缩略语表 | 第1-12页 |
中文摘要 | 第12-15页 |
英文摘要 | 第15-19页 |
前言 | 第19-21页 |
文献回顾 | 第21-47页 |
第一部分 中药抗肿瘤研究进展 | 第21-29页 |
1 中药抗肿瘤研究概述 | 第21页 |
2 中药抗肿瘤机制 | 第21-25页 |
·对肿瘤细胞的作用 | 第22-24页 |
·调节机体免疫功能状态 | 第24页 |
·抑制肿瘤血管的生成 | 第24-25页 |
·抗突变 | 第25页 |
3 中药抗肿瘤临床应用模式 | 第25页 |
4 中药抗肿瘤研究的现状及前景 | 第25-29页 |
·整体观念 | 第26页 |
·中药抗肿瘤研究对现代医学的冲击 | 第26页 |
·中药现代化实践与思考 | 第26-27页 |
·中药抗肿瘤研究任重道远 | 第27页 |
·中药抗肝癌 | 第27-29页 |
第二部分 红藤的研究现状及临床应用 | 第29-34页 |
1 红藤概述 | 第29页 |
2 红藤在临床上的应用 | 第29-31页 |
·对心血管系统的影响 | 第30页 |
·对小鼠血浆中环核苷酸的影响 | 第30页 |
·影响动物血小板聚集 | 第30页 |
·耐缺氧作用 | 第30页 |
·抑制细菌 | 第30页 |
·作用动物胃肠道平滑肌 | 第30-31页 |
3 红藤抗肿瘤研究 | 第31-34页 |
·红藤抗肿瘤成分 | 第31-32页 |
·红藤抗肿瘤机制 | 第32-33页 |
·红藤提出物对肝癌细胞株HepG-2 抑制作用 | 第33-34页 |
第三部分 大环内酯类药物的抗肿瘤作用研究 | 第34-40页 |
1 大环内酯类药物现状 | 第34页 |
2 大环内酯类药物的药理作用 | 第34-36页 |
·竞争性结合P - 糖蛋白 | 第35页 |
·促进细胞因子的抗肿瘤作用 | 第35页 |
·逆转或延缓化疗药物的耐药性 | 第35-36页 |
·免疫调节作用 | 第36页 |
·抗肿瘤血管的生成和肿瘤细胞的粘附 | 第36页 |
·抗幽门螺杆菌 | 第36页 |
3 大环内酯类药物临床应用 | 第36-40页 |
·大环内酯类药物治疗良性疾病 | 第36-37页 |
·大环内酯类药物治疗恶性疾病 | 第37-40页 |
第四部分 线粒体途径诱导凋亡的研究现状 | 第40-47页 |
1 线粒体细胞色素C 的释放 | 第40-41页 |
2 线粒体通透转换孔(Permeability transition pore,PTP) | 第41-43页 |
3 影响PTP 开放的凋亡信号 | 第43-47页 |
·Bcl-2 基因家族 | 第43-44页 |
·胞浆中的钙离子 | 第44页 |
·活性氧类 | 第44-47页 |
实验一 红藤四萜大环内酯酸钠对肝癌的药效学研究 | 第47-58页 |
1 材料 | 第47-50页 |
·红藤四萜大环内酯酸钠制备 | 第47-48页 |
·细胞株 | 第48页 |
·实验动物 | 第48页 |
·主要试剂 | 第48页 |
·主要试剂配制 | 第48-49页 |
·主要仪器设备 | 第49-50页 |
2 方法 | 第50-52页 |
·细胞培养 | 第50页 |
·MTT 法测定细胞生长曲线 | 第50页 |
·克隆形成实验 | 第50页 |
·细胞周期检测 | 第50-51页 |
·凋亡检测 | 第51-52页 |
·动物体内抑瘤实验 | 第52页 |
3 结果 | 第52-56页 |
·红藤四萜大环内酯酸纳作用后细胞形态学改变 | 第52-53页 |
·红藤四萜大环内酯酸纳抑制肝癌细胞增殖及克隆形成 | 第53-54页 |
·红藤四萜大环内酯酸纳阻滞肿瘤细胞周期于S 期 | 第54页 |
·红藤四萜大环内酯酸纳诱导肿瘤细胞凋亡 | 第54-56页 |
·红藤四萜大环内酯酸纳抑制裸鼠体内移植瘤生长实验结果 | 第56页 |
·红藤四萜大环内酯酸纳系统给药后主要器官病理学观察结果 | 第56页 |
4 讨论 | 第56-58页 |
实验二 红藤四萜大环内酯酸钠作用HepG-2 细胞后的基因芯片分析 | 第58-65页 |
1 材料 | 第58-60页 |
·细胞株 | 第58页 |
·主要试剂 | 第58-59页 |
·主要试剂配制 | 第59页 |
·主要仪器设备 | 第59-60页 |
2 方法 | 第60页 |
·样品制备 | 第60页 |
·基因芯片杂交反应 | 第60页 |
·通路分析 | 第60页 |
3 结果 | 第60-64页 |
·样品质量检测结果 | 第60-62页 |
·芯片杂交反应结果 | 第62-63页 |
·通路分析结果 | 第63-64页 |
4 讨论 | 第64-65页 |
实验三 红藤四萜大环内酯酸钠通过内源性线粒体途径诱导肝癌细胞凋亡的印证研究 | 第65-75页 |
1 材料 | 第65-68页 |
·细胞株 | 第65页 |
·主要试剂 | 第65-66页 |
·主要仪器设备 | 第66页 |
·主要试剂配制 | 第66-68页 |
2 方法 | 第68-70页 |
·引物设计与合成 | 第68-69页 |
·RT-PCR 扩增目的基因片段 | 第69-70页 |
·Western Blot 检测蛋白表达 | 第70页 |
·线粒体膜电位Δψm 检测 | 第70页 |
3 结果 | 第70-73页 |
·caspase 活性及表达水平检测结果 | 第70-71页 |
·线粒体膜电位检测结果 | 第71-72页 |
·药物作用肝癌细胞后细胞色素的Western blot 检测 | 第72页 |
·Bcl-2 家族基因mRNA 及蛋白表达水平检测结果 | 第72-73页 |
4 讨论 | 第73-75页 |
实验四 红藤四萜大环内酯酸钠通过细胞周期阻滞诱导肝癌细胞凋亡的印证研究 | 第75-85页 |
1 材料 | 第75-79页 |
·细胞株 | 第75页 |
·细菌菌株 | 第75页 |
·载体 | 第75-77页 |
·主要仪器设备 | 第77-78页 |
·主要试剂配制 | 第78-79页 |
2 方法 | 第79-81页 |
·PCR 引物设计与合成 | 第79页 |
·针对skp2 的siRNA 寡核苷酸设计与合成 | 第79页 |
·针对skp2 的干涉载体构建 | 第79-80页 |
·重组pSilencer 4.1/skp2 干涉载体的稳定转染 | 第80页 |
·RT-PCR 和Western Blot 检测 | 第80-81页 |
·稳定转染的细胞株经药物作用后其细胞生物学行为检测 | 第81页 |
3 结果 | 第81-84页 |
·重组表达载体转染细胞后neo 基因的PCR 扩增结果 | 第81页 |
·稳定转染细胞中Skp2 表达水平的检测结果 | 第81-82页 |
·稳定转染肝癌细胞经药物作用后生物学行为检测结果 | 第82-84页 |
4 讨论 | 第84-85页 |
实验五 红藤四萜大环内酯酸钠一般毒理学研究 | 第85-89页 |
1 材料 | 第85页 |
·药物冻干粉 | 第85页 |
·SD 大鼠 | 第85页 |
·主要仪器 | 第85页 |
2 方法 | 第85-86页 |
·药物作用前后SD 大鼠血压及心率监测 | 第85-86页 |
·药物作用前后SD 大鼠血常规及各项生化指标监测 | 第86页 |
·药物作用前后SD 大鼠主要脏器的形态学观察 | 第86页 |
3 结果 | 第86-88页 |
·SD 大鼠血压、心率监测结果 | 第86页 |
·SD 大鼠给药前后血常规监测结果 | 第86-87页 |
·SD 大鼠各项生化指标监测结果 | 第87页 |
·SD 大鼠给药后主要脏器的组织形态学观察结果 | 第87-88页 |
4 讨论 | 第88-89页 |
小结 | 第89-90页 |
参考文献 | 第90-104页 |
个人简历和研究成果 | 第104-105页 |
致谢 | 第105页 |