前言 | 第4-5页 |
中文摘要 | 第5-8页 |
Abstract | 第8-11页 |
缩略词表 | 第15-17页 |
第1章 绪论 | 第17-31页 |
1.1 μ-阿片受体研究进展 | 第17-23页 |
1.1.1 概述 | 第17-18页 |
1.1.2 μ-阿片受体的亚型 | 第18-19页 |
1.1.3 μ-阿片受体与配体的相互作用 | 第19页 |
1.1.4 μ-阿片受体的信号转导机制 | 第19-20页 |
1.1.5 μ-阿片受体在 G 蛋白水平的调节 | 第20页 |
1.1.6 μ-阿片受体在免疫功能调节中的作用 | 第20-21页 |
1.1.7 μ-阿片受体在血管再生中的作用 | 第21页 |
1.1.8 μ-阿片受体与肿瘤 | 第21-23页 |
1.1.9 μ-阿片受体研究的展望 | 第23页 |
1.2 MAPK 信号通路 | 第23-31页 |
1.2.1 JNK 信号传导通路 | 第24-28页 |
1.2.2 p38/MAPK 通路 | 第28-29页 |
1.2.3 ERK 信号通路 | 第29-31页 |
第2章 实验材料与方法 | 第31-49页 |
2.1 病例标本取材 | 第31页 |
2.2 细胞、抗体和相关试剂 | 第31-32页 |
2.3 实验仪器 | 第32-33页 |
2.4 细胞培养 | 第33-35页 |
2.4.1 相关试剂的制备 | 第33-34页 |
2.4.2 细胞培养方法 | 第34页 |
2.4.3 细胞冻存方法 | 第34-35页 |
2.5 MTT 法检测细胞活性 | 第35-36页 |
2.5.1 相关试剂的制备 | 第35页 |
2.5.2 实验步骤 | 第35-36页 |
2.6 免疫组化分析 | 第36-37页 |
2.6.1 相关试剂的制备 | 第36页 |
2.6.2 实验步骤 | 第36-37页 |
2.7 siRNA 转染 | 第37-38页 |
2.8 RNA 提取和 RT-PCR | 第38-41页 |
2.8.1 总 RNA 提取所需试剂 | 第38页 |
2.8.2 总 RNA 提取的步骤 | 第38-39页 |
2.8.3 RNA 浓度及纯度的测定 | 第39-40页 |
2.8.4 RT-PCR 的步骤 | 第40-41页 |
2.9 Western blot 检测 | 第41-45页 |
2.9.1 相关试剂的配制 | 第41-43页 |
2.9.2 实验步骤 | 第43-45页 |
2.10 细胞周期测定 | 第45-46页 |
2.11 细胞凋亡分析 | 第46-47页 |
2.11.1 Hoechst 33342 染色观察细胞凋亡 | 第46页 |
2.11.2 AnnexinⅤ-FITC/PI 双标记流式细胞术检测细胞凋亡 | 第46-47页 |
2.12 裸鼠肿瘤模型的建立 | 第47页 |
2.13 统计分析 | 第47-49页 |
第3章 实验结果 | 第49-65页 |
3.1 人类肝癌细胞及肝癌组织中 MOR 的表达 | 第49-52页 |
3.2 RNA 干扰技术沉默 MOR 基因的表达 | 第52-54页 |
3.3 MOR 下调抑制人肝癌细胞的生长 | 第54-55页 |
3.4 MOR 下调促进人肝癌细胞的凋亡 | 第55-57页 |
3.5 MOR 下调阻断人肝癌细胞的细胞周期 | 第57-59页 |
3.6 MOR 下调抑制裸小鼠的肿瘤生长 | 第59-60页 |
3.7 MOR 下调增加磷酸化 MKK7 表达 | 第60-62页 |
3.8 RNA 干扰沉默MKK7 逆转MOR 下调对人肝癌细胞生长的抑制作用 | 第62-65页 |
第4章 讨论 | 第65-69页 |
第5章 结论 | 第69-71页 |
参考文献 | 第71-85页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第85-87页 |
致谢 | 第87-88页 |