vpu 蛋白亲和筛选方法 | 第30-31页 |
| 2.4 讨论 | 第31-33页 |
| 2.5 本章小结 | 第33-34页 |
| 第3章 小分子抑制剂的筛选及功能验证 | 第34-58页 |
| 3.1 实验材料 | 第34-36页 |
| 3.1.1 菌株、质粒与细胞株 | 第34页 |
| 3.1.2 相关试剂与耗材 | 第34页 |
| 3.1.3 相关溶液 | 第34-35页 |
| 3.1.4 实验仪器 | 第35-36页 |
| 3.2 实验方法 | 第36-41页 |
| 3.2.1 Vpu 蛋白小分子化合物抑制剂的筛选 | 第36页 |
| 3.2.2 pEGFP-vphu 质粒构建 | 第36-37页 |
| 3.2.3 细胞培养、转染及细胞裂解 | 第37-38页 |
| 3.2.4 化合物的细胞毒性检测 | 第38页 |
| 3.2.5 荧光观察 | 第38页 |
| 3.2.6 mRNA 水平检测 | 第38-39页 |
| 3.2.7 Western blot 检测 | 第39-40页 |
| 3.2.8 HIV-1 假病毒制备 | 第40页 |
| 3.2.9 化合物对单一生活周期 HIV-1 假病毒的抑制作用（MAGI 试验） | 第40-41页 |
| 3.2.10 数据的统计分析方法 | 第41页 |
| 3.3 实验结果 | 第41-56页 |
| 3.3.1 小分子化合物的 Vpu 蛋白靶向筛选 | 第41-43页 |
| 3.3.2 化合物的细胞毒性检测 | 第43-45页 |
| 3.3.3 pEGFP-vphu 质粒构建 | 第45-46页 |
| 3.3.4 化合物对 Vpu 蛋白表达的影响 | 第46-48页 |
| 3.3.5 化合物对 Vpu 降解 THN 的影响 | 第48-51页 |
| 3.3.6 化合物对 Vpu 依赖的 HIV 病毒释放功能的影响 | 第51-56页 |
| 3.4 讨论 | 第56-57页 |
| 3.5 本章小结 | 第57-58页 |
| 结论 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 攻读硕士学位期间所发表的学术论文 | 第64-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
