摘要 | 第5-9页 |
abstract | 第9-12页 |
前言 | 第17-39页 |
1. 神经退行性疾病的分类及特点 | 第17-19页 |
1.1 阿兹海默症的简介及可能的发病机制 | 第17-18页 |
1.2 肌肉萎缩侧索硬化症的简介及可能的发病机制 | 第18页 |
1.3 帕金森症的简介及可能的发病机制 | 第18页 |
1.4 亨廷顿症的简介及可能发病机制 | 第18-19页 |
2. 神经退行性疾病研究现状 | 第19-26页 |
2.1 神经退行性疾病之间的联系 | 第19-22页 |
2.1.1 遗传学上的相关性 | 第19-20页 |
2.1.2 蛋白水平的相关性 | 第20-21页 |
2.1.2.1 功能蛋白的积聚 | 第20页 |
2.1.2.2 蛋白降解的途径 | 第20-21页 |
2.1.3 病理表现的相关性 | 第21-22页 |
2.1.3.1 线粒体功能障碍 | 第21页 |
2.1.3.2 轴突运输障碍 | 第21页 |
2.1.3.3 细胞的程序化死亡 | 第21-22页 |
2.2 神经退行性疾病的研究方法 | 第22-25页 |
2.2.1 常见的细胞模型 | 第22-23页 |
2.2.2 常见的动物模型 | 第23-24页 |
2.2.3 致病假说 | 第24-25页 |
2.3 神经退行性疾病的治疗药物及潜在治疗方案 | 第25-26页 |
3. 壳寡糖简介 | 第26-27页 |
4. 虾青素简介 | 第27-29页 |
5. 糖胺聚糖与神经系统发育的关系 | 第29-30页 |
6. 课题研究方法、目的及意义 | 第30-31页 |
参考文献 | 第31-39页 |
第一章 PC12细胞分化培养及细胞损伤模型的建立 | 第39-61页 |
1. 实验材料和仪器 | 第40页 |
1.1 实验材料 | 第40页 |
1.2 实验仪器 | 第40页 |
2. 实验步骤 | 第40-43页 |
2.1 PC-12细胞的体外培养 | 第40-41页 |
2.2 NGF诱导细胞分化 | 第41页 |
2.3 NGF诱导浓度筛选 | 第41页 |
2.4 细胞周期测定 | 第41-42页 |
2.5 Western blot检测 | 第42页 |
2.6 免疫荧光共聚焦检测 | 第42页 |
2.7 体外神经细胞损伤模型的建立 | 第42-43页 |
2.8 数据处理 | 第43页 |
3. 实验结果与讨论 | 第43-57页 |
3.1 NGF分化诱导浓度的选择 | 第43-48页 |
3.1.1 不同浓度NGF的分化诱导率 | 第43-46页 |
3.1.2 不同浓度NGF对PC12神经突起的影响 | 第46-47页 |
3.1.3 不同浓度NGF对PC12细胞活力的影响 | 第47-48页 |
3.2 细胞周期 | 第48-49页 |
3.3 周期相关蛋白的表达变化 | 第49-51页 |
3.4 PC12交感神经元活性检测 | 第51-53页 |
3.5 体外细胞模型的建立 | 第53-56页 |
3.6 细胞模型稳定性 | 第56-57页 |
4. 本章小结 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-61页 |
第二章 壳寡糖及其修饰物对神经细胞的保护作用 | 第61-75页 |
1 实验材料和仪器 | 第61页 |
1.1 实验材料 | 第61页 |
1.2 实验仪器 | 第61页 |
2 实验方法 | 第61-64页 |
2.1 PC12细胞体外培养 | 第61-62页 |
2.2 样品细胞毒性测定 | 第62页 |
2.3 样品对谷氨酸诱导细胞损伤的保护 | 第62页 |
2.4 LDH、ROS、MMP指标测定 | 第62-63页 |
2.5 Caspase 3,9酶活力检测 | 第63页 |
2.6 Western blot检测 | 第63-64页 |
2.7 免疫荧光共聚焦检测 | 第64页 |
2.8 数据处理 | 第64页 |
3 实验结果与讨论 | 第64-73页 |
3.1 样品细胞毒性测定 | 第65-66页 |
3.2 样品对谷氨酸诱导细胞损伤的保护作用 | 第66-68页 |
3.3 LDH、ROS、MMP测定 | 第68-70页 |
3.4 全乙酰化壳寡糖对于神经细胞凋亡的影响 | 第70-73页 |
4 本章小结 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-75页 |
第三章 虾青素的神经保护作用研究 | 第75-93页 |
1. 实验材料和仪器 | 第75-76页 |
1.1 实验材料 | 第75页 |
1.2 实验仪器 | 第75-76页 |
2. 实验方法 | 第76-79页 |
2.1 PC12细胞的体外培养 | 第76页 |
2.2 虾青素细胞毒性测试 | 第76页 |
2.3 虾青素对谷氨酸诱导PC12凋亡的保护作用 | 第76页 |
2.4 LDH和ROS的测定 | 第76-77页 |
2.5 SOD,GR,GPX的测定 | 第77页 |
2.6 细胞凋亡检测 | 第77页 |
2.7 MMP测定 | 第77-78页 |
2.8 Western blot检测 | 第78页 |
2.9 Ca(2+)荧光共聚焦测试和NF-κB免疫荧光测试 | 第78-79页 |
2.10 数据处理 | 第79页 |
3. 实验结果与讨论 | 第79-89页 |
3.1 虾青素细胞毒性测定 | 第79-80页 |
3.2 虾青素对于谷氨酸神经细胞损伤的抑制作用 | 第80-81页 |
3.3 虾青素对谷氨酸损伤PC12细胞LDH和ROS释放的影响 | 第81页 |
3.4 虾青素对谷氨酸损伤PC12细胞SOD,GR,GPx酶活性的影响 | 第81-82页 |
3.5 虾青素对线粒体膜电位的影响 | 第82-83页 |
3.6 虾青素对神经细胞凋亡的影响 | 第83-85页 |
3.7 虾青素对Ca~(2+)内流的影响 | 第85-86页 |
3.8 细胞凋亡相关蛋白表达的检测 | 第86-88页 |
3.9 虾青素对NF-κB和MAPK信号通路的影响 | 第88-89页 |
4. 本章小结 | 第89-91页 |
参考文献 | 第91-93页 |
第四章 海洋来源生物碱结构类似物神经保护活性筛选 | 第93-125页 |
1. 实验材料和仪器 | 第93-94页 |
1.1 实验材料 | 第93页 |
1.2 实验仪器 | 第93-94页 |
2. 实验方法 | 第94页 |
2.1 PC12细胞的体外培养 | 第94页 |
2.2 海洋生物碱类似物细胞毒性测试 | 第94页 |
2.3 海洋生物碱类似物对谷氨酸诱导PC12凋亡的保护作用 | 第94页 |
3. 实验结果及讨论 | 第94-123页 |
3.1 Neolamellarin A类似物的神经细胞毒和保护活性 | 第95-109页 |
3.2 Naamidine A类似物的神经细胞毒和保护活性 | 第109-123页 |
4. 本章小结 | 第123-124页 |
参考文献 | 第124-125页 |
第五章 糖胺聚糖在PC12分化过程中的含量和组成变化 | 第125-142页 |
1. 实验材料和仪器 | 第126页 |
1.1 实验材料 | 第126页 |
1.2 实验仪器 | 第126页 |
2. 实验步骤 | 第126-129页 |
2.1 PC12分化培养 | 第126-127页 |
2.2 FGF因子结合实验 | 第127页 |
2.3 分化PC12细胞糖胺聚糖的提取 | 第127-128页 |
2.4 硝酸纤维素薄膜电泳 | 第128页 |
2.5 HPLC、HPLC-MS分析提取的糖胺聚糖单糖组成和含量 | 第128-129页 |
2.5.1 样品的水解 | 第128页 |
2.5.2 PMP衍生化反应 | 第128-129页 |
2.5.3 色谱条件 | 第129页 |
2.5.4 质谱条件 | 第129页 |
3. 实验结果与讨论 | 第129-139页 |
3.1 FGF因子结合实验 | 第129-131页 |
3.2 糖胺聚糖电泳实验 | 第131-132页 |
3.3 糖胺聚糖的液相色谱分析 | 第132-139页 |
4. 本章小结 | 第139-141页 |
参考文献 | 第141-142页 |
结论 | 第142-143页 |
创新点 | 第143-144页 |
致谢 | 第144-145页 |
个人简历 | 第145页 |
发表和参与发表的文章 | 第145页 |