| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-16页 |
| 1 异育银鲫粘孢子虫病 | 第8-10页 |
| 1.1 洪湖碘泡虫病 | 第8-9页 |
| 1.2 武汉单极虫病 | 第9页 |
| 1.3 吴李碘泡虫病 | 第9页 |
| 1.4 丑陋圆形碘泡虫病 | 第9-10页 |
| 2 粘孢子虫检测技术 | 第10-14页 |
| 2.1 形态学检测 | 第10-11页 |
| 2.2 免疫学检测 | 第11-12页 |
| 2.3 分子生物学检测 | 第12-14页 |
| 3 分子检测靶基因 | 第14-15页 |
| 4 本研究的目的及意义 | 第15-16页 |
| 第二章 四种粘孢子虫单轮PCR检测方法的建立 | 第16-30页 |
| 1 实验材料 | 第16-18页 |
| 1.1 样品采集与保存 | 第16-17页 |
| 1.2 试剂与试剂盒 | 第17页 |
| 1.3 仪器与设备 | 第17-18页 |
| 2 实验方法 | 第18-23页 |
| 2.1 粘孢子虫DNA的提取、PCR扩增与克隆测序 | 第18-19页 |
| 2.2 靶基因选择及引物设计 | 第19-22页 |
| 2.3 单轮PCR方法的建立 | 第22-23页 |
| 3 实验结果与分析 | 第23-27页 |
| 3.1 单轮PCR扩增结果 | 第23-24页 |
| 3.2 单轮PCR特异性结果 | 第24-26页 |
| 3.3 单轮PCR灵敏性结果 | 第26-27页 |
| 4 讨论 | 第27-29页 |
| 5 小结 | 第29-30页 |
| 第三章 四种粘孢子虫多重PCR检测方法的建立 | 第30-40页 |
| 1 实验材料 | 第30-31页 |
| 1.1 样品采集与保存 | 第30页 |
| 1.2 试剂与试剂盒 | 第30页 |
| 1.3 仪器与设备 | 第30-31页 |
| 2 实验方法 | 第31-33页 |
| 2.1 DNA提取、PCR扩增与克隆测序 | 第31-32页 |
| 2.2 多重PCR方法的建立 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-37页 |
| 3.1 多重PCR扩增与优化结果 | 第33-35页 |
| 3.1.1 退火温度的优化 | 第33页 |
| 3.1.2 引物浓度优化 | 第33-34页 |
| 3.1.3 Mg~(2+)、dNTPs、TaqDNA聚合酶平衡浓度优化 | 第34-35页 |
| 3.1.4 多重PCR优化结果 | 第35页 |
| 3.2 多重PCR特异性结果 | 第35-36页 |
| 3.3 多重PCR灵敏性结果 | 第36-37页 |
| 4 讨论 | 第37-39页 |
| 5 小结 | 第39-40页 |
| 第四章 两种PCR方法的应用与比较 | 第40-47页 |
| 1 实验材料 | 第40-41页 |
| 1.1 样品采集 | 第40页 |
| 1.2 试剂与试剂盒 | 第40页 |
| 1.3 仪器与设备 | 第40-41页 |
| 2 实验方法 | 第41-42页 |
| 2.1 显微镜检测 | 第41页 |
| 2.2 样品总DNA提取 | 第41页 |
| 2.3 单轮PCR方法应用 | 第41页 |
| 2.4 多重PCR方法应用 | 第41-42页 |
| 3 检测结果与分析 | 第42-45页 |
| 3.1 显微镜检测结果 | 第42-43页 |
| 3.2 单轮PCR检测结果 | 第43-44页 |
| 3.3 多重PCR检测结果 | 第44-45页 |
| 3.4 检测结果的比较 | 第45页 |
| 4 讨论 | 第45-46页 |
| 5 小结 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-54页 |
| 附录 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55页 |