中文摘要 | 第15-19页 |
ABSTRACT | 第19-23页 |
符号说明 | 第24-25页 |
第一章 绪论 | 第25-33页 |
1.1 褐藻胶 | 第25-27页 |
1.1.1 褐藻胶简介 | 第25页 |
1.1.2 褐藻胶结构及分类 | 第25-26页 |
1.1.3 褐藻胶的来源 | 第26-27页 |
1.1.4 褐藻胶的应用价值 | 第27页 |
1.2 褐藻胶寡糖 | 第27-30页 |
1.2.1 褐藻胶寡糖简介 | 第27-28页 |
1.2.2 褐藻胶寡糖的生物学功能 | 第28-29页 |
1.2.3 褐藻胶寡糖的制备 | 第29-30页 |
1.3 褐藻胶裂解酶 | 第30-32页 |
1.3.1 褐藻胶裂解酶简介 | 第30页 |
1.3.2 褐藻胶裂解酶的来源和分类 | 第30页 |
1.3.3 褐藻胶裂解酶在褐藻胶的生物合成与生物降解中的功能 | 第30-31页 |
1.3.4 褐藻胶裂解酶的应用 | 第31页 |
1.3.5 褐藻胶裂解酶的研究现状 | 第31-32页 |
1.4 本课题研究目的和意义 | 第32-33页 |
第二章 兼性褐藻胶裂解酶Aly1及其截短体Aly1-T185N的重组表达及酶学性质鉴定 | 第33-53页 |
2.1 实验材料 | 第33-34页 |
2.1.1 材料 | 第33页 |
2.1.2 试剂 | 第33-34页 |
2.1.3 仪器 | 第34页 |
2.2 实验方法 | 第34-40页 |
2.2.1 Aly1的序列分析和分子克隆 | 第34-35页 |
2.2.2 重组酶rAly1和rAly1-T185N的表达与纯化 | 第35-36页 |
2.2.2.1 重组酶rAly1和rAly1-T185N的表达 | 第35-36页 |
2.2.2.2 重组酶rAly1和rAly1-T185N的纯化 | 第36页 |
2.2.3 重组酶rAly1和rAly1-T185N底物选择性分析 | 第36-37页 |
2.2.4 重组酶rAly1和rAly1-T185N的生化特性分析 | 第37-39页 |
2.2.4.1 重组酶rAly1和rAly1-T185N最适温度的测定 | 第37页 |
2.2.4.2 重组酶rAly1和rAly1-T185N最适pH的测定 | 第37-38页 |
2.2.4.3 重组酶rAly1和rAly1-T185N的温度稳定性分析 | 第38页 |
2.2.4.4 重组酶rAly1和rAly1-T185N的pH稳定性分析 | 第38页 |
2.2.4.5 化学试剂对重组酶rAly1和rAly1-T185N活性的影响 | 第38页 |
2.2.4.6 NaCl对重组酶rAly1和rAly1-T185N活性的影响 | 第38-39页 |
2.2.5 重组酶rAly1和rAly1-T185N的酶学性质分析 | 第39-40页 |
2.2.5.1 重组酶rAly1和rAly1-T185N的多糖底物降解特性分析 | 第39页 |
2.2.5.2 重组酶rAly1和rAly1-T185N的产物~1H-NMR波谱分析 | 第39页 |
2.2.5.3 重组酶rAly1和rAly1-T185N的不饱和寡糖底物降解特性分析 | 第39-40页 |
2.2.5.4 重组酶rAly1和rAly1-T185N的饱和寡糖底物降解特性分析 | 第40页 |
2.2.5.5 重组酶rAly1和rAly1-T185N的荧光标记的饱和寡糖底物降解特性分析 | 第40页 |
2.3 结果与分析 | 第40-50页 |
2.3.1 Aly1的序列分析 | 第40-41页 |
2.3.2 重组酶rAly1和rAly1-T185N的表达和纯化 | 第41-42页 |
2.3.3 重组酶rAly1和rAly1-T185N底物选择性分析 | 第42-43页 |
2.3.4 重组酶rAly1和rAly1-T185N的生化特性分析 | 第43-46页 |
2.3.4.1 重组酶rAly1和rAly1-T185N最适温度分析 | 第43页 |
2.3.4.2 重组酶rAly1和rAly1-T185N最适pH分析 | 第43-44页 |
2.3.4.3 重组酶rAly1和rAly1-T185N的温度稳定性分析 | 第44页 |
2.3.4.4 重组酶rAly1和rAly1-T185N的pH稳定性分析 | 第44-45页 |
2.3.4.5 化学试剂对重组酶rAly1和rAly1-T185N活性的影响 | 第45-46页 |
2.3.4.6 NaCl对重组酶rAly1和rAly1-T185N活性的影响 | 第46页 |
2.3.5 重组酶rAly1和rAly1-T185N的酶学性质分析 | 第46-50页 |
2.3.5.1 重组酶rAly1和rAly1-T185N的多糖底物降解特性分析 | 第46-47页 |
2.3.5.2 重组酶rAly1和rAly1-T185N的产物1H-NMR波谱分析 | 第47-48页 |
2.3.5.3 重组酶rAly1和rAly1-T185N的不饱和寡糖底物降解特性分析 | 第48-49页 |
2.3.5.4 重组酶rAly1和rAly1-T185N的饱和寡糖底物降解特性分析 | 第49页 |
2.3.5.5 重组酶rAly1和rAly1-T185N的荧光标记的饱和寡糖底物降解特性分析 | 第49-50页 |
2.4 讨论 | 第50-52页 |
2.5 本章小结 | 第52-53页 |
第三章 M-专一性褐藻胶裂解酶Pae-AlgL和Avi-AlgL的重组表达及酶学性质分析 | 第53-70页 |
3.1 实验材料 | 第53页 |
3.1.1 材料 | 第53页 |
3.1.2 试剂 | 第53页 |
3.1.3 仪器 | 第53页 |
3.2 实验方法 | 第53-58页 |
3.2.1 Pae-AlgL和Avi-AlgL的序列分析和分子克隆 | 第53-54页 |
3.2.2 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的表达和纯化 | 第54-55页 |
3.2.2.1 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的表达 | 第54页 |
3.2.2.2 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的纯化 | 第54-55页 |
3.2.3 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的生化特性分析 | 第55-57页 |
3.2.3.1 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL最适温度的测定 | 第55页 |
3.2.3.2 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL最适pH的测定 | 第55-56页 |
3.2.3.3 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的温度稳定性分析 | 第56页 |
3.2.3.4 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的pH稳定性分析 | 第56页 |
3.2.3.5 化学试剂对重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL活性的影响 | 第56-57页 |
3.2.3.6 NaCl浓度对重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL活性的影响 | 第57页 |
3.2.4 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的酶学性质分析 | 第57-58页 |
3.2.4.1 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的多糖底物降解特性分析 | 第57页 |
3.2.4.2 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的产物~1H-NMR波谱分析 | 第57页 |
3.2.4.3 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的不饱和寡糖底物降解特性分析 | 第57-58页 |
3.2.4.4 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的饱和寡糖底物降解特性分析 | 第58页 |
3.2.4.5 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的荧光标记的饱和寡糖底物降解特性分析 | 第58页 |
3.3 结果与分析 | 第58-67页 |
3.3.1 Pae-AlgL和Avi-AlgL的序列分析 | 第58-59页 |
3.3.2 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的表达和纯化 | 第59-60页 |
3.3.3 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的生化特性分析 | 第60-63页 |
3.3.3.1 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL最适温度的测定 | 第60页 |
3.3.3.2 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL最适pH的测定 | 第60-61页 |
3.3.3.3 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的温度稳定性分析 | 第61页 |
3.3.3.4 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的pH稳定性分析 | 第61页 |
3.3.3.5 化学试剂对重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL活性的影响 | 第61-62页 |
3.3.3.6 NaCl对重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL活性的影响 | 第62-63页 |
3.3.4 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的酶学性质分析 | 第63-67页 |
3.3.4.1 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的多糖底物降解特性分析 | 第63页 |
3.3.4.2 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的产物~1H-NMR波谱分析 | 第63-64页 |
3.3.4.3 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的不饱和寡糖底物降解特性分析 | 第64-65页 |
3.3.4.4 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的饱和寡糖底物降解特性分析 | 第65-66页 |
3.3.4.5 重组酶Pae-rAlgL和Avi-rAlgL的荧光标记的饱和寡糖底物降解特性分析 | 第66-67页 |
3.4 讨论 | 第67-68页 |
3.5 本章小结 | 第68-70页 |
第四章 全文总结 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-76页 |
致谢 | 第76-77页 |
攻读学位期间发表的学术论文和参加科研情况 | 第77-79页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第79页 |