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间隙连接基因CX43mRNA及其蛋白在大鼠成骨细胞系中的表达以及信号转导机制的初步研究

中文摘要第6-8页
英文摘要第8页
英文缩略词表第11-13页
前言第13-15页
文献回顾第15-29页
    一、 间隙连接的形态与结构第15页
    二、 间隙连接多基因家族第15-17页
    三、 间隙连接的功能第17-19页
    四、 间隙连接功能的调节第19-23页
    五、 间隙连接的研究方法第23-24页
    六、 间隙连接在骨改建中的研究第24-29页
实验部分第29-81页
    第一部分 间隙连接蛋白cx43及其mRNA在大鼠成骨样细胞的表达第29-39页
        前言第29-39页
            1 材料第30-31页
                1.1 细胞系第30页
                1.2 主要仪器第30页
                1.3 主要试剂第30-31页
            2 方法第31-34页
                2.1 细胞培养和爬片第31页
                2.2 免疫组织化学法第31-32页
                    2.2.1 SP免疫组织化学法第31-32页
                    2.2.2 免疫组织化学结果判定第32页
                2.3 激光扫描共聚伙显微镜分析第32页
                    2.3.1 间接免疫荧光染色第32页
                    2.3.2 激光扫描共聚焦显微镜定位、定量分析第32页
                2.4 培养细胞mRNA原位杂交第32-34页
                    2.4.1 探针制备、标记第32-33页
                    2.4.2 mRNA原位杂交第33页
                    2.4.3 原位杂交结果判定第33-34页
            3 结果第34-37页
                3.1 免疫组织化学结果第34-35页
                3.2 激光扫描共聚焦显微镜分析结果第35-36页
                3.3 细胞原位杂交结果第36-37页
            4 讨论第37-39页
    第二部分 bFGF对间隙连接蛋白cx43表达的影响第39-56页
        前言第39-56页
            1 材料第40-41页
                1.1 细胞系第40页
                1.2 主要仪器第40页
                1.3 主要试剂第40-41页
            2 方法第41-42页
                2.1 细胞培养和爬片第41页
                2.2 免疫组织化学法第41-42页
                    2.2.1 SP免疫组织化学法第41页
                    2.2.2 免疫组织化学结果判定第41-42页
                2.3 激光扫描共聚焦显微镜分析第42页
                    2.3.1 间接免疫荧光染色第42页
                    2.3.2 激光扫描共聚焦显微镜定位、定量分析第42页
            3 结果第42-52页
                3.1 免疫组织化学结果第42-45页
                3.2 激光扫描共聚焦显微镜分析结果第45-52页
            4 讨论第52-56页
    第三部分 间隙连接通讯功能和cx43基因信号转导机制的初步研究第56-66页
        前言第56-66页
            1 材料第57-58页
                1.1 细胞系第57页
                1.2 主要仪器第57页
                1.3 主要试剂第57-58页
            2 方法第58-60页
                2.1 细胞培养第58页
                2.2 Lucifer Yellow划痕标记荧光传输法第58页
                2.3 细胞内第二信使Ca~(2+)含量测定第58-59页
                    2.3.1 Fluo-3AM负载第58-59页
                    2.3.2 激光扫描共聚焦显微镜测定[Ca~(2+)]_I第59页
                2.4 Cx43蛋白及其酪氨酸磷酸化分析第59-60页
                    2.4.1 细胞裂解第59页
                    2.4.2 SDS-PAGE电泳第59-60页
                    2.4.3 Western blot第60页
            3 结果第60-63页
                3.1 间隙连接通讯功能测定结果第60页
                3.2 细胞内第二信使[Ca~(2+)]_i含量分析结果第60-63页
                3.3 Cx43蛋白及其酪氨酸磷酸化分析结果第63页
            4 讨论第63-66页
    结论第66-67页
    致谢第67-68页
    附录第68-73页
    参考文献第73-81页

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