中文摘要 | 第4-6页 |
英文摘要 | 第6-8页 |
英文缩略词表 | 第13-14页 |
0 引言 | 第14-16页 |
第一部分 小鼠大脑皮质星形胶质细胞原代培养方法的建立及鉴定 | 第16-24页 |
1 材料 | 第16-17页 |
1.1 实验动物 | 第16页 |
1.2 主要试剂 | 第16页 |
1.3 主要仪器 | 第16-17页 |
2 方法 | 第17-19页 |
2.1 主要溶液的配制 | 第17页 |
2.2 培养板及盖玻片包被处理 | 第17-18页 |
2.3 新生ICR小鼠大脑皮质星形胶质体外分离及原代培养 | 第18页 |
2.4 小鼠大脑皮质星形胶质细胞的形态学观察 | 第18页 |
2.5 小鼠大脑皮质星形胶质细胞的纯度鉴定—GFAP免疫细胞化学染色 | 第18-19页 |
3 结果 | 第19-21页 |
3.1 星形胶质细胞形态学观察 | 第19页 |
3.2 GFAP免疫细胞化学染色结果 | 第19-21页 |
4 讨论 | 第21-24页 |
4.1 星形胶质细胞取材时间选择 | 第21页 |
4.2 星形胶质细胞培养基选择与应用 | 第21-22页 |
4.3 星形胶质细胞接种后换液时间选择 | 第22页 |
4.4 提高星形胶质细胞纯度方法改进 | 第22-24页 |
第二部分 镉对体外培养小鼠大脑皮质星形细胞的毒性作用 | 第24-36页 |
1 材料 | 第24页 |
1.1 实验动物 | 第24页 |
1.2 主要试剂 | 第24页 |
1.3 主要仪器 | 第24页 |
2 方法 | 第24-26页 |
2.1 各实验组镉浓度 | 第24页 |
2.2 大脑皮质星形胶质细胞培养、分组及染毒 | 第24-25页 |
2.3 大脑皮质星形胶质细胞形态学观察 | 第25页 |
2.4 MTT法测定氯化镉对原代培养小鼠大脑皮质星形胶质细胞生长的抑制作用 | 第25页 |
2.5 Annexin V-FITC/PI流式细胞仪检测细胞凋亡率 | 第25-26页 |
2.6 数据分析 | 第26页 |
3 结果 | 第26-32页 |
3.1 镉对小鼠大脑皮质原代培养星形胶质细胞形态学影响 | 第26-29页 |
3.2 镉对小鼠大脑皮质原代培养星形胶质生长的抑制作用 | 第29-30页 |
3.3 镉对小鼠大脑皮质原代培养星形胶质细胞凋亡率的影响 | 第30-32页 |
4 讨论 | 第32-36页 |
4.1 镉对星形胶质细胞形态学影响 | 第32-33页 |
4.2 镉对星形胶质细胞生长的影响 | 第33-34页 |
4.3 镉对星形胶质细胞凋亡的影响 | 第34-36页 |
第三部分 镉对小鼠大脑皮质星形胶质细胞内JNK信号通路的影响 | 第36-52页 |
1 材料 | 第36-37页 |
1.1 实验动物 | 第36页 |
1.2 主要试剂 | 第36页 |
1.3 主要仪器 | 第36-37页 |
2 方法 | 第37-40页 |
2.1 溶液、试剂的配制 | 第37-38页 |
2.2 各实验组镉作用浓度 | 第38页 |
2.3 小鼠大脑皮质星形胶质细胞原代培养及染毒 | 第38页 |
2.4 JNK特异性抑制剂SP600125对小鼠大脑皮质星形胶质细胞形态的影响 | 第38页 |
2.5 镉染毒及JNK抑制剂作用后,细胞总蛋白提取及定量 | 第38-39页 |
2.5.1 细胞总蛋白提取 | 第38-39页 |
2.5.2 BCA蛋白定量法 | 第39页 |
2.6 Western blot检测JNK信号通路磷酸化水平及抑制剂作用后p-JNK的变化 | 第39-40页 |
2.6.1 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第39-40页 |
2.7 数据分析 | 第40页 |
3 结果 | 第40-49页 |
3.1 SP600125作用后星形胶质细胞形态变化 | 第40-42页 |
3.2 镉对星形胶质细胞JNK信号通路磷酸化水平的影响 | 第42-43页 |
3.3 JNK特异性抑制剂SP600125对p-JNK的影响 | 第43-49页 |
4 讨论 | 第49-52页 |
4.1 镉对星形胶质细胞内JNK信号通路的影响 | 第49-52页 |
结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-59页 |
综述 | 第59-71页 |
参考文献 | 第67-71页 |
作者简历 | 第71-72页 |
致谢 | 第72-73页 |
学位论文数据集 | 第73页 |