山东部分地区鸭胚中Ⅰ群禽腺病毒的流行病学调查
| 中文摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1. 前言 | 第11-21页 |
| 1.1 禽腺病毒概述 | 第11页 |
| 1.2 形态学及理化特性 | 第11-14页 |
| 1.3 流行病学及致病性 | 第14-15页 |
| 1.4 禽腺病毒检测及诊断技术 | 第15-18页 |
| 1.4.1 病原的分离鉴定 | 第15-16页 |
| 1.4.2 包涵体检查及电子显微镜观察 | 第16页 |
| 1.4.3 血清学诊断 | 第16页 |
| 1.4.3.1 中和试验 | 第16页 |
| 1.4.3.2 琼脂扩散试验 | 第16页 |
| 1.4.3.3 酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第16页 |
| 1.4.4 分子生物学技术 | 第16-18页 |
| 1.4.4.1 聚合酶链式反应 | 第17页 |
| 1.4.4.2 实时荧光定量PCR | 第17页 |
| 1.4.4.3 环介导等温核酸扩增技术 | 第17-18页 |
| 1.4.4.4 核酸探针 | 第18页 |
| 1.5 防控策略 | 第18-20页 |
| 1.5.1 禽腺病毒油乳剂灭活疫苗 | 第19页 |
| 1.5.2 禽腺病毒DNA疫苗的研制 | 第19-20页 |
| 1.6 本研究的目的与意义 | 第20-21页 |
| 2. 材料和方法 | 第21-26页 |
| 2.1 试验材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 试验动物、鸭胚及细胞株 | 第21页 |
| 2.1.2 仪器和设备 | 第21页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第21页 |
| 2.1.4 试验相关溶液配制 | 第21-22页 |
| 2.2 试验方法 | 第22-26页 |
| 2.2.1 病毒分离 | 第22页 |
| 2.2.2 样品DNA的提取 | 第22-23页 |
| 2.2.3 样品的PCR鉴定 | 第23页 |
| 2.2.4 hexon基因的扩增及测序分析 | 第23页 |
| 2.2.5 病毒DNA提取 | 第23页 |
| 2.2.6 hexon基因的PCR扩增 | 第23-24页 |
| 2.2.6.1 引物的设计与合成 | 第23-24页 |
| 2.2.6.2 PCR扩增 | 第24页 |
| 2.2.7 目的片段的凝胶回收 | 第24页 |
| 2.2.8 目的片段与载体连接 | 第24页 |
| 2.2.9 感受态细胞制备 | 第24-25页 |
| 2.2.10 转化 | 第25页 |
| 2.2.11 阳性菌落PCR鉴定 | 第25-26页 |
| 3. 结果与分析 | 第26-29页 |
| 3.1 样品收集 | 第26页 |
| 3.2 鸭胚胚体变化 | 第26页 |
| 3.3 病毒分离结果 | 第26-27页 |
| 3.4 遗传进化分析 | 第27-28页 |
| 3.5 核苷酸序列分析 | 第28-29页 |
| 4. 讨论 | 第29-33页 |
| 参考文献 | 第33-40页 |
| 致谢 | 第40页 |
