摘要 | 第9-10页 |
ABSTRACT | 第10-11页 |
缩略语 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-43页 |
1 水稻的感光性、感温性和基本营养生长性 | 第13-14页 |
1.1 感光性 | 第13-14页 |
1.2 感温性 | 第14页 |
1.3 基本营养生长性 | 第14页 |
2 水稻抽穗期的遗传研究 | 第14-15页 |
2.1 水稻抽穗期的遗传调控 | 第14-15页 |
2.2 杂交稻抽穗期的遗传表现 | 第15页 |
3 水稻抽穗期基因的发掘 | 第15-18页 |
3.1 水稻光周期不敏感型抽穗基因的定位 | 第16-17页 |
3.2 水稻光周期敏感型抽穗基因的定位 | 第17-18页 |
4 水稻抽穗期基因的克隆和功能分析 | 第18-36页 |
4.1 光受体类基因的克隆 | 第18-19页 |
4.1.1 SE5的克隆 | 第18-19页 |
4.1.2 光敏色素类基因的克隆 | 第19页 |
4.2 节律钟基因的克隆 | 第19-21页 |
4.2.1 OsGI的克隆 | 第19-20页 |
4.2.2 Hd17/Ef7/OsELF3的克隆 | 第20-21页 |
4.3 Hd6的克隆 | 第21页 |
4.4 水稻CO类基因的克隆 | 第21-25页 |
4.4.1 Hd1的克隆 | 第22-23页 |
4.4.2 OsCO3的克隆 | 第23页 |
4.4.3 Ghd7的克隆 | 第23-25页 |
4.4.4 OsCOL4的克隆 | 第25页 |
4.5 MADS box类基因的克隆 | 第25-27页 |
4.6 水稻‘成花素’基因Hd3a和RFT1的克隆 | 第27-29页 |
4.7 HD3A互作蛋白的克隆 | 第29-31页 |
4.8 Ehd1的克隆 | 第31-32页 |
4.9 Ehd2/RID1/OsID1的克隆 | 第32-33页 |
4.10 Ehd3的克隆 | 第33-34页 |
4.11 DTH8/Ghd8的克隆 | 第34-35页 |
4.12 PPS的克隆 | 第35页 |
4.13 LVP1的克隆 | 第35-36页 |
5 水稻抽穗期的光周期调控网络 | 第36-38页 |
5.1 短日照促进途径 | 第37页 |
5.2 长日照促进途径 | 第37-38页 |
5.3 长日照抑制途径 | 第38页 |
6 存在的问题与展望 | 第38-41页 |
6.1 新基因的发掘 | 第38-39页 |
6.1.1 微效基因的发掘 | 第38页 |
6.1.2 通过反向遗传学方法克隆新的水稻抽穗期基因 | 第38-39页 |
6.1.3 温敏相关抽穗期基因的发掘 | 第39页 |
6.2 水稻抽穗期分子信号调控网络的深入研究 | 第39-40页 |
6.3 杂交稻生育期超亲晚熟问题 | 第40页 |
6.4 抽穗期基因的在育种中的运用 | 第40-41页 |
6.5 水稻抽穗期调控基因的地理分布与演化 | 第41页 |
7 本研究的目的与意义 | 第41-43页 |
第二章 水稻抽穗期基因Ehd4的图位克隆 | 第43-53页 |
1 材料与方法 | 第44-47页 |
1.1 试验材料 | 第44页 |
1.2 田间实验 | 第44页 |
1.3 性状考查 | 第44-45页 |
1.4 DNA样品备制 | 第45页 |
1.5 InDel与dCAPS标记的开发 | 第45-46页 |
1.6 标记分析 | 第46页 |
1.7 连锁图谱构建与精细定位 | 第46-47页 |
1.8 候选基因的预测与分析 | 第47页 |
2 结果与分析 | 第47-52页 |
2.1 亲本材料的选择与初步分析 | 第47-48页 |
2.2 ehd4突变体的表型鉴定与遗传分析 | 第48-49页 |
2.3 ehd4的遗传分析 | 第49-50页 |
2.4 抽穗期基因EHD4的精细定位 | 第50-51页 |
2.5 目标区域候选基因预测与序列分析 | 第51页 |
2.6 转基因互补实验 | 第51-52页 |
3 小结 | 第52-53页 |
第三章 水稻抽穗期基因EHD4的初步功能分析 | 第53-79页 |
1 材料与方法 | 第53-58页 |
1.1 供试材料 | 第53页 |
1.2 试剂、质粒与菌株 | 第53页 |
1.3 大肠杆菌、农杆菌与酵母感受态细胞的制备及转化 | 第53-54页 |
1.4 Ehd4基因结构分析 | 第54页 |
1.5 基因植物转化载体的构建 | 第54页 |
1.6 基因的遗传转化 | 第54-55页 |
1.7 转基因植株的PCR鉴定 | 第55页 |
1.8 总RNA的提取与qRT-PCR | 第55页 |
1.9 组织GUS染色及细胞学观察 | 第55-56页 |
1.10 亚细胞定位 | 第56页 |
1.11 EHD4的酵母转录自激活实验 | 第56页 |
1.12 EHD4的原核表达及核酸体外结合实验 | 第56页 |
1.13 ehd4突变体的RNA重测序 | 第56页 |
1.14 酵母单、三杂交载体构建与互作验证 | 第56-57页 |
1.15 瞬时转录激活实验 | 第57-58页 |
2 结果与分析 | 第58-77页 |
2.1 Ehd4的组织表达 | 第58页 |
2.2 Ehd4的节律及生长周期表达 | 第58页 |
2.3 EHD4蛋白的亚细胞定位 | 第58-59页 |
2.4 EHD4蛋白全长及不同截断的转录活性测定 | 第59页 |
2.5 EHD4蛋白核酸体外结合实验 | 第59-60页 |
2.6 Ehd4与水稻光周期开花途径 | 第60-64页 |
2.7 酵母单、双、三杂交实验 | 第64-66页 |
2.8 ehd4突变体的转录谱分析 | 第66-73页 |
2.9 Ehd4在不同水稻品种间的差异 | 第73-77页 |
3 小结 | 第77-79页 |
第四章 全文总结 | 第79-85页 |
1 全文结论与讨论 | 第79-82页 |
1.1 Ehd4是促进水稻抽穗的关键基因 | 第79-80页 |
1.2 Ehd4的精细定位与克隆 | 第80页 |
1.3 Ehd4在水稻呈现组成型和节律表达 | 第80页 |
1.4 EHD4可能发挥着转录调节因子的功能 | 第80-81页 |
1.5 Ehd4通过Ehd1来调节‘成花素’基因的表达 | 第81-82页 |
1.6 ehd4突变体基因组水平的转录谱分析 | 第82页 |
1.7 Ehd4是一个稻属特有的并高度保守的基因 | 第82页 |
2 本研究的创新点 | 第82-83页 |
2.1 研究材料的选择 | 第82-83页 |
2.2 夯实的遗传分析 | 第83页 |
2.3 Ehd4的独特性 | 第83页 |
2.4 Ehd4在育种中利用的潜在前景 | 第83页 |
3 水稻抽穗期研究展望 | 第83-85页 |
参考文献 | 第85-93页 |
附录 | 第93-105页 |
1 附表 | 第93-100页 |
2 常用试剂配制 | 第100-105页 |
在读期间发表的论文 | 第105-107页 |
致谢 | 第107页 |