| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 一. 前言 | 第11-15页 |
| 1. 胃腺癌国内外研究现状 | 第11页 |
| 2. 核酸适配子研究进展 | 第11-14页 |
| 3. 本课题研究思路 | 第14-15页 |
| 二. 实验部分 | 第15-38页 |
| 1. 实验材料 | 第15-21页 |
| 1.1 实验仪器和设备 | 第15-16页 |
| 1.2 实验试剂 | 第16-17页 |
| 1.3 主要试剂盒和工具酶 | 第17页 |
| 1.4 载体与菌株 | 第17-18页 |
| 1.5 主要试剂配制方法 | 第18-21页 |
| 1.6 引物设计与合成 | 第21页 |
| 2. 实验方法 | 第21-38页 |
| 2.1 胃腺癌原代细胞分离与鉴定 | 第21-23页 |
| 2.2 PCR条件优化 | 第23-25页 |
| 2.3 早期胃腺癌原代细胞适配子的筛选——Cell-SELEX筛选过程 | 第25-30页 |
| 2.4 最后一轮筛选产物PCR扩增与纯化 | 第30-31页 |
| 2.5 克隆与测序 | 第31-34页 |
| 2.6 适配子一级结构同源性分析及二级结构预测 | 第34页 |
| 2.7 适配子特异性和亲和力分析 | 第34-37页 |
| 2.8 早期胃腺癌原代细胞膜标志物的初步提取 | 第37-38页 |
| 三. 结果与讨论 | 第38-65页 |
| 1. 实验结果 | 第38-60页 |
| 1.1 原代细胞分离结果 | 第38-39页 |
| 1.2 PCR扩增条件优化结果 | 第39-41页 |
| 1.3 早期胃腺癌原代细胞适配子的筛选过程 | 第41-43页 |
| 1.4 TaqDNA聚合酶扩增最后一轮ssDNA结果 | 第43-44页 |
| 1.5 克隆与测序结果 | 第44-45页 |
| 1.6 适配子测序结果及结构分析 | 第45-56页 |
| 1.7 适配子特异性和亲和力分析结果 | 第56-59页 |
| 1.8 早期胃腺癌原代细胞膜标志物初步提取结果 | 第59-60页 |
| 2. 讨论 | 第60-65页 |
| 2.1 胶原酶提取早期胃腺癌原代细胞的可行性 | 第60-61页 |
| 2.2 梯度PCR技术探索扩增条件 | 第61页 |
| 2.3 筛选到特异性适配子采取的措施 | 第61-63页 |
| 2.4 生物素-链霉亲和素磁珠分离系统可得到ssDNA | 第63页 |
| 2.5 生物信息学软件是分析适配子的序列的重要工具 | 第63-64页 |
| 2.6 特异性或亲和力高的适配子是提取细胞膜分子标志物的前提 | 第64-65页 |
| 四. 结论与展望 | 第65-66页 |
| 1. 结论 | 第65页 |
| 2. 展望 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-71页 |
| 攻读硕士学位期间的研究成果 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 缩略词表 | 第73页 |
