| 第一部分 miR-221对正常乳腺和乳腺肿瘤干细胞调控的研究 | 第8-82页 |
| 中文摘要 | 第10-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-37页 |
| 1.1 乳腺干细胞 | 第12-15页 |
| 1.1.1 乳腺干细胞的研究方法 | 第14-15页 |
| 1.2 肿瘤干细胞 | 第15-37页 |
| 1.2.1 乳腺癌的治疗现状 | 第15-17页 |
| 1.2.2 乳腺肿瘤干细胞 | 第17-19页 |
| 1.2.3 乳腺肿瘤干细胞的研究方法 | 第19-20页 |
| 1.2.4 EMT与肿瘤干细胞 | 第20-23页 |
| 1.2.5 信号通路与肿瘤干细胞 | 第23-28页 |
| 1.2.6 microRNA与肿瘤干细胞 | 第28-32页 |
| 1.2.7 lncRNA与肿瘤干细胞 | 第32-33页 |
| 1.2.8 表观调控蛋白与肿瘤干细胞 | 第33-37页 |
| 第二章 材料和方法 | 第37-49页 |
| 2.1 实验相关药品和试剂 | 第37-38页 |
| 2.2 载体构建 | 第38-40页 |
| 2.2.1 miR-221过表达载体构建 | 第38页 |
| 2.2.2 miR-221 shRNA载体构建 | 第38-39页 |
| 2.2.3 ATXN1 shRNA载体构建 | 第39-40页 |
| 2.2.4 荧光素酶基因报告载体构建 | 第40页 |
| 2.3 病毒包装和感染 | 第40页 |
| 2.4 细胞培养 | 第40-41页 |
| 2.5 实时定量PCR(Q-PCR) | 第41-43页 |
| 2.5.1 RNA提取 | 第41-42页 |
| 2.5.2 RNA反转录 | 第42-43页 |
| 2.5.3 Q-PCR | 第43页 |
| 2.6 免疫组化和组织切片免疫荧光 | 第43-45页 |
| 2.7 正常乳腺细胞微球培养和消化 | 第45-46页 |
| 2.8 ALDEFLUOR分析和分选 | 第46页 |
| 2.9 细胞表面标记物的流式分析和分选 | 第46-47页 |
| 2.10 基因芯片 | 第47-48页 |
| 2.11 荧光素酶报告技术 | 第48页 |
| 2.12 小鼠成瘤实验 | 第48-49页 |
| 第三章 结果分析与讨论 | 第49-68页 |
| 3.1 miR-221在乳腺干细胞中高表达 | 第49-51页 |
| 3.2 miR-221调节乳腺干细胞的分化 | 第51-55页 |
| 3.3 miR-221的表达量与乳腺癌的恶性程度呈正相关 | 第55-57页 |
| 3.4 miR-221调控乳腺肿瘤干细胞 | 第57-60页 |
| 3.5 miR-221调控EMT过程 | 第60-63页 |
| 3.6 miR-221调控乳腺干细胞和乳腺干细胞通过抑制ATXN1 | 第63-68页 |
| 参考文献 | 第68-82页 |
| 第二部分 PIM2调控人胚胎干细胞的多能性 | 第82-110页 |
| 中文摘要 | 第84-85页 |
| Abstract | 第85-86页 |
| 第一章 研究背景 | 第86-91页 |
| 1.1 胚胎干细胞 | 第86页 |
| 1.2 胚胎干细胞的调控 | 第86-91页 |
| 第二章 材料和方法 | 第91-99页 |
| 2.1 实验相关药品和试剂 | 第91页 |
| 2.2 载体构建 | 第91-94页 |
| 2.3 esiRNA制备 | 第94-96页 |
| 2.4 病毒包装和感染 | 第96页 |
| 2.5 细胞培养 | 第96页 |
| 2.6 实时定量PCR(Q-PCR) | 第96-98页 |
| 2.6.1 RNA提取 | 第96-97页 |
| 2.6.2 RNA反转录 | 第97-98页 |
| 2.7 拟胚体(embryoid body,EB)实验 | 第98页 |
| 2.8 畸胎瘤实验 | 第98-99页 |
| 第三章 实验结果 | 第99-106页 |
| 3.1 基因筛选 | 第99页 |
| 3.2 shRNA或esiRNA效果 | 第99-101页 |
| 3.3 PIM2在胚胎干细胞和分化细胞中的表达量 | 第101-102页 |
| 3.4 PIM2对胚胎干细胞自我更新的影响 | 第102-103页 |
| 3.5 PIM2调控胚胎干细胞的多能性 | 第103-104页 |
| 3.6 PIM2对诱导性多能干细胞的影响 | 第104-106页 |
| 参考文献 | 第106-110页 |
| 附录 | 第110-112页 |
| 致谢 | 第112-113页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的研究成果 | 第113页 |
