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两类内切型褐藻胶裂解酶可变的底物降解模式研究

中文摘要第15-19页
ABSTRACT第19-23页
符号说明第24-25页
第一章 绪论第25-33页
    1.1 褐藻胶第25-27页
        1.1.1 褐藻胶简介第25页
        1.1.2 褐藻胶结构及分类第25-26页
        1.1.3 褐藻胶的来源第26-27页
        1.1.4 褐藻胶的应用价值第27页
    1.2 褐藻胶寡糖第27-30页
        1.2.1 褐藻胶寡糖简介第27-28页
        1.2.2 褐藻胶寡糖的生物学功能第28-29页
        1.2.3 褐藻胶寡糖的制备第29-30页
    1.3 褐藻胶裂解酶第30-32页
        1.3.1 褐藻胶裂解酶简介第30页
        1.3.2 褐藻胶裂解酶的来源和分类第30页
        1.3.3 褐藻胶裂解酶在褐藻胶的生物合成与生物降解中的功能第30-31页
        1.3.4 褐藻胶裂解酶的应用第31页
        1.3.5 褐藻胶裂解酶的研究现状第31-32页
    1.4 本课题研究目的和意义第32-33页
第二章 兼性褐藻胶裂解酶Aly1及其截短体Aly1-T185N的重组表达及酶学性质鉴定第33-53页
    2.1 实验材料第33-34页
        2.1.1 材料第33页
        2.1.2 试剂第33-34页
        2.1.3 仪器第34页
    2.2 实验方法第34-40页
        2.2.1 Aly1的序列分析和分子克隆第34-35页
        2.2.2 重组酶rAly1和rAly1-T185N的表达与纯化第35-36页
            2.2.2.1 重组酶rAly1和rAly1-T185N的表达第35-36页
            2.2.2.2 重组酶rAly1和rAly1-T185N的纯化第36页
        2.2.3 重组酶rAly1和rAly1-T185N底物选择性分析第36-37页
        2.2.4 重组酶rAly1和rAly1-T185N的生化特性分析第37-39页
            2.2.4.1 重组酶rAly1和rAly1-T185N最适温度的测定第37页
            2.2.4.2 重组酶rAly1和rAly1-T185N最适pH的测定第37-38页
            2.2.4.3 重组酶rAly1和rAly1-T185N的温度稳定性分析第38页
            2.2.4.4 重组酶rAly1和rAly1-T185N的pH稳定性分析第38页
            2.2.4.5 化学试剂对重组酶rAly1和rAly1-T185N活性的影响第38页
            2.2.4.6 NaCl对重组酶rAly1和rAly1-T185N活性的影响第38-39页
        2.2.5 重组酶rAly1和rAly1-T185N的酶学性质分析第39-40页
            2.2.5.1 重组酶rAly1和rAly1-T185N的多糖底物降解特性分析第39页
            2.2.5.2 重组酶rAly1和rAly1-T185N的产物~1H-NMR波谱分析第39页
            2.2.5.3 重组酶rAly1和rAly1-T185N的不饱和寡糖底物降解特性分析第39-40页
            2.2.5.4 重组酶rAly1和rAly1-T185N的饱和寡糖底物降解特性分析第40页
            2.2.5.5 重组酶rAly1和rAly1-T185N的荧光标记的饱和寡糖底物降解特性分析第40页
    2.3 结果与分析第40-50页
        2.3.1 Aly1的序列分析第40-41页
        2.3.2 重组酶rAly1和rAly1-T185N的表达和纯化第41-42页
        2.3.3 重组酶rAly1和rAly1-T185N底物选择性分析第42-43页
        2.3.4 重组酶rAly1和rAly1-T185N的生化特性分析第43-46页
            2.3.4.1 重组酶rAly1和rAly1-T185N最适温度分析第43页
            2.3.4.2 重组酶rAly1和rAly1-T185N最适pH分析第43-44页
            2.3.4.3 重组酶rAly1和rAly1-T185N的温度稳定性分析第44页
            2.3.4.4 重组酶rAly1和rAly1-T185N的pH稳定性分析第44-45页
            2.3.4.5 化学试剂对重组酶rAly1和rAly1-T185N活性的影响第45-46页
            2.3.4.6 NaCl对重组酶rAly1和rAly1-T185N活性的影响第46页
        2.3.5 重组酶rAly1和rAly1-T185N的酶学性质分析第46-50页
            2.3.5.1 重组酶rAly1和rAly1-T185N的多糖底物降解特性分析第46-47页
            2.3.5.2 重组酶rAly1和rAly1-T185N的产物1H-NMR波谱分析第47-48页
            2.3.5.3 重组酶rAly1和rAly1-T185N的不饱和寡糖底物降解特性分析第48-49页
            2.3.5.4 重组酶rAly1和rAly1-T185N的饱和寡糖底物降解特性分析第49页
            2.3.5.5 重组酶rAly1和rAly1-T185N的荧光标记的饱和寡糖底物降解特性分析第49-50页
    2.4 讨论第50-52页
    2.5 本章小结第52-53页
第三章 M-专一性褐藻胶裂解酶Pae-AlgL和Avi-AlgL的重组表达及酶学性质分析第53-70页
    3.1 实验材料第53页
        3.1.1 材料第53页
        3.1.2 试剂第53页
        3.1.3 仪器第53页
    3.2 实验方法第53-58页
        3.2.1 Pae-AlgL和Avi-AlgL的序列分析和分子克隆第53-54页
        3.2.2 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的表达和纯化第54-55页
            3.2.2.1 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的表达第54页
            3.2.2.2 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的纯化第54-55页
        3.2.3 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的生化特性分析第55-57页
            3.2.3.1 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL最适温度的测定第55页
            3.2.3.2 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL最适pH的测定第55-56页
            3.2.3.3 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的温度稳定性分析第56页
            3.2.3.4 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的pH稳定性分析第56页
            3.2.3.5 化学试剂对重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL活性的影响第56-57页
            3.2.3.6 NaCl浓度对重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL活性的影响第57页
        3.2.4 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的酶学性质分析第57-58页
            3.2.4.1 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的多糖底物降解特性分析第57页
            3.2.4.2 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的产物~1H-NMR波谱分析第57页
            3.2.4.3 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的不饱和寡糖底物降解特性分析第57-58页
            3.2.4.4 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的饱和寡糖底物降解特性分析第58页
            3.2.4.5 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的荧光标记的饱和寡糖底物降解特性分析第58页
    3.3 结果与分析第58-67页
        3.3.1 Pae-AlgL和Avi-AlgL的序列分析第58-59页
        3.3.2 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的表达和纯化第59-60页
        3.3.3 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的生化特性分析第60-63页
            3.3.3.1 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL最适温度的测定第60页
            3.3.3.2 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL最适pH的测定第60-61页
            3.3.3.3 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的温度稳定性分析第61页
            3.3.3.4 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的pH稳定性分析第61页
            3.3.3.5 化学试剂对重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL活性的影响第61-62页
            3.3.3.6 NaCl对重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL活性的影响第62-63页
        3.3.4 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的酶学性质分析第63-67页
            3.3.4.1 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的多糖底物降解特性分析第63页
            3.3.4.2 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的产物~1H-NMR波谱分析第63-64页
            3.3.4.3 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的不饱和寡糖底物降解特性分析第64-65页
            3.3.4.4 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的饱和寡糖底物降解特性分析第65-66页
            3.3.4.5 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的荧光标记的饱和寡糖底物降解特性分析第66-67页
    3.4 讨论第67-68页
    3.5 本章小结第68-70页
第四章 全文总结第70-71页
参考文献第71-76页
致谢第76-77页
攻读学位期间发表的学术论文和参加科研情况第77-79页
学位论文评阅及答辩情况表第79页

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