目录 | 第4-8页 |
中文摘要 | 第8-11页 |
Abstract | 第11-14页 |
第一章 文献综述 | 第15-47页 |
1.1 引言 | 第15-16页 |
1.2 抗体在疾病蛋白质分子标志物分析检测中的应用进展 | 第16-21页 |
1.2.1 概述 | 第16-19页 |
1.2.2 生物条码技术(bio-barcode assay) | 第19-20页 |
1.2.3 邻位连接技术(proximity ligation assay) | 第20-21页 |
1.3 核酸适配体在疾病蛋白分子标志物分析检测中的应用进展 | 第21-29页 |
1.3.1 概述 | 第21-24页 |
1.3.2 荧光方法 | 第24-27页 |
1.3.3 比色方法 | 第27-29页 |
1.3.4 电化学方法 | 第29页 |
1.3.5 其他方法 | 第29页 |
1.4 靶上亲和MALDI-TOF质谱技术在分子标记物检测中的应用 | 第29-33页 |
1.5 本论文选题意义 | 第33-34页 |
参考文献 | 第34-47页 |
第二章 适配体修饰的Fe_3O_4@C@Au用于凝血酶的选择性富集 | 第47-81页 |
2.1 前言 | 第47-48页 |
2.2 实验部分 | 第48-52页 |
2.2.1 材料、试剂和仪器 | 第48-50页 |
2.2.2 Fe_3O_4@C@Au的合成 | 第50-51页 |
2.2.2.1 纳米金胶的合成 | 第50页 |
2.2.2.2 Fe_3O_4@C磁性碳球的合成 | 第50页 |
2.2.2.3 Fe_3O_4@C@Au包金磁球的合成 | 第50-51页 |
2.2.3 凝血酶适配体的固定 | 第51页 |
2.2.4 凝血酶标准蛋白的检测 | 第51页 |
2.2.5 血样中凝血酶的加样回收 | 第51-52页 |
2.3 结果与讨论 | 第52-73页 |
2.3.1 实验流程 | 第52-55页 |
2.3.2 条件优化 | 第55-59页 |
2.3.2.1. 材料量优化和酶解条件优化 | 第55-56页 |
2.3.2.2. 材料的烘干 | 第56-57页 |
2.3.2.3. 点靶条件的优化 | 第57-59页 |
2.3.3 标准溶液中凝血酶蛋白的定量 | 第59-63页 |
2.3.4 特异性测试 | 第63-64页 |
2.3.5 血样中凝血酶的加样回收 | 第64-73页 |
2.3.5.1 关于减少血清非特异性吸附的尝试 | 第65-67页 |
2.3.5.2 提高血清中凝血酶检测选择性的尝试 | 第67-69页 |
2.3.5.3. 血清中凝血酶的加样回收 | 第69-73页 |
2.4 本章小结 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-81页 |
第三章 适配体阵列用于靶上快速富集和检测胰岛素 | 第81-107页 |
3.1 前言 | 第81-82页 |
3.2 实验部分 | 第82-84页 |
3.2.1 材料、仪器和试剂 | 第82页 |
3.2.2 靶板上金膜的修饰 | 第82-83页 |
3.2.2.1 金纳米颗粒的合成 | 第82-83页 |
3.2.2.2 二十面体金纳米晶体的合成 | 第83页 |
3.2.2.3 靶板上金膜的修饰 | 第83页 |
3.2.3 适配体的固定 | 第83-84页 |
3.2.4 标准胰岛素蛋白的检测 | 第84页 |
3.2.5 血样中胰岛素的定量 | 第84页 |
3.3 结果与讨论 | 第84-102页 |
3.3.1 条件优化 | 第85-97页 |
3.3.1.1 两种纳米金材料的比较 | 第85-87页 |
3.3.1.2 使用纳米金胶形成金膜条件的优化 | 第87-89页 |
3.3.1.3 适配体固定浓度的优化 | 第89-90页 |
3.3.1.4 胰岛素的自降解问题 | 第90-92页 |
3.3.1.5 金胶的用量和基质的体积对信号的影响 | 第92-95页 |
3.3.1.6 HSA的加入对信号的改善 | 第95-97页 |
3.3.2 标准胰岛素蛋白的检测 | 第97-99页 |
3.3.3 选择性 | 第99-100页 |
3.3.4 血样中胰岛素的回收 | 第100-102页 |
3.4 本章小结 | 第102-103页 |
参考文献 | 第103-107页 |
第四章 适配体阵列结合靶上激光酶解用于溶菌酶的快速富集和高效检测 | 第107-135页 |
4.1 前言 | 第107-109页 |
4.2 实验部分 | 第109-112页 |
4.2.1 材料、试剂和仪器 | 第109页 |
4.2.2 靶板上金膜的修饰 | 第109-110页 |
4.2.2.1 金纳米颗粒的合成 | 第109-110页 |
4.2.2.2 靶板上金膜的修饰 | 第110页 |
4.2.3 适配体的固定 | 第110页 |
4.2.4 激光辅助靶上酶解 | 第110页 |
4.2.5 标准溶液中溶菌酶的富集和定量 | 第110-111页 |
4.2.6 尿样中溶菌酶的检测 | 第111页 |
4.2.7 血样中溶菌酶的检测 | 第111页 |
4.2.8 激光加速酶解与普通靶上酶解效果的比较 | 第111-112页 |
4.3 结果与讨论 | 第112-127页 |
4.3.1 条件优化 | 第113-118页 |
4.3.1.1 金膜形成条件的优化 | 第113-114页 |
4.3.1.2 固定前适配体的加热变性 | 第114-115页 |
4.3.1.3 激光酶解条件的优化 | 第115页 |
4.3.1.4 富集时间的优化 | 第115-116页 |
4.3.1.5 富集时HSA的加入对信号的改善 | 第116-118页 |
4.3.2 标准溶液中溶菌酶的富集和定量 | 第118-121页 |
4.3.3 激光加速酶解和普通靶上酶解效果的比较 | 第121页 |
4.3.4 特异性测试 | 第121-122页 |
4.3.5 尿样中溶菌酶的检测 | 第122-124页 |
4.3.6 血样中溶菌酶的检测 | 第124-127页 |
4.4 本章小结 | 第127-128页 |
参考文献 | 第128-135页 |
第五章 双抗夹心探针放大技术对甲胎蛋白检测的探索 | 第135-157页 |
5.1 前言 | 第135-137页 |
5.2 实验部分 | 第137-140页 |
5.2.1 试剂、材料和仪器 | 第137页 |
5.2.2 材料的合成 | 第137-139页 |
5.2.2.1 Fe_3O_4@C@Glymo磁性微球的合成 | 第137-138页 |
5.2.2.2 Fe_3O_4@C@Glymo@APBA的合成 | 第138页 |
5.2.2.3 纳米金胶的合成 | 第138页 |
5.2.2.4 氨基磁球的合成 | 第138-139页 |
5.2.3 抗体和标签肽的固定 | 第139-140页 |
5.2.3.1 Fe_3O_4@C@Glymo@Antibody的合成 | 第139页 |
5.2.3.2 NH_2-Fe_3O_4@Antibody的合成 | 第139页 |
5.2.3.3 Fe_3O_4@C@Glymo@APBA@Antibody的合成 | 第139页 |
5.2.3.4 纳米金胶上抗体和标签肽的固定 | 第139-140页 |
5.2.4 SDS-PAGE分析 | 第140页 |
5.2.5 甲胎蛋白AFP的检测 | 第140页 |
5.3 结果与讨论 | 第140-150页 |
5.3.1 在磁球上固定IgG方法的选择 | 第140-148页 |
5.3.1.1 Fe_3O_4@C@Glymo@Antibody的富集效果 | 第142-144页 |
5.3.1.2 NH_2-Fe_3O_4@Antibody的富集效果 | 第144-145页 |
5.3.1.3 Fe_3O_4@C@Glymo@Antibody的富集效果 | 第145-148页 |
5.3.2 金胶上抗体和标签肽的固定 | 第148-149页 |
5.3.3 标准AFP蛋白检测效果初探 | 第149-150页 |
5.4 本章小结 | 第150-152页 |
参考文献 | 第152-157页 |
附录 | 第157-159页 |
致谢 | 第159-160页 |