摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第12-18页 |
1.1 芪合成酶基因和白藜芦醇的研究进展 | 第12-14页 |
1.2 葡萄遗传转化研究方法 | 第14-15页 |
1.2.1 根癌农杆菌介导的遗传转化 | 第14页 |
1.2.2 基因枪法介导的遗传转化 | 第14-15页 |
1.3 转基因植物启动子研究进展 | 第15-16页 |
1.4 脂类相关质体蛋白基因的研究概况 | 第16-17页 |
1.5 本研究目的与意义 | 第17-18页 |
第二章 农杆菌介导的中国野生华东葡萄‘白河-35-1’抗病基因 VpSTS2 转化欧洲葡萄的研究 | 第18-28页 |
2.1 材料 | 第18-19页 |
2.1.1 植物材料 | 第18页 |
2.1.2 植物表达载体 | 第18页 |
2.1.3 主要试剂 | 第18页 |
2.1.4 仪器设备 | 第18-19页 |
2.1.5 培养基 | 第19页 |
2.2 方法 | 第19-21页 |
2.2.1 葡萄体细胞胚的诱导 | 第19页 |
2.2.2 农杆菌介导的葡萄遗传转化 | 第19-20页 |
2.2.3 抗性植株的检测 | 第20页 |
2.2.4 转基因株系中芪类化合物的测定 | 第20-21页 |
2.3 结果与分析 | 第21-26页 |
2.3.1 葡萄体细胞胚的诱导 | 第21-23页 |
2.3.2 胚性愈伤卡那霉素致死测试 | 第23页 |
2.3.3 农杆菌介导葡萄遗传转化 | 第23-24页 |
2.3.4 抗性植株 PCR 检测 | 第24-25页 |
2.3.5 葡萄芪类物质含量的测定 | 第25-26页 |
2.4 讨论 | 第26-28页 |
第三章 不同调控元件控制下的芪合成酶基因 VpSTS2 的表达分析 | 第28-42页 |
3.1 材料 | 第28-29页 |
3.1.1 植物材料 | 第28页 |
3.1.2 植物表达载体 | 第28页 |
3.1.3 主要试剂 | 第28页 |
3.1.4 仪器设备 | 第28-29页 |
3.2 方法 | 第29-31页 |
3.2.1 白粉菌接种及病情调查 | 第29页 |
3.2.2 对拟南芥叶片接种后进行台盼蓝染色 | 第29页 |
3.2.3 pC-VpSTS2-GFP 融合载体的构建 | 第29页 |
3.2.4 农杆菌介导的花序浸蘸法转化拟南芥 | 第29-30页 |
3.2.5 转基因植株检测 | 第30-31页 |
3.3 结果与分析 | 第31-40页 |
3.3.1 不同调控元件控制下的芪合成酶基因 VpSTS2 的表达分析及抗性检测 | 第31-35页 |
3.3.2 中国野生华东葡萄芪合成酶基因 VpSTS2 基因的定位 | 第35-40页 |
3.4 讨论 | 第40-42页 |
第四章 中国野生华东葡萄脂类相关质体蛋白基因 VpPAP1 的克隆与表达 | 第42-50页 |
4.1 材料 | 第42页 |
4.1.1 植物材料 | 第42页 |
4.1.2 主要试剂 | 第42页 |
4.2 方法 | 第42-43页 |
4.2.1 材料处理 | 第42页 |
4.2.2 ‘白河-35-1’总 RNA 提取及 cDNA 第一链的合成 | 第42页 |
4.2.3 野生华东葡萄脂类相关质体蛋白基因 VpPAP1 cDNA 全长的克隆 | 第42-43页 |
4.2.4 野生华东葡萄脂类相关质体蛋白基因 VpPAP1 及其蛋白质生物信息学分析 | 第43页 |
4.2.5 实时荧光定量 PCR 分析 | 第43页 |
4.3 结果与分析 | 第43-48页 |
4.3.1 野生华东葡萄脂类相关质体蛋白基因 VpPAP1 克隆及序列分析 | 第43-45页 |
4.3.2 VpPAP1 基因编码蛋白同源性及其进化分析 | 第45-46页 |
4.3.3 VpPAP1 蛋白的生物信息学分析 | 第46页 |
4.3.4 葡萄白粉菌诱导后 VpPAP1 及 VvPAP13 基因的表达分析 | 第46-48页 |
4.4 讨论 | 第48-50页 |
全文结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-56页 |
附录 | 第56-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
作者简介 | 第61页 |