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中间锦鸡儿CiMYB68基因克隆及表达分析

摘要第3-4页
Abstract第4页
插图和附表清单第7-8页
縮略语表第8-9页
1 引言第9-13页
    1.1 MYB转录因子的研究进展第9-13页
        1.1.1 MYB转录因子的发现第9页
        1.1.2 MYB转录因子的结构特征第9-11页
        1.1.3 MYB转录因子的功能第11-12页
        1.1.4 MYB转录因子在抗逆反应中的应答机理第12页
        1.1.5 植物MYB转录因子的活性调节第12-13页
        1.1.6 植物MYB转录因子的进化第13页
    1.2 目的和意义第13页
2 材料和方法第13-23页
    2.1 试验材料第13-16页
        2.1.1 植物材料第13页
        2.1.2 菌种和质粒第13-14页
        2.1.3 试剂第14页
        2.1.4 引物的合成及测序第14-15页
        2.1.5 主要试验仪器第15-16页
    2.2 试验方法第16-23页
        2.2.1 主要培养基的配制第16页
        2.2.2 植物材料的培养第16页
        2.2.3 中间锦鸡儿和拟南芥基因组DNA提取第16页
        2.2.4 中间锦鸡儿cDNA的获得第16-17页
        2.2.5 拟南芥cDNA的获得第17页
        2.2.6 感受态的制备和目的片段的转化第17页
        2.2.7 质粒的提取和目的片段的胶回收第17页
        2.2.8 cDNA末端快速扩增(RACE)第17页
        2.2.9 目的基因的克隆和测序第17-18页
        2.2.10 生物信息学分析第18页
        2.2.11 基因表达量分析第18-19页
        2.2.12 CiMYB68启动子的获得及其分析第19页
        2.2.13 植物表达载体的构建第19-21页
        2.2.14 拟南芥的遗传转化第21页
        2.2.15 转基因植物的筛选第21页
        2.2.16 转基因纯合体植株转录水平的qRT-PCR检测第21页
        2.2.17 拟南芥原生质体的分离纯化及其瞬时表达第21-23页
3 结果与分析第23-35页
    3.1 中间锦鸡儿总RNA电泳检测第23页
    3.2 中间锦鸡儿CiMYB68基因全长序列的获得第23-25页
        3.2.1 中间锦鸡儿CiMYB68基因cDNA克隆结果第23-24页
        3.2.2 中间锦鸡儿CiMYB68基因组DNA全长克隆结果第24-25页
    3.3 中间锦鸡儿CiMYB68基因的生物信息学分析第25-28页
        3.3.1 核苷酸序列分析结果第25页
        3.3.2 氨基酸序列分析结果第25-28页
    3.4 CiMYB68基因表达量分析第28-30页
        3.4.1 中间锦鸡儿干旱处理后CiMYB68基因的表达量变化第28-29页
        3.4.2 中间锦鸡儿低温处理后CiMYB68基因的表达量变化第29-30页
    3.5 CiMYB68启动子的获得及其分析第30-31页
        3.5.1 CiMYB68启动子的获得第30页
        3.5.2 启动子序列分析第30-31页
    3.6 筛选CiMYB68基因过表达转基因纯合体第31-33页
        3.6.1 CiMYB68基因过表达载体p35S::CiMYB68的构建第31-32页
        3.6.2 筛选转基因植株第32-33页
        3.6.3 转基因纯合体植株转录水平的qRT-PCR检测第33页
    3.7 CiMYB68蛋白的亚细胞定位第33-35页
        3.7.1 p35S::CiMYB68-GFP载体的构建第33-34页
        3.7.2 利用原生质体瞬时表达研究CiMYB68蛋白的亚细胞定位第34-35页
        3.7.3 稳定表达p35S::CiMYB68-GFP转基因拟南芥的获得第35页
        3.7.4 激光扫描共聚焦显微镜观察荧光信号第35页
4 讨论与结论第35-38页
    4.1 讨论第35-36页
        4.1.1 启动子的获得和分析第36页
        4.1.2 中间锦鸡儿CiMYB68的分子生物学特性第36页
    4.2 结论第36-38页
致谢第38-39页
参考文献第39-45页
作者简介第45页

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