| 致谢 | 第9-10页 |
| 英文缩略词 | 第10-11页 |
| 摘要 | 第11-13页 |
| Abstract | 第13-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-35页 |
| 1.1 抗生素发展历史 | 第16-17页 |
| 1.2 抗生素耐药性 | 第17-19页 |
| 1.3 发现微生物天然产物的新技术和策略 | 第19-23页 |
| 1.3.1 高通量筛选微生物代谢产物 | 第19页 |
| 1.3.2 利用宏基因组和异源表达筛选不能培养微生物的产抗基因簇 | 第19-20页 |
| 1.3.3 开采微生物基因组以寻找隐藏抗生素合成途径 | 第20-22页 |
| 1.3.4 从新来源微生物中筛选新抗生素 | 第22-23页 |
| 1.4 基于靶点发现抗生素的新思路 | 第23-25页 |
| 1.5 脂肽抗生素 | 第25-34页 |
| 1.5.1 达托霉素(Daptomycin) | 第25-29页 |
| 1.5.2 多粘菌素(Polymyxin) | 第29-33页 |
| 1.5.3 WAP-8294A_2(WAP) | 第33页 |
| 1.5.4 棘球白素(Echinocandins) | 第33-34页 |
| 1.6 本工作研究目的和研究内容 | 第34-35页 |
| 第二章 天目类芽孢杆菌新种(Paenibacillus tianmuensis sp.nov.)的多相分类研究 | 第35-53页 |
| 2.1 材料 | 第36-37页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第36-37页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第37页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第37页 |
| 2.2 方法 | 第37-43页 |
| 2.2.1 菌落和形态观察 | 第37-38页 |
| 2.2.2 革兰氏染色 | 第38页 |
| 2.2.3 温度、pH以及盐浓度耐受性实验 | 第38-39页 |
| 2.2.4 生理生化特征实验 | 第39页 |
| 2.2.5 细胞壁氨基酸组分分析 | 第39页 |
| 2.2.6 细菌全细胞脂肪酸组分分析 | 第39-40页 |
| 2.2.7 16SrRNA和rpoB基因分析 | 第40-41页 |
| 2.2.8 基因组DNA G+C mol%含量分析 | 第41页 |
| 2.2.9 基因组DNA同源性分析 | 第41-42页 |
| 2.2.10 系统发育分析 | 第42-43页 |
| 2.3 结果 | 第43-50页 |
| 2.3.1 形态特征 | 第43-44页 |
| 2.3.2 生理生化特征 | 第44-45页 |
| 2.3.3 细胞化学组分分析 | 第45页 |
| 2.3.4 基于16S rRNA基因系统发育分析 | 第45-48页 |
| 2.3.5 基于rpoB基因的系统发育分析 | 第48-50页 |
| 2.3.6 与相近种的DNA-DNA同源性 | 第50页 |
| 2.4 讨论 | 第50-53页 |
| 第三章 菌株F6-B70所产脂肽类抗生素的分离、纯化及结构鉴定 | 第53-79页 |
| 3.1 材料 | 第55-57页 |
| 3.1.1 菌株 | 第55页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第55-56页 |
| 3.1.3 培养基 | 第56页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第56-57页 |
| 3.2 方法 | 第57-62页 |
| 3.2.1 培养基筛选 | 第57页 |
| 3.2.2 发酵培养 | 第57-58页 |
| 3.2.3 F6-B70所产脂肽类抗生素的分离纯化 | 第58页 |
| 3.2.4 质谱分析 | 第58-59页 |
| 3.2.5 氨基酸组成分析 | 第59页 |
| 3.2.6 脂肪酸分析 | 第59页 |
| 3.2.7 氨基酸构型分析 | 第59-60页 |
| 3.2.8 2,4-二硝基苯(DNP)衍生化实验 | 第60-61页 |
| 3.2.9 脂肽去酰化实验 | 第61页 |
| 3.2.10 脂肽开环实验 | 第61页 |
| 3.2.11 纸片扩散法测抗菌活性 | 第61-62页 |
| 3.2.12 最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)测定 | 第62页 |
| 3.3 结果 | 第62-75页 |
| 3.3.1 发酵条件筛选 | 第62-66页 |
| 3.3.2 抗铜绿假单胞菌活性物质的分离纯化 | 第66-67页 |
| 3.3.3 抗菌活性测定 | 第67页 |
| 3.3.4 ESI-MS分析 | 第67-69页 |
| 3.3.5 化合物3(八肽菌素,即battacin)的结构解析 | 第69-75页 |
| 3.4 讨论 | 第75-79页 |
| 第四章 八肽菌素体内外抗菌活性及抗菌机理研究 | 第79-108页 |
| 4.1 材料 | 第81-82页 |
| 4.1.1 菌株和细胞 | 第81页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第81页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第81-82页 |
| 4.2 方法 | 第82-89页 |
| 4.2.1 琼脂稀释法测定MIC | 第82-83页 |
| 4.2.2 杀菌曲线实验 | 第83页 |
| 4.2.3 菌膜抑制实验 | 第83-84页 |
| 4.2.4 溶血活性测定 | 第84页 |
| 4.2.5 细胞毒性试验 | 第84-85页 |
| 4.2.6 脂肽抗生素对铜绿假单胞菌细胞形态的影响 | 第85页 |
| 4.2.7 NPN细菌外膜通透性分析 | 第85-86页 |
| 4.2.8 细菌内膜通透性分析 | 第86-87页 |
| 4.2.9 小鼠急性毒性试验 | 第87-88页 |
| 4.2.10 小鼠体内保护实验 | 第88-89页 |
| 4.2.11 临床分离菌株的鉴定和药敏试验 | 第89页 |
| 4.3 结果 | 第89-105页 |
| 4.3.1 八肽菌素体外抗菌活性 | 第89-93页 |
| 4.3.2 八肽菌素细胞毒性 | 第93-94页 |
| 4.3.3 八肽菌素对细菌外膜通透性的影响 | 第94-95页 |
| 4.3.4 八肽菌素对细菌内膜去极化的影响 | 第95-96页 |
| 4.3.5 小鼠急性毒性实验 | 第96-101页 |
| 4.3.6 小鼠体内保护实验 | 第101-105页 |
| 4.4 讨论 | 第105-108页 |
| 第五章 全文总结及后续工作建议 | 第108-111页 |
| 5.1 全文总结 | 第108-110页 |
| 5.2 后续工作建议 | 第110-111页 |
| References | 第111-127页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第127-128页 |
| 已申报和授权专利 | 第128-129页 |
