缩略语表 | 第5-7页 |
中文摘要 | 第7-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
前言 | 第13-15页 |
文献回顾 | 第15-26页 |
实验一 QKI表达干预后对小鼠高脂饮食诱导的骨质疏松的保护作用 | 第26-35页 |
1 材料 | 第27页 |
1.1 动物 | 第27页 |
1.2 试剂 | 第27页 |
1.3 仪器设备 | 第27页 |
2 方法 | 第27-30页 |
2.1 实验分组及样本的收集与处理 | 第27-28页 |
2.2 小鼠基因型鉴定 | 第28页 |
2.3 Micro-CT分析 | 第28页 |
2.4 骨形态计量学分析 | 第28-30页 |
2.5 统计学分析 | 第30页 |
3 结果 | 第30-33页 |
3.1 小鼠全身半敲除qki基因(qki+/-)对HFD诱导的骨质疏松具有保护作用 | 第30-32页 |
3.2 降低QKI的表达水平后,小鼠的骨形成率(BFR)与骨矿化率(MAR)显著增加 | 第32页 |
3.3 降低QKI的表达水平后,骨质疏松小鼠骨髓中的成骨细胞数量显著增加而脂肪细胞数量明显减少 | 第32-33页 |
4 讨论 | 第33-35页 |
实验二 QKI表达干预后对BMSC分化命运的影响 | 第35-51页 |
1 材料 | 第35-37页 |
1.1 细胞 | 第35页 |
1.2 试剂 | 第35-37页 |
1.3 仪器设备 | 第37页 |
2 方法 | 第37-44页 |
2.1 细胞培养 | 第37-38页 |
2.2 慢病毒包装 | 第38页 |
2.3 稳转细胞系的建立 | 第38-39页 |
2.4 分化液的配置 | 第39页 |
2.5 成骨细胞分化 | 第39页 |
2.6 成脂细胞分化 | 第39-40页 |
2.7 ALP染色 | 第40页 |
2.8 茜素红染色 | 第40-41页 |
2.9 油红O染色 | 第41页 |
2.10 RNA提取 | 第41页 |
2.11 Nanodrop测定RNA浓度 | 第41-42页 |
2.12 反转录 | 第42页 |
2.13 qPCR扩增 | 第42-43页 |
2.14 蛋白样品的制备 | 第43页 |
2.15 BCA法定量 | 第43页 |
2.16 Western Blot | 第43-44页 |
2.17 统计学分析 | 第44页 |
3 结果 | 第44-49页 |
3.1 QKI在成骨细胞分化过程中的表达变化 | 第44-46页 |
3.2 降低QKI的表达后促进成骨细胞分化 | 第46-47页 |
3.3 QKI促进成脂细胞分化 | 第47-48页 |
3.4 降低QKI的表达后促进成骨相关基因的表达 | 第48-49页 |
4 讨论 | 第49-51页 |
实验三 经典的WNT/Β-CATENIN信号通路在QKI调控BMSC分化命运中的作用 | 第51-58页 |
1 材料 | 第51-53页 |
1.1 细胞 | 第51页 |
1.2 试剂 | 第51-52页 |
1.3 仪器设备 | 第52-53页 |
2 方法 | 第53-54页 |
2.1 细胞免疫荧光 | 第53页 |
2.2 qPCR扩增 | 第53-54页 |
2.3 Western Blot | 第54页 |
2.4 统计学分析 | 第54页 |
3 结果 | 第54-56页 |
3.1 降低QKI的表达水平促进了 β-catenin的核转位 | 第54-55页 |
3.2 QKI表达水平的变化对经典的Wnt/β-catenin的影响 | 第55-56页 |
4 讨论 | 第56-58页 |
小结 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-62页 |
附录 | 第62-63页 |
个人简历和研究成果 | 第63-64页 |
致谢 | 第64页 |