| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 主要符号对照表 | 第10-11页 |
| 第一章 引言 | 第11-25页 |
| 1.1 肝癌的概述 | 第11-13页 |
| 1.1.1 肝癌的治疗现状 | 第11-12页 |
| 1.1.2 肝癌的基因治疗 | 第12-13页 |
| 1.2 rAAV的研究现状 | 第13-19页 |
| 1.2.1 rAAV载体的生物学描述 | 第13-14页 |
| 1.2.2 自身互补型rAAV载体 | 第14-15页 |
| 1.2.3 AAV的血清型与靶向性 | 第15-17页 |
| 1.2.4 rAAV的临床研究 | 第17-19页 |
| 1.3 Kallistatin的生物学描述 | 第19-22页 |
| 1.3.1 Kallistatin的结构 | 第19-20页 |
| 1.3.2 Kallistatin功能 | 第20-22页 |
| 1.4 课题意义以及研究思路 | 第22-25页 |
| 1.4.1 课题来源与意义 | 第22-23页 |
| 1.4.2 研究思路与技术路线 | 第23-25页 |
| 第二章 rAAV基因药物体外转导效率筛选 | 第25-39页 |
| 2.1 包装质粒pdsAAV-CB-Gluc表达载体的克隆 | 第25-29页 |
| 2.1.1 材料与试剂 | 第26页 |
| 2.1.2 实验方法 | 第26-29页 |
| 2.1.3 结果与讨论 | 第29页 |
| 2.2 rAAV病毒转导效率的筛选 | 第29-39页 |
| 2.2.1 材料与试剂 | 第29-31页 |
| 2.2.2 实验方法 | 第31-33页 |
| 2.2.3 结果 | 第33-37页 |
| 2.2.4 讨论 | 第37-39页 |
| 第三章 scrAAV-Kallistatin体外药效学研究 | 第39-63页 |
| 3.1 scrAAV介导的KAL体外选择性杀伤肝癌细胞作用的研究 | 第39-49页 |
| 3.1.1 材料与试剂 | 第39-40页 |
| 3.1.2 实验方法 | 第40-42页 |
| 3.1.3 结果 | 第42-48页 |
| 3.1.4 讨论 | 第48-49页 |
| 3.2 scrAAV介导的Kallistatin体外抗氧化应激的作用 | 第49-63页 |
| 3.2.1 材料与试剂 | 第50-51页 |
| 3.2.2 实验方法 | 第51-54页 |
| 3.2.3 结果 | 第54-61页 |
| 3.2.4 讨论 | 第61-63页 |
| 第四章 scrAAV-Kallistatin体内药效学的研究 | 第63-81页 |
| 4.1 材料与试剂 | 第64-65页 |
| 4.1.1 实验试剂、材料与仪器 | 第64页 |
| 4.1.2 主要试剂的配制 | 第64-65页 |
| 4.2 实验方法 | 第65-70页 |
| 4.2.1 基因药物在不同免疫背景小鼠体内长效表达 | 第65-66页 |
| 4.2.2 不同基因药物在Balb/c小鼠体内代谢分析 | 第66页 |
| 4.2.3 血清及组织样品的制备保存 | 第66页 |
| 4.2.4 组织匀浆制备方法 | 第66-67页 |
| 4.2.5 总RNA提取与检测 | 第67页 |
| 4.2.6 反转录合成cDNA | 第67页 |
| 4.2.7 Real-time PCR | 第67-68页 |
| 4.2.8 皮下移植瘤动物模型的建立 | 第68-69页 |
| 4.2.9 基因药物对肿瘤的生长影响 | 第69页 |
| 4.2.10 石蜡包埋步骤 | 第69-70页 |
| 4.2.11 HE、免疫组化染色步骤 | 第70页 |
| 4.3 结果与分析 | 第70-78页 |
| 4.3.1 scrAAV-KAL基因药物在不同免疫背景小鼠体内长效表达 | 第70-72页 |
| 4.3.2 不同基因药物在Balb/c小鼠体内代谢分析 | 第72-74页 |
| 4.3.3 基因药物对肿瘤的治疗作用 | 第74-75页 |
| 4.3.4 裸鼠主要内脏病理切片 | 第75-76页 |
| 4.3.5 肿瘤的免疫组织化学染色 | 第76-78页 |
| 4.4 讨论 | 第78-81页 |
| 第五章 结论 | 第81-85页 |
| 5.1 研究总结 | 第81-83页 |
| 5.2 不足之处 | 第83页 |
| 5.3 创新点 | 第83页 |
| 5.4 需进一步开展工作 | 第83-85页 |
| 参考文献 | 第85-93页 |
| 致谢 | 第93-95页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文及研究成果 | 第95页 |
