中文摘要 | 第6-8页 |
英文摘要 | 第8页 |
英文缩略词表 | 第11-13页 |
前言 | 第13-15页 |
文献回顾 | 第15-29页 |
一、 间隙连接的形态与结构 | 第15页 |
二、 间隙连接多基因家族 | 第15-17页 |
三、 间隙连接的功能 | 第17-19页 |
四、 间隙连接功能的调节 | 第19-23页 |
五、 间隙连接的研究方法 | 第23-24页 |
六、 间隙连接在骨改建中的研究 | 第24-29页 |
实验部分 | 第29-81页 |
第一部分 间隙连接蛋白cx43及其mRNA在大鼠成骨样细胞的表达 | 第29-39页 |
前言 | 第29-39页 |
1 材料 | 第30-31页 |
1.1 细胞系 | 第30页 |
1.2 主要仪器 | 第30页 |
1.3 主要试剂 | 第30-31页 |
2 方法 | 第31-34页 |
2.1 细胞培养和爬片 | 第31页 |
2.2 免疫组织化学法 | 第31-32页 |
2.2.1 SP免疫组织化学法 | 第31-32页 |
2.2.2 免疫组织化学结果判定 | 第32页 |
2.3 激光扫描共聚伙显微镜分析 | 第32页 |
2.3.1 间接免疫荧光染色 | 第32页 |
2.3.2 激光扫描共聚焦显微镜定位、定量分析 | 第32页 |
2.4 培养细胞mRNA原位杂交 | 第32-34页 |
2.4.1 探针制备、标记 | 第32-33页 |
2.4.2 mRNA原位杂交 | 第33页 |
2.4.3 原位杂交结果判定 | 第33-34页 |
3 结果 | 第34-37页 |
3.1 免疫组织化学结果 | 第34-35页 |
3.2 激光扫描共聚焦显微镜分析结果 | 第35-36页 |
3.3 细胞原位杂交结果 | 第36-37页 |
4 讨论 | 第37-39页 |
第二部分 bFGF对间隙连接蛋白cx43表达的影响 | 第39-56页 |
前言 | 第39-56页 |
1 材料 | 第40-41页 |
1.1 细胞系 | 第40页 |
1.2 主要仪器 | 第40页 |
1.3 主要试剂 | 第40-41页 |
2 方法 | 第41-42页 |
2.1 细胞培养和爬片 | 第41页 |
2.2 免疫组织化学法 | 第41-42页 |
2.2.1 SP免疫组织化学法 | 第41页 |
2.2.2 免疫组织化学结果判定 | 第41-42页 |
2.3 激光扫描共聚焦显微镜分析 | 第42页 |
2.3.1 间接免疫荧光染色 | 第42页 |
2.3.2 激光扫描共聚焦显微镜定位、定量分析 | 第42页 |
3 结果 | 第42-52页 |
3.1 免疫组织化学结果 | 第42-45页 |
3.2 激光扫描共聚焦显微镜分析结果 | 第45-52页 |
4 讨论 | 第52-56页 |
第三部分 间隙连接通讯功能和cx43基因信号转导机制的初步研究 | 第56-66页 |
前言 | 第56-66页 |
1 材料 | 第57-58页 |
1.1 细胞系 | 第57页 |
1.2 主要仪器 | 第57页 |
1.3 主要试剂 | 第57-58页 |
2 方法 | 第58-60页 |
2.1 细胞培养 | 第58页 |
2.2 Lucifer Yellow划痕标记荧光传输法 | 第58页 |
2.3 细胞内第二信使Ca~(2+)含量测定 | 第58-59页 |
2.3.1 Fluo-3AM负载 | 第58-59页 |
2.3.2 激光扫描共聚焦显微镜测定[Ca~(2+)]_I | 第59页 |
2.4 Cx43蛋白及其酪氨酸磷酸化分析 | 第59-60页 |
2.4.1 细胞裂解 | 第59页 |
2.4.2 SDS-PAGE电泳 | 第59-60页 |
2.4.3 Western blot | 第60页 |
3 结果 | 第60-63页 |
3.1 间隙连接通讯功能测定结果 | 第60页 |
3.2 细胞内第二信使[Ca~(2+)]_i含量分析结果 | 第60-63页 |
3.3 Cx43蛋白及其酪氨酸磷酸化分析结果 | 第63页 |
4 讨论 | 第63-66页 |
结论 | 第66-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
附录 | 第68-73页 |
参考文献 | 第73-81页 |