| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 绪论 | 第10-22页 |
| ·国内外水资源现状及污水资源化的必要性 | 第10-12页 |
| ·城市污水回用面临的病原微生物污染问题 | 第12-13页 |
| ·水中沙门菌的健康危害 | 第13-15页 |
| ·沙门菌传统检测方法的局限性 | 第15-16页 |
| ·PCR技术原理及其应用 | 第16-19页 |
| ·常规PCR检测方法 | 第16-18页 |
| ·定量PCR检测方法 | 第18-19页 |
| ·研究目的与内容 | 第19-22页 |
| ·问题的提出 | 第19-20页 |
| ·研究目的 | 第20-21页 |
| ·研究内容 | 第21-22页 |
| 2 城市污水二级处理水中沙门菌浓缩方法的建立 | 第22-29页 |
| ·细菌在滤膜上的吸附-洗脱机理 | 第22-23页 |
| ·实验材料 | 第23页 |
| ·参考菌株 | 第23页 |
| ·主要试剂和设备 | 第23页 |
| ·微孔滤膜吸附-洗脱法的建立 | 第23-28页 |
| ·方法和流程 | 第23-24页 |
| ·微孔滤膜材质对沙门菌浓缩的影响 | 第24-25页 |
| ·微孔滤膜孔径对沙门菌浓缩的影响 | 第25-26页 |
| ·洗脱方式的选择和洗脱剂的比较 | 第26-27页 |
| ·浓缩方法的确定 | 第27-28页 |
| ·小结 | 第28-29页 |
| 3 城市污水二级处理水中沙门菌PCR检测方法的建立 | 第29-41页 |
| ·试验材料 | 第29-30页 |
| ·参考菌株和水样 | 第29页 |
| ·主要试剂 | 第29-30页 |
| ·主要设备 | 第30页 |
| ·沙门菌PCR检测方法的建立 | 第30-39页 |
| ·沙门菌引物的筛选 | 第30-32页 |
| ·沙门菌引物139和141的特异性验证 | 第32-34页 |
| ·水样的浓缩 | 第34页 |
| ·DNA的提取 | 第34页 |
| ·PCR反应体系优化以及退火温度的选择 | 第34-37页 |
| ·PCR反应体系和条件 | 第37-38页 |
| ·沙门菌PCR方法的灵敏度 | 第38-39页 |
| ·PCR检测方法的应用 | 第39-40页 |
| ·小结 | 第40-41页 |
| 4 沙门菌实时荧光定量PCR检测方法的建立 | 第41-52页 |
| ·试验材料 | 第41-42页 |
| ·参考菌株和主要试剂 | 第41-42页 |
| ·主要设备 | 第42页 |
| ·实时荧光定量PCR标准品的构建 | 第42-47页 |
| ·相关试剂的制备 | 第44页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第44-45页 |
| ·PCR扩增产物的纯化回收 | 第45页 |
| ·克隆的筛选和重组质粒标准品的制备 | 第45-47页 |
| ·实时荧光定量PCR的反应体系和反应条件 | 第47-48页 |
| ·读板温度的确定 | 第47-48页 |
| ·实时荧光定量PCR的反应体系 | 第48页 |
| ·实时荧光定量PCR的反应条件 | 第48页 |
| ·不同标准品制作标准曲线的对比 | 第48-49页 |
| ·标准曲线的测定及评价 | 第49-51页 |
| ·小结 | 第51-52页 |
| 5 城市污水二级处理水中沙门菌的污染监测 | 第52-59页 |
| ·试验材料与方法 | 第52-55页 |
| ·采样点及采样方法 | 第52-53页 |
| ·PCR检测 | 第53页 |
| ·微生物学检测方法 | 第53-55页 |
| ·理化指标的测定 | 第55页 |
| ·检测结果分析与讨论 | 第55-58页 |
| ·二级出水中传统细菌学指标检测结果 | 第55-56页 |
| ·沙门菌常规PCR检测结果 | 第56页 |
| ·沙门菌定量PCR检测结果 | 第56-57页 |
| ·沙门菌定量PCR指标与传统细菌学指标的相关性分析 | 第57页 |
| ·沙门菌定量PCR指标与理化因子的相关性分析 | 第57-58页 |
| ·小结 | 第58-59页 |
| 6 结论与建议 | 第59-61页 |
| ·结论 | 第59-60页 |
| ·建议 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-66页 |
| 附录 | 第66页 |