| 中文摘要 | 第1-14页 |
| Abstract | 第14-18页 |
| 第一章 绪论 | 第18-58页 |
| ·蛋白质组学研究技术 | 第18-27页 |
| ·蛋白质组学分离分析技术 | 第19-23页 |
| ·蛋白质样本的制备技术 | 第19-20页 |
| ·二维凝胶电泳技术 | 第20页 |
| ·多维液相色谱分离技术 | 第20-21页 |
| ·毛细管电泳分离技术 | 第21-22页 |
| ·微流控芯片技术 | 第22-23页 |
| ·蛋白质组学鉴定技术 | 第23-24页 |
| ·传统鉴定技术 | 第23页 |
| ·生物质谱技术 | 第23-24页 |
| ·蛋白质组学定量研究技术 | 第24-27页 |
| ·同位素代谢标记法 | 第24-25页 |
| ·同位素化学标记法 | 第25-27页 |
| ·非标定量法 | 第27页 |
| ·蛋白质组学新技术和新方法研究进展 | 第27-36页 |
| ·低丰度蛋白质或肽的分离富集 | 第27-30页 |
| ·高丰度蛋白剔除低丰度蛋白富集 | 第28-29页 |
| ·低丰度肽的富集和除盐技术 | 第29-30页 |
| ·翻译后修饰蛋白质的鉴定分析 | 第30-36页 |
| ·磷酸化修饰肽/蛋白的特异性富集分析 | 第30-31页 |
| ·糖基化修饰的肽/蛋白的特异性富集分析 | 第31-36页 |
| ·纳米金刚石的研究进展 | 第36-43页 |
| ·纳米金刚石的制备 | 第37-38页 |
| ·纳米金刚石的常规应用 | 第38-39页 |
| ·纳米金刚石在分析化学及生物医学领域中的应用 | 第39-43页 |
| ·生物大分子的吸附基质 | 第39-40页 |
| ·色谱固定相 | 第40-41页 |
| ·纳米金刚石作为载体和探针的应用 | 第41-43页 |
| ·本论文选题的意义 | 第43页 |
| 参考文献 | 第43-58页 |
| 第二章 纳米金刚石对低丰度肽/蛋白的富集及其在探讨宫内生长迟缓大鼠肾脏发育异常可能机制中的应用 | 第58-96页 |
| ·引言 | 第58-59页 |
| ·实验部分 | 第59-64页 |
| ·材料和试剂 | 第59页 |
| ·仪器设备 | 第59页 |
| ·材料与实际样本制备 | 第59-60页 |
| ·dND储备液制备 | 第59-60页 |
| ·标准蛋白的酶解 | 第60页 |
| ·实际样本准备 | 第60-62页 |
| ·动物模型的建立与肾组织标本采集 | 第60页 |
| ·肾组织全蛋白抽提、双向凝胶电泳分离分析以及差异蛋白质的酶解 | 第60-62页 |
| ·肽/蛋白的预处理 | 第62-63页 |
| ·dND对肽/蛋白的富集预处理 | 第62-63页 |
| ·传统富集方法对肽/蛋白富集预处理 | 第63页 |
| ·MALDI-TOF/TOF分析及数据处理 | 第63页 |
| ·dNDs的相关表征 | 第63-64页 |
| ·结果与讨论 | 第64-88页 |
| ·dNDs对肽/蛋白的富集 | 第64-65页 |
| ·dNDs富集性能 | 第65-68页 |
| ·富集平衡时间 | 第65-66页 |
| ·吸附容量 | 第66-67页 |
| ·pH体系依赖度 | 第67-68页 |
| ·dNDs富集前处理方法与传统前处理方法比较 | 第68-74页 |
| ·低浓度肽段富集评价 | 第68-71页 |
| ·耐盐度/耐表面活性剂性能评价 | 第71-74页 |
| ·dNDs在肝癌血清多肽研究中的应用 | 第74-77页 |
| ·dNDs在宫内生长迟缓大鼠肾脏发育异常可能机制中的应用 | 第77-88页 |
| ·结论与展望 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-96页 |
| 第三章 纳米金刚石在MALDI靶上前处理方法中的应用研究 | 第96-118页 |
| ·引言 | 第96-98页 |
| ·实验部分 | 第98-100页 |
| ·材料和试剂 | 第98页 |
| ·仪器设备 | 第98页 |
| ·标准试剂与实际样本制备 | 第98-99页 |
| ·标准蛋白/肽段制备 | 第98页 |
| ·实际样本的制备 | 第98-99页 |
| ·dNDs辅助涂层的制备 | 第99页 |
| ·MALDI-TOF/TOF MS分析及数据处理 | 第99-100页 |
| ·结果与讨论 | 第100-113页 |
| ·dNDs辅助涂层制备及其对质谱信号的增强研究 | 第100-102页 |
| ·辅助涂层靶点内以及靶点间的样品信号重复性研究 | 第102-104页 |
| ·缩小dNDs辅助涂层面积实现靶上富集 | 第104-105页 |
| ·dNDs辅助涂层下的检测灵敏度评价 | 第105-108页 |
| ·dNDs辅助涂层靶上耐盐评价 | 第108-109页 |
| ·dNDs辅助涂层在实际样品中的应用 | 第109-113页 |
| ·结论与展望 | 第113页 |
| 参考文献 | 第113-118页 |
| 第四章 纳米金刚石固定化酶及其在蛋白质组学中的应用 | 第118-144页 |
| ·引言 | 第118-119页 |
| ·实验部分 | 第119-123页 |
| ·材料和试剂 | 第119页 |
| ·仪器设备 | 第119页 |
| ·酶在dNDs表面的固定化过程 | 第119-120页 |
| ·氧化/酸化dND颗粒制备 | 第119页 |
| ·EDC/NHS活化dNDs表面 | 第119-120页 |
| ·酶的固定 | 第120页 |
| ·dNDs-酶的表征 | 第120页 |
| ·电子显微镜表征 | 第120页 |
| ·傅立叶变换红外光谱表征 | 第120页 |
| ·dNDs-Try的性质评价 | 第120-122页 |
| ·酶固定量的评价 | 第120页 |
| ·dNDs-Try的反应动力学评价 | 第120-121页 |
| ·dNDs-Try的耐受度评价 | 第121-122页 |
| ·标准蛋白的溶液酶解 | 第122页 |
| ·dNDs-Try以及dNDs-PNGase F对标准蛋白的酶解 | 第122页 |
| ·MALDI-TOF-MS/MS分析及数据处理 | 第122-123页 |
| ·结果与讨论 | 第123-139页 |
| ·酶的固定化以及表征 | 第123-126页 |
| ·游离酶以及固定化酶的反应动力学研究 | 第126-128页 |
| ·dNDs-Try的耐受度研究 | 第128-131页 |
| ·dNDs-Try在蛋白质组学中的应用 | 第131-138页 |
| ·在溶液体系中的应用 | 第131-134页 |
| ·dNDs-Try MALDI靶上酶解 | 第134-138页 |
| ·dNDs-PNGase F的制备评价 | 第138-139页 |
| ·结论与展望 | 第139-140页 |
| 参考文献 | 第140-144页 |
| 第五章 硼酸功能化dNDs的制备及其在糖蛋白/糖肽富集方法中的应用 | 第144-168页 |
| ·引言 | 第144-145页 |
| ·实验部分 | 第145-148页 |
| ·材料与试剂 | 第145页 |
| ·硼酸功能化dNDs的合成 | 第145-146页 |
| ·硼酸功能化dNDs的表征 | 第146页 |
| ·dNDs-PL/PEG-APBA纳米粒子用于富集糖基化肽 | 第146页 |
| ·商品化硼酸磁珠对糖基化肽的富集 | 第146页 |
| ·dNDs-PL/PEG-APBA纳米粒子用于鼠肝样品中糖基化蛋白分析 | 第146-147页 |
| ·MALDI-MS | 第147-148页 |
| ·鼠肝多肽馏分的Nano-LC/MS分析 | 第148页 |
| ·Nano-LC/MS数据库检索分析 | 第148页 |
| ·结果与讨论 | 第148-161页 |
| ·硼酸功能化dNDs的合成及其表征分析 | 第148-150页 |
| ·糖肽的富集 | 第150-161页 |
| ·dNDs-PL/PEG-APBA对N-糖肽的富集原理及流程 | 第150-151页 |
| ·dNDs-PL/PEG-APBA对N-糖肽的富集及选择特异性评价 | 第151-156页 |
| ·dNDs-PL/PEG-APBA对N-糖肽的富集效率评价 | 第156-158页 |
| ·dNDs-PL/PEG-APBA对N-糖肽的富集回收率评价 | 第158-159页 |
| ·dNDs-PL/PEG-APBA对小鼠肝脏中N-糖基化修饰蛋白的鉴定研究 | 第159-161页 |
| ·结论与展望 | 第161-165页 |
| 参考文献 | 第165-168页 |
| 第六章 Fe_3O_4@SiO_2@[dNDs]n磁性微球的合成及其在分泌蛋白质组学中的应用 | 第168-202页 |
| ·引言 | 第168页 |
| ·实验部分 | 第168-173页 |
| ·材料和试剂 | 第168-169页 |
| ·仪器设备 | 第169页 |
| ·Fe_3O_4@SiO_2@[dNDs]n磁性微球的合成 | 第169-170页 |
| ·四氧化三铁磁性微球材料的合成 | 第169页 |
| ·具有核壳结构的Fe_3O_4@SiO_2-NH_2磁性微球材料的合成 | 第169-170页 |
| ·Fe_3O_4@SiO_2@[dNDs]n磁性微球的合成 | 第170页 |
| ·材料表征 | 第170页 |
| ·电子显微镜表征 | 第170页 |
| ·傅立叶变换红外光谱表征 | 第170页 |
| ·Fe_3O_4@SiO_2@[dNDs]n磁性微球用于肽段富集 | 第170-171页 |
| ·标准蛋白的酶解 | 第170-171页 |
| ·肽段的分离富集 | 第171页 |
| ·MALDI-TOF/TOF分析及数据处理 | 第171页 |
| ·Fe_3O_4@SiO_2@[dNDs]n磁性微球用于蛋白富集 | 第171页 |
| ·蛋白富集 | 第171页 |
| ·SDS凝胶分离分析 | 第171页 |
| ·Fe_3O_4@Si_O2@[dNDs]n磁性微球用于有/无四环素刺激HepAD38分泌差异分析 | 第171-173页 |
| ·HepAD38细胞培养及分泌上清收集 | 第172页 |
| ·Fe_3O_4@SiO_2@[dNDs]n磁性微球用于分泌蛋白的富集 | 第172页 |
| ·HepAD38(Tet~(+/-))分泌蛋白的itraq标记 | 第172页 |
| ·HepAD38(Tet~(+/-))分泌蛋白的off-line 2D-LC-MS分析鉴定 | 第172-173页 |
| ·结果讨论 | 第173-197页 |
| ·Fe_3O_4@SiO_2@[dNDs]n磁性微球的制备及表征 | 第173-176页 |
| ·Fe_3O_4@SiO_2@[dNDs]n磁性微球对肽段富集评价 | 第176-179页 |
| ·Fe_3O_4@SiO_2@[dNDs]n磁性微球对蛋白富集评价 | 第179-182页 |
| ·Fe_3O_4@SiO_2@[dNDs]n磁性微球用于HepAD38(Tet~(+/-))差异分泌蛋白分析 | 第182-197页 |
| ·结论与展望 | 第197页 |
| 参考文献 | 第197-202页 |
| 博士学位攻读期间文章发表情况 | 第202-204页 |
| 致谢 | 第204-205页 |
