摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
插图和附表清单 | 第7-8页 |
縮略语表 | 第8-9页 |
1 引言 | 第9-13页 |
1.1 MYB转录因子的研究进展 | 第9-13页 |
1.1.1 MYB转录因子的发现 | 第9页 |
1.1.2 MYB转录因子的结构特征 | 第9-11页 |
1.1.3 MYB转录因子的功能 | 第11-12页 |
1.1.4 MYB转录因子在抗逆反应中的应答机理 | 第12页 |
1.1.5 植物MYB转录因子的活性调节 | 第12-13页 |
1.1.6 植物MYB转录因子的进化 | 第13页 |
1.2 目的和意义 | 第13页 |
2 材料和方法 | 第13-23页 |
2.1 试验材料 | 第13-16页 |
2.1.1 植物材料 | 第13页 |
2.1.2 菌种和质粒 | 第13-14页 |
2.1.3 试剂 | 第14页 |
2.1.4 引物的合成及测序 | 第14-15页 |
2.1.5 主要试验仪器 | 第15-16页 |
2.2 试验方法 | 第16-23页 |
2.2.1 主要培养基的配制 | 第16页 |
2.2.2 植物材料的培养 | 第16页 |
2.2.3 中间锦鸡儿和拟南芥基因组DNA提取 | 第16页 |
2.2.4 中间锦鸡儿cDNA的获得 | 第16-17页 |
2.2.5 拟南芥cDNA的获得 | 第17页 |
2.2.6 感受态的制备和目的片段的转化 | 第17页 |
2.2.7 质粒的提取和目的片段的胶回收 | 第17页 |
2.2.8 cDNA末端快速扩增(RACE) | 第17页 |
2.2.9 目的基因的克隆和测序 | 第17-18页 |
2.2.10 生物信息学分析 | 第18页 |
2.2.11 基因表达量分析 | 第18-19页 |
2.2.12 CiMYB68启动子的获得及其分析 | 第19页 |
2.2.13 植物表达载体的构建 | 第19-21页 |
2.2.14 拟南芥的遗传转化 | 第21页 |
2.2.15 转基因植物的筛选 | 第21页 |
2.2.16 转基因纯合体植株转录水平的qRT-PCR检测 | 第21页 |
2.2.17 拟南芥原生质体的分离纯化及其瞬时表达 | 第21-23页 |
3 结果与分析 | 第23-35页 |
3.1 中间锦鸡儿总RNA电泳检测 | 第23页 |
3.2 中间锦鸡儿CiMYB68基因全长序列的获得 | 第23-25页 |
3.2.1 中间锦鸡儿CiMYB68基因cDNA克隆结果 | 第23-24页 |
3.2.2 中间锦鸡儿CiMYB68基因组DNA全长克隆结果 | 第24-25页 |
3.3 中间锦鸡儿CiMYB68基因的生物信息学分析 | 第25-28页 |
3.3.1 核苷酸序列分析结果 | 第25页 |
3.3.2 氨基酸序列分析结果 | 第25-28页 |
3.4 CiMYB68基因表达量分析 | 第28-30页 |
3.4.1 中间锦鸡儿干旱处理后CiMYB68基因的表达量变化 | 第28-29页 |
3.4.2 中间锦鸡儿低温处理后CiMYB68基因的表达量变化 | 第29-30页 |
3.5 CiMYB68启动子的获得及其分析 | 第30-31页 |
3.5.1 CiMYB68启动子的获得 | 第30页 |
3.5.2 启动子序列分析 | 第30-31页 |
3.6 筛选CiMYB68基因过表达转基因纯合体 | 第31-33页 |
3.6.1 CiMYB68基因过表达载体p35S::CiMYB68的构建 | 第31-32页 |
3.6.2 筛选转基因植株 | 第32-33页 |
3.6.3 转基因纯合体植株转录水平的qRT-PCR检测 | 第33页 |
3.7 CiMYB68蛋白的亚细胞定位 | 第33-35页 |
3.7.1 p35S::CiMYB68-GFP载体的构建 | 第33-34页 |
3.7.2 利用原生质体瞬时表达研究CiMYB68蛋白的亚细胞定位 | 第34-35页 |
3.7.3 稳定表达p35S::CiMYB68-GFP转基因拟南芥的获得 | 第35页 |
3.7.4 激光扫描共聚焦显微镜观察荧光信号 | 第35页 |
4 讨论与结论 | 第35-38页 |
4.1 讨论 | 第35-36页 |
4.1.1 启动子的获得和分析 | 第36页 |
4.1.2 中间锦鸡儿CiMYB68的分子生物学特性 | 第36页 |
4.2 结论 | 第36-38页 |
致谢 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-45页 |
作者简介 | 第45页 |