| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 引言 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-20页 |
| 1 鱼类抗寒相关研究进展 | 第13-18页 |
| 1.1 鱼类抗冻蛋白 | 第13-14页 |
| 1.2 低温对鱼类脂肪酸代谢的影响 | 第14-15页 |
| 1.3 低温对鱼类蛋白质和氨基酸代谢的影响 | 第15-16页 |
| 1.4 低温对鱼类糖代谢的影响 | 第16页 |
| 1.5 低温对鱼类免疫及防御系统的影响 | 第16-17页 |
| 1.6 鱼类抗寒性状分子机理的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.6.1 分子标记在鱼类抗寒中的应用 | 第17-18页 |
| 1.6.2 鱼类抗寒候选基因的研究进展 | 第18页 |
| 2 微卫星 DNA | 第18页 |
| 3 冷诱导 RNA 结合蛋白 | 第18-20页 |
| 3.1 CIRP 结构 | 第19页 |
| 3.2 CIRP 功能 | 第19-20页 |
| 第二章 大黄鱼选育群体SSR遗传多样性分析 | 第20-28页 |
| 1 材料与方法 | 第20-24页 |
| 1.1 实验材料 | 第20-21页 |
| 1.2 主要仪器设备和试剂 | 第21-22页 |
| 1.2.1 主要仪器设备 | 第21页 |
| 1.2.2 主要试剂及其配制方法 | 第21-22页 |
| 1.3 实验方法 | 第22-24页 |
| 1.3.1 基因组 DNA 提取 | 第22页 |
| 1.3.2 DNA 的检测和模版制备 | 第22页 |
| 1.3.3 微卫星引物选择和 PCR 反应条件确定 | 第22-23页 |
| 1.3.4 PCR 扩增产物琼脂糖电泳检测 | 第23页 |
| 1.3.5 PCR 产物的聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第23-24页 |
| 1.3.6 数据分析 | 第24页 |
| 2 实验结果 | 第24-26页 |
| 2.1 基因组 DNA 提取结果 | 第24-25页 |
| 2.2 选育群体的遗传多样性 | 第25页 |
| 2.3 不同低温耐受群体遗传多样性差异 | 第25-26页 |
| 3 讨论 | 第26-28页 |
| 第三章 大黄鱼耐低温相关SSR标记筛选 | 第28-33页 |
| 1 材料与方法 | 第28-29页 |
| 1.1 实验材料 | 第28页 |
| 1.2 主要仪器设备和试剂 | 第28页 |
| 1.3 实验方法 | 第28-29页 |
| 1.3.1 基因组 DNA 的提取 | 第28页 |
| 1.3.2 微卫星分析 | 第28-29页 |
| 1.3.3 数据分析 | 第29页 |
| 1.3.4 差异等位基因片段的克隆、测序及序列比对 | 第29页 |
| 2 实验结果 | 第29-31页 |
| 2.1 微卫星位点的差异等位基因片段在大黄鱼个体中带型统计分析 | 第29页 |
| 2.2 SPSS 相关性分析 | 第29-30页 |
| 2.3 差异等位基因片段的克隆与测序 | 第30-31页 |
| 3 讨论 | 第31-33页 |
| 第四章 大黄鱼耐低温基因CIRP在降温中表达 | 第33-46页 |
| 1 材料与方法 | 第33-40页 |
| 1.1 材料 | 第33-34页 |
| 1.1.1 样品采集 | 第33-34页 |
| 1.1.2 实验仪器 | 第34页 |
| 1.1.3 实验试剂 | 第34页 |
| 1.2 CIRP 基因克隆 | 第34-38页 |
| 1.2.1 大黄鱼总 RNA 提取 | 第34页 |
| 1.2.2 大黄鱼 cDNA 的制备 | 第34-35页 |
| 1.2.3 引物设计 | 第35-36页 |
| 1.2.4 序列 PCR 验证 | 第36页 |
| 1.2.5 产物切胶回收 | 第36页 |
| 1.2.6 连接 | 第36-37页 |
| 1.2.7 感受态细胞制备 | 第37页 |
| 1.2.8 转化和筛选 | 第37-38页 |
| 1.2.9 RACE 扩增 | 第38页 |
| 1.2.10 目的基因序列拼接及分析 | 第38页 |
| 1.3 CIRP 组织表达 | 第38-40页 |
| 1.3.1 荧光定量特异性引物设计 | 第38页 |
| 1.3.2 实时荧光定量 PCR 引物特异性检测 | 第38-39页 |
| 1.3.3 RT-PCR 检测目的基因的表达 | 第39页 |
| 1.3.4 数据处理 | 第39-40页 |
| 2 结果 | 第40-43页 |
| 2.1 总 RNA 提取的质量与 CIRP 基因 cDNA 全长序列 | 第40-41页 |
| 2.2 CIRP 氨基酸序列相似性与系统进化 | 第41-42页 |
| 2.3 大黄鱼 CIRP 基因 mRNA 的组织表达特征与低温协迫下的变化 | 第42-43页 |
| 3 讨论 | 第43-46页 |
| 第五章 结论 | 第46-48页 |
| 1 研究成果 | 第46页 |
| 2 创新点 | 第46-47页 |
| 3 研究展望 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-55页 |
| 在学研究成果 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
