| 中文摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略语/符号说明 | 第12-13页 |
| 前言 | 第13-22页 |
| 研究现状、成果 | 第13-20页 |
| 研究目的、方法 | 第20-22页 |
| 一、胰腺癌细胞乏氧微环境对miR-185、miR-191、miR-212表达水平的影响 | 第22-38页 |
| 1.1 对象和方法 | 第22-32页 |
| 1.1.1 实验对象 | 第22-24页 |
| 1.1.2 实验方法 | 第24-31页 |
| 1.1.3 统计分析 | 第31-32页 |
| 1.2 结果 | 第32-36页 |
| 1.2.1 低氧状态下HIF-1蛋白在胰腺癌细胞系中的表达 | 第32页 |
| 1.2.2 低氧状态下miR-185、miR-191、miR-212和HIF-1mRNA在胰腺癌细胞系中的表达 | 第32-36页 |
| 1.3 讨论 | 第36-37页 |
| 1.4 小结 | 第37-38页 |
| 二、上下调胰腺癌细胞中HIF-1表达对miR-185、miR-191、miR-212的影响 | 第38-46页 |
| 2.1 对象和方法 | 第38-40页 |
| 2.1.1 HIF-1过表达质粒、小干扰RNA转染胰腺癌细胞系Aspc-1和MIAPaCa-2上下调HIF-1的表达 | 第38-39页 |
| 2.1.2 转染后的操作 | 第39页 |
| 2.1.3 统计分析 | 第39-40页 |
| 2.2 结果 | 第40-44页 |
| 2.2.1 低氧状态下HIF-1蛋白在胰腺癌细胞系中的表达 | 第40-41页 |
| 2.2.2 干扰胰腺癌细胞系中HIF-1表达时HIF-1mRNA和miR-185、miR-191、miR-212的表达 | 第41-44页 |
| 2.3 讨论 | 第44-45页 |
| 2.4 小结 | 第45-46页 |
| 三、HIF-1调节miR-185、191、212表达的分子机制研究 | 第46-65页 |
| 3.1 对象和方法 | 第46-57页 |
| 3.1.1 实验仪器和试剂 | 第46-47页 |
| 3.1.2 染色体免疫共沉淀分析实验方法 | 第47-54页 |
| 3.1.3 双荧光素酶分析实验方法 | 第54-56页 |
| 3.1.4 统计分析 | 第56-57页 |
| 3.2 结果 | 第57-61页 |
| 3.2.1 染色质免疫共沉淀PCR检测miR-185、miR-191、miR-212与HIF-1的结合位点 | 第57-59页 |
| 3.2.2 双荧光素酶分析法测定HIF-1启动miR-185、miR-191、miR-212的转录 | 第59-61页 |
| 3.3 讨论 | 第61-64页 |
| 3.3.1 染色质免疫共沉淀PCR检测miR-185、miR-191、miR-212与HIF-1的结合位点 | 第61-62页 |
| 3.3.2 双荧光素酶分析法测定HIF-1启动miR-185、miR-191、miR-212的转录 | 第62-64页 |
| 3.4 小结 | 第64-65页 |
| 四、胰腺癌病人组织中HIF-1和miR-185、miR-191、miR-212表达相关性及与临床病理因素、预后分析 | 第65-79页 |
| 4.1 对象和方法 | 第65-67页 |
| 4.1.1 实验用具、试剂的准备 | 第65页 |
| 4.1.2 病例选择 | 第65页 |
| 4.1.3 组织RNA的提取 | 第65-66页 |
| 4.1.4 组织RNA提取后处理 | 第66页 |
| 4.1.5 统计分析 | 第66-67页 |
| 4.2 结果 | 第67-75页 |
| 4.2.1 HIF-1mRNA和miR-185、miR-191、miR-212在胰腺癌组织中表达的相关性和临床病理意义 | 第67-71页 |
| 4.2.2 HIF-1mRNA 和 tniR-185、miR-191、miR-212 与病人生存预后关系 | 第71-75页 |
| 4.3 讨论 | 第75-78页 |
| 4.4 小结 | 第78-79页 |
| 全文结论 | 第79-81页 |
| 论文创新点 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-92页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第92-93页 |
| 附录 | 第93-94页 |
| 综述 | 第94-114页 |
| 综述参考文献 | 第106-114页 |
| 致谢 | 第114-115页 |
