| 摘要 | 第3-4页 |
| Summary | 第4页 |
| I 前言 | 第8-10页 |
| II 文献综述 | 第10-25页 |
| 2.1 植物病毒及植物病毒检测方法 | 第10-18页 |
| 2.1.1 植物病毒简介 | 第10-12页 |
| 2.1.2 植物病毒检测方法 | 第12-18页 |
| 2.1.2.1 生物学方法 | 第12-13页 |
| 2.1.2.2 电子显微镜方法 | 第13-14页 |
| 2.1.2.3 免疫学方法 | 第14-15页 |
| 2.1.2.4 分子生物学方法 | 第15-18页 |
| 2.1.2.4.1 PCR 和RT-PCR | 第15-17页 |
| 2.1.2.4.2 核酸分子杂交 | 第17页 |
| 2.1.2.4.3 双链RNA 电泳(double-stranded RNA，dsRNA) | 第17-18页 |
| 2.1.2.4.4 基因芯片 | 第18页 |
| 2.2 马铃薯病毒病研究进展及两种主要病毒病简介 | 第18-22页 |
| 2.3 马铃薯病毒病的防治 | 第22页 |
| 2.4 马铃薯病毒的RT-PCR 检测研究进展 | 第22-23页 |
| 2.5 研究的目的、意义及技术路线 | 第23-25页 |
| III 实验部分 | 第25-30页 |
| 3.1 RT-PCR 检测PVA 及PVS | 第25-28页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第25页 |
| 3.1.2 实验方法 | 第25-28页 |
| 3.1.2.1 总RNA 的提取 | 第25-27页 |
| 3.1.2.1.1 TRIZOL 试剂法 | 第25-26页 |
| 3.1.1.2.2 LiCl 法提取植物总RNA | 第26-27页 |
| 3.1.2.2.3 总RNA 完整性、含量及纯度检测 | 第27页 |
| 3.1.2.3 PVS 及PVA 外壳蛋白基因特异引物的合成 | 第27页 |
| 3.1.2.3 cDNA 的合成 | 第27页 |
| 3.1.2.4 PCR 扩增 | 第27-28页 |
| 3.1.2.4.1 PVA 和PVS 的PCR 扩增体系 | 第27-28页 |
| 3.1.2.4.2 PCR 扩增产物的凝胶电泳观察 | 第28页 |
| 3.2 ELISA 检测PVA 和PVS | 第28-30页 |
| 3.2.1 ELISA 检测PVA | 第28-30页 |
| 3.2.1.1 实验材料 | 第28页 |
| 3.2.1.2 实验方法 | 第28-30页 |
| 3.2.1.2.1 缓冲液配制 | 第28-30页 |
| IV 结果与分析 | 第30-36页 |
| 4.1 总RNA 的提取 | 第30-32页 |
| 4.1.1 总RNA 完整性 | 第30-31页 |
| 4.1.2 总RNA 纯度 | 第31-32页 |
| 4.2 PVA 和PVS 的PCR 扩增体系的建立 | 第32-34页 |
| 4.2.1 PVA 的PCR 扩增体系的建立 | 第32-33页 |
| 4.2.2 PVS 的PCR 扩增体系的建立 | 第33-34页 |
| 4.4 双抗体夹心酶联免疫吸附测定法(DAS-ELISA)检测PVA 和PVS | 第34-36页 |
| 4.4.1 DAS-ELISA 检测 PVA | 第34-35页 |
| 4.4.2 DAS-ELISA 检测PVS | 第35-36页 |
| V 讨论 | 第36-40页 |
| 5.1 关于RNA 的提取 | 第36-37页 |
| 5.2 关于影响RT-PCR 扩增的因素与RT-PCR 体系的建立 | 第37-38页 |
| 5.3 RT-PCR 与ELISA 比较 | 第38-39页 |
| 5.4 进一步研究的设想 | 第39-40页 |
| 致谢 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-46页 |
| 作者简介 | 第46-47页 |
| 导师简介 | 第47-48页 |
