中文摘要 | 第3-5页 |
英文摘要 | 第5-7页 |
缩略词表 | 第11-12页 |
1 绪论 | 第12-19页 |
1.1 问题提出与研究意义 | 第12页 |
1.2 国内外研究现状 | 第12-18页 |
1.2.1 紫外线(UVA)对人皮肤的影响 | 第12-13页 |
1.2.2 UVA对成纤维细胞作用 | 第13-15页 |
1.2.3 DNA甲基化 | 第15-17页 |
1.2.4 DNA甲基化和DNMTs在UVA诱导皮肤损伤中的作用。 | 第17页 |
1.2.5 5-az在UVA辐射诱导皮肤损伤的作用 | 第17-18页 |
1.3 本文研究的目的和研究内容 | 第18页 |
1.3.1 研究目的 | 第18页 |
1.3.2 主要研究内容 | 第18页 |
1.4 本文的创新点 | 第18-19页 |
2 UVA诱导NIH3T3细胞DNMTs的表达 | 第19-40页 |
2.1 引言 | 第19页 |
2.2 实验材料 | 第19-23页 |
2.2.1 实验细胞 | 第19-20页 |
2.2.2 主要仪器设备和耗材 | 第20页 |
2.2.3 实验试剂 | 第20-21页 |
2.2.4 试剂的配制 | 第21-23页 |
2.3 实验方法 | 第23-33页 |
2.3.1 NIH3T3细胞培养 | 第23-24页 |
2.3.2 紫外线UVA处理细胞 | 第24-25页 |
2.3.4 MTS法检测细胞的活力 | 第25页 |
2.3.5 蛋白印迹(Western blotting)检测DNMTs蛋白水平 | 第25-28页 |
2.3.6 实时定量PCR检测DNMTS的表达 | 第28-33页 |
2.3.7 运用统计学分析结果 | 第33页 |
2.4 实验结果 | 第33-38页 |
2.4.1 UVA不同剂量辐射对细胞形态方面的影响 | 第33-34页 |
2.4.2 慢性损伤中UVA辐射对细胞活力的影响 | 第34页 |
2.4.3 UVA辐射对细胞慢性损伤中DNMTs表达水平的影响 | 第34-38页 |
2.5 讨论 | 第38-40页 |
3 5-az联合UVA辐射处理NIH3T3细胞 | 第40-49页 |
3.1 引言 | 第40页 |
3.2 实验材料 | 第40-42页 |
3.2.1 主要仪器设备 | 第40-41页 |
3.2.2 实验试剂及药品 | 第41-42页 |
3.3 实验方法 | 第42-44页 |
3.3.1 NIH3T3细胞培养 | 第42页 |
3.3.2 5-az对NIH3T3进行处理 | 第42页 |
3.3.3 5-az联合UVA处理NIH3T3细胞 | 第42-43页 |
3.3.4 蛋白印迹法(Western blotting)检测细胞内DNMTs、CCND等水平 | 第43页 |
3.3.5 实时定量PCR检测细胞内DNMTs,CCND的表达 | 第43-44页 |
3.3.6 运用统计学分析结果 | 第44页 |
3.4 实验结果 | 第44-47页 |
3.4.1 5-az在NIH3T3细胞中抑制DNMTs的表达水平 | 第44-45页 |
3.4.2 5-az在处理联合UVA辐射对DNMTs的影响 | 第45-46页 |
3.4.3 5-az联合UVA辐射处理细胞后CCND表达的影响 | 第46-47页 |
3.5 讨论 | 第47-49页 |
4 NIH3T3细胞对UVA辐射的适应性反应 | 第49-57页 |
4.1 引言 | 第49页 |
4.2 实验中用的材料 | 第49-51页 |
4.2.1 实验仪器和设备 | 第49-50页 |
4.2.2 实验中试剂和药品 | 第50-51页 |
4.2.3 相关实验试剂的配制 | 第51页 |
4.3 相关实验方法及步骤 | 第51-53页 |
4.3.1 NIH3T3细胞的培养 | 第51页 |
4.3.3 NIH3T3细胞未辐射组及UVA辐射组 | 第51页 |
4.3.4 用MTS法检测NIH3T3细胞的活力 | 第51页 |
4.3.5 实时定量PCR法检测NIH3T3细胞中HO-1,DNMT1,DNMT3a mRNA水平的表达 | 第51-53页 |
4.3.6 蛋白印迹法(Western blotting)检测细胞内DNMTs、CCND等水平 | 第53页 |
4.3.7 运用统计学分析结果 | 第53页 |
4.4 实验结果 | 第53-56页 |
4.4.1 低剂量预刺激对细胞的DNMTs水平的影响 | 第53-55页 |
4.4.2 低剂量的保护作用使HO-1 的表达升高 | 第55-56页 |
4.5 讨论 | 第56-57页 |
5 结论与展望 | 第57-58页 |
5.1 本研究主要结论 | 第57页 |
5.2 后期研究展望 | 第57-58页 |
致谢 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-65页 |
附录 | 第65页 |
A. 作者在硕士期间发表的论文目录 | 第65页 |
B. 作者在硕士期间参加的学术会议 | 第65页 |