| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-20页 |
| 1.1 南方鲇研究概况 | 第10-12页 |
| 1.1.1 南方鲇概述 | 第10页 |
| 1.1.2 南方鲇细菌性病原研究 | 第10页 |
| 1.1.3 南方鲇主要免疫器官研究 | 第10-11页 |
| 1.1.4 南方鲇疫苗研究 | 第11页 |
| 1.1.5 南方鲇能量生态学研究 | 第11-12页 |
| 1.2 硬骨鱼免疫球蛋白研究进展 | 第12-17页 |
| 1.2.1 免疫球蛋白分子结构 | 第12-13页 |
| 1.2.2 鱼类免疫球蛋白种类 | 第13-16页 |
| 1.2.3 免疫球蛋白多样性产生机制 | 第16-17页 |
| 1.2.4 免疫球蛋白产生的细胞和组织学基础 | 第17页 |
| 1.3 单克隆抗体在鱼类免疫学中应用 | 第17-19页 |
| 1.3.1 鱼类Ig的结构研究 | 第17-18页 |
| 1.3.2 鱼类血清Ig检测和纯化 | 第18页 |
| 1.3.3 鱼类B淋巴细胞发育研究 | 第18-19页 |
| 1.4 单克隆抗体在水产养殖业应用 | 第19-20页 |
| 1.4.1 水生动物病原诊断 | 第19页 |
| 1.4.2 疫苗研制中的应用 | 第19-20页 |
| 第二章 绪论 | 第20-22页 |
| 2.1 选题背景及意义 | 第20页 |
| 2.2 研究目的和主要研究内容 | 第20-22页 |
| 2.2.1 研究目的 | 第20-21页 |
| 2.2.2 主要研究内容 | 第21-22页 |
| 第三章 南方鲇血清免疫球蛋白的纯化及理化性质初步鉴定 | 第22-32页 |
| 3.1 引言 | 第22页 |
| 3.2 材料和方法 | 第22-26页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第22-23页 |
| 3.2.2 南方鲇血清制备 | 第23页 |
| 3.2.3 Protein A亲和层析纯化南方鲇血清Ig | 第23页 |
| 3.2.4 MBP亲和层析分离纯化南方鲇血清Ig | 第23-24页 |
| 3.2.5 优球蛋白法纯化南方鲇血清Ig | 第24页 |
| 3.2.6 sepharose-4B凝胶层析纯化南方鲇血清Ig | 第24-25页 |
| 3.2.7 SDS-PAGE检测蛋白纯度及分子量 | 第25页 |
| 3.2.8 蛋白浓度测定 | 第25-26页 |
| 3.3 结果 | 第26-29页 |
| 3.3.1 SDS-PAGE检测四种纯化方法结果 | 第26-27页 |
| 3.3.2 SDS-PAGE分子量测定结果 | 第27-28页 |
| 3.3.3 纯化产物蛋白质含量测定结果 | 第28-29页 |
| 3.4 讨论 | 第29-32页 |
| 3.4.1 优球蛋白法纯化南方鲇血清Ig | 第29页 |
| 3.4.2 sepharose-4B凝胶层析纯化南方鲇血清Ig | 第29-30页 |
| 3.4.3 MBP亲和层析纯化南方鲇血清Ig | 第30页 |
| 3.4.4 Protein A亲和层析纯化南方鲇血清Ig | 第30-32页 |
| 第四章 鼠抗南方鲇免疫球蛋白单克隆抗体制备及特性分析 | 第32-42页 |
| 4.1 引言 | 第32页 |
| 4.2 材料 | 第32-33页 |
| 4.2.1 实验动物 | 第32页 |
| 4.2.2 主要试剂和仪器 | 第32-33页 |
| 4.3 方法 | 第33-37页 |
| 4.3.1 小鼠免疫 | 第33页 |
| 4.3.2 抗血清效价检测 | 第33页 |
| 4.3.3 骨髓瘤细胞的复苏和培养 | 第33页 |
| 4.3.4 饲养细胞的制备 | 第33-34页 |
| 4.3.5 细胞融合 | 第34页 |
| 4.3.6 筛选阳性杂交瘤细胞 | 第34页 |
| 4.3.7 亚克隆阳性杂交瘤细胞 | 第34-35页 |
| 4.3.8 冻存及扩大培养阳性杂交瘤细胞 | 第35页 |
| 4.3.9 ELISA检测单克隆抗体的抗原识别特异性 | 第35页 |
| 4.3.10 Western-blotting分析 | 第35-36页 |
| 4.3.11 南方鲇Ig单克隆抗体纯化 | 第36页 |
| 4.3.12 南方鲇Ig单克隆抗体的纯度及浓度鉴定 | 第36页 |
| 4.3.13 南方鲇Ig单克隆抗体亚类检测 | 第36-37页 |
| 4.4 结果 | 第37-40页 |
| 4.4.1 抗血清效价检测 | 第37页 |
| 4.4.2 阳性杂交瘤细胞筛选结果 | 第37页 |
| 4.4.3 单克隆抗体抗原特异性结果 | 第37-38页 |
| 4.4.4 Western-blotting检测结果 | 第38-39页 |
| 4.4.5 南方鲇Ig单克隆抗体纯度及浓度结果 | 第39页 |
| 4.4.6 南方鲇Ig单克隆抗体亚类鉴定结果 | 第39-40页 |
| 4.5 讨论 | 第40-42页 |
| 4.5.1 制备单克隆抗体失的影响因素分析 | 第40-41页 |
| 4.5.2 ELISA检测单抗识别抗原特异性分析 | 第41页 |
| 4.5.3 Western-blotting检测单克隆抗体特性分析 | 第41-42页 |
| 第五章 南方鲇Ig单克隆抗体在免疫组化及流式细胞术检测中的应用 | 第42-48页 |
| 5.1 引言 | 第42页 |
| 5.2 材料和方法 | 第42-43页 |
| 5.2.1 实验材料和仪器 | 第42页 |
| 5.2.2 分离南方鲇外周血白细胞 | 第42页 |
| 5.2.3 流式细胞术分析 | 第42-43页 |
| 5.2.4 外周血白细胞免疫组化 | 第43页 |
| 5.3 结果与分析 | 第43-46页 |
| 5.3.1 流式细胞分析结果 | 第43-45页 |
| 5.3.2 外周血白细胞免疫组化结果 | 第45-46页 |
| 5.4 讨论 | 第46-48页 |
| 5.4.1 外周血白细胞分离纯化 | 第46页 |
| 5.4.2 流式细胞术分析 | 第46页 |
| 5.4.3 免疫组化结果分析 | 第46-48页 |
| 第六章 全文结论 | 第48-50页 |
| 6.1 全文结论 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-58页 |
| 附录1 | 第58-62页 |
| 附录2 | 第62-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
