| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 缩略词表 | 第6-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-23页 |
| 1.1 拟南芥是一种模式植物 | 第10页 |
| 1.1.1 拟南芥所具有的生物学特征 | 第10页 |
| 1.1.2 拟南芥所具有的分子生物学特征 | 第10页 |
| 1.2 GA调节植物发育的研究 | 第10-13页 |
| 1.2.1 GA对植物发育的调节 | 第10-11页 |
| 1.2.2 赤霉素代谢调控及其信号转导 | 第11-13页 |
| 1.3 酪蛋白激酶 | 第13-18页 |
| 1.3.1 酪蛋白激酶的分类 | 第13-14页 |
| 1.3.2 酪蛋白激酶的结构特性 | 第14-16页 |
| 1.3.3 酪蛋白激酶的作用 | 第16-18页 |
| 1.3.4 展望 | 第18页 |
| 1.4 酵母双杂交系统(Yeast two-hybrid system,Y2H) | 第18-22页 |
| 1.4.1 酵母双杂的原理 | 第18-20页 |
| 1.4.2 酵母双杂交系统的改进 | 第20-22页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 第二章 材料与方法 | 第23-35页 |
| 2.1 材料 | 第23-26页 |
| 2.1.1 植株,菌种 | 第23页 |
| 2.1.2 载体,工具酶及试剂 | 第23页 |
| 2.1.3 常用的试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.4 培养基 | 第24-26页 |
| 2.2 方法 | 第26-35页 |
| 2.2.1 拟南芥培养 | 第26页 |
| 2.2.2 CTAB法提取拟南芥的基因组DNA | 第26-27页 |
| 2.2.3 载体构建及转基因拟南芥表型分析 | 第27-32页 |
| 2.2.4 酵母双杂 | 第32页 |
| 2.2.5 蛋白诱导和纯化 | 第32-33页 |
| 2.2.6 蛋白酶活测定 | 第33页 |
| 2.2.7 激酶T-DNA插入株系的表型分析 | 第33-35页 |
| 第三章 结果及分析 | 第35-47页 |
| 3.1 恢复突变体LL-2的研究 | 第35-40页 |
| 3.1.1 LL-2部分恢复了pipe的表型 | 第35页 |
| 3.1.2 LL-2的基因定位 | 第35-36页 |
| 3.1.3 LL-2的遗传背景分析及纯化 | 第36-37页 |
| 3.1.4 pipe突变蛋白与DELLA蛋白的酵母双杂 | 第37-38页 |
| 3.1.5 pipe突变蛋白与正常蛋白的酶活测定 | 第38-40页 |
| 3.1.6 PIPE~(H183Y)单突变体和PIPE~(H183YT246M)双突变体转化植株的表型 | 第40页 |
| 3.2 点突变PIPE基因 | 第40-44页 |
| 3.2.1 扩增带入点突变的模板质粒 | 第40-41页 |
| 3.2.2 酶切PCR产物 | 第41页 |
| 3.2.3 带入突变位点质粒模板的获得 | 第41页 |
| 3.2.4 PIPE_(6110A)表达载体构建 | 第41页 |
| 3.2.5 筛选转基因植株 | 第41-42页 |
| 3.2.6 转基因植株表型分析 | 第42-43页 |
| 3.2.7 酵母双杂的结果及显色反应 | 第43-44页 |
| 3.3 激酶T-DNA插入株系的表型鉴定 | 第44-47页 |
| 3.3.1 激酶T-DNA插入株系信息检索 | 第44页 |
| 3.3.2 激酶T-DNA插入株系的遗传分析 | 第44-47页 |
| 第四章 讨论 | 第47-50页 |
| 4.1 二次诱变株系LL-2对pipe的表型有部分恢复 | 第47页 |
| 4.2 定点突变对PIPE基因功能的影响 | 第47-48页 |
| 4.3 激酶T-DNA插入对pipe的影响 | 第48-50页 |
| 小结 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
