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JNK/MAPK信号通路在氯化镉致小鼠原代星形胶质细胞死亡机制的初步研究

中文摘要第4-6页
英文摘要第6-8页
英文缩略词表第13-14页
0 引言第14-16页
第一部分 小鼠大脑皮质星形胶质细胞原代培养方法的建立及鉴定第16-24页
    1 材料第16-17页
        1.1 实验动物第16页
        1.2 主要试剂第16页
        1.3 主要仪器第16-17页
    2 方法第17-19页
        2.1 主要溶液的配制第17页
        2.2 培养板及盖玻片包被处理第17-18页
        2.3 新生ICR小鼠大脑皮质星形胶质体外分离及原代培养第18页
        2.4 小鼠大脑皮质星形胶质细胞的形态学观察第18页
        2.5 小鼠大脑皮质星形胶质细胞的纯度鉴定—GFAP免疫细胞化学染色第18-19页
    3 结果第19-21页
        3.1 星形胶质细胞形态学观察第19页
        3.2 GFAP免疫细胞化学染色结果第19-21页
    4 讨论第21-24页
        4.1 星形胶质细胞取材时间选择第21页
        4.2 星形胶质细胞培养基选择与应用第21-22页
        4.3 星形胶质细胞接种后换液时间选择第22页
        4.4 提高星形胶质细胞纯度方法改进第22-24页
第二部分 镉对体外培养小鼠大脑皮质星形细胞的毒性作用第24-36页
    1 材料第24页
        1.1 实验动物第24页
        1.2 主要试剂第24页
        1.3 主要仪器第24页
    2 方法第24-26页
        2.1 各实验组镉浓度第24页
        2.2 大脑皮质星形胶质细胞培养、分组及染毒第24-25页
        2.3 大脑皮质星形胶质细胞形态学观察第25页
        2.4 MTT法测定氯化镉对原代培养小鼠大脑皮质星形胶质细胞生长的抑制作用第25页
        2.5 Annexin V-FITC/PI流式细胞仪检测细胞凋亡率第25-26页
        2.6 数据分析第26页
    3 结果第26-32页
        3.1 镉对小鼠大脑皮质原代培养星形胶质细胞形态学影响第26-29页
        3.2 镉对小鼠大脑皮质原代培养星形胶质生长的抑制作用第29-30页
        3.3 镉对小鼠大脑皮质原代培养星形胶质细胞凋亡率的影响第30-32页
    4 讨论第32-36页
        4.1 镉对星形胶质细胞形态学影响第32-33页
        4.2 镉对星形胶质细胞生长的影响第33-34页
        4.3 镉对星形胶质细胞凋亡的影响第34-36页
第三部分 镉对小鼠大脑皮质星形胶质细胞内JNK信号通路的影响第36-52页
    1 材料第36-37页
        1.1 实验动物第36页
        1.2 主要试剂第36页
        1.3 主要仪器第36-37页
    2 方法第37-40页
        2.1 溶液、试剂的配制第37-38页
        2.2 各实验组镉作用浓度第38页
        2.3 小鼠大脑皮质星形胶质细胞原代培养及染毒第38页
        2.4 JNK特异性抑制剂SP600125对小鼠大脑皮质星形胶质细胞形态的影响第38页
        2.5 镉染毒及JNK抑制剂作用后,细胞总蛋白提取及定量第38-39页
            2.5.1 细胞总蛋白提取第38-39页
            2.5.2 BCA蛋白定量法第39页
        2.6 Western blot检测JNK信号通路磷酸化水平及抑制剂作用后p-JNK的变化第39-40页
            2.6.1 SDS-PAGE凝胶电泳第39-40页
        2.7 数据分析第40页
    3 结果第40-49页
        3.1 SP600125作用后星形胶质细胞形态变化第40-42页
        3.2 镉对星形胶质细胞JNK信号通路磷酸化水平的影响第42-43页
        3.3 JNK特异性抑制剂SP600125对p-JNK的影响第43-49页
    4 讨论第49-52页
        4.1 镉对星形胶质细胞内JNK信号通路的影响第49-52页
结论第52-53页
参考文献第53-59页
综述第59-71页
    参考文献第67-71页
作者简历第71-72页
致谢第72-73页
学位论文数据集第73页

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