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μ-阿片受体下调抑制人类肝癌进程及其相关机制的研究

前言第4-5页
中文摘要第5-8页
Abstract第8-11页
缩略词表第15-17页
第1章 绪论第17-31页
    1.1 μ-阿片受体研究进展第17-23页
        1.1.1 概述第17-18页
        1.1.2 μ-阿片受体的亚型第18-19页
        1.1.3 μ-阿片受体与配体的相互作用第19页
        1.1.4 μ-阿片受体的信号转导机制第19-20页
        1.1.5 μ-阿片受体在 G 蛋白水平的调节第20页
        1.1.6 μ-阿片受体在免疫功能调节中的作用第20-21页
        1.1.7 μ-阿片受体在血管再生中的作用第21页
        1.1.8 μ-阿片受体与肿瘤第21-23页
        1.1.9 μ-阿片受体研究的展望第23页
    1.2 MAPK 信号通路第23-31页
        1.2.1 JNK 信号传导通路第24-28页
        1.2.2 p38/MAPK 通路第28-29页
        1.2.3 ERK 信号通路第29-31页
第2章 实验材料与方法第31-49页
    2.1 病例标本取材第31页
    2.2 细胞、抗体和相关试剂第31-32页
    2.3 实验仪器第32-33页
    2.4 细胞培养第33-35页
        2.4.1 相关试剂的制备第33-34页
        2.4.2 细胞培养方法第34页
        2.4.3 细胞冻存方法第34-35页
    2.5 MTT 法检测细胞活性第35-36页
        2.5.1 相关试剂的制备第35页
        2.5.2 实验步骤第35-36页
    2.6 免疫组化分析第36-37页
        2.6.1 相关试剂的制备第36页
        2.6.2 实验步骤第36-37页
    2.7 siRNA 转染第37-38页
    2.8 RNA 提取和 RT-PCR第38-41页
        2.8.1 总 RNA 提取所需试剂第38页
        2.8.2 总 RNA 提取的步骤第38-39页
        2.8.3 RNA 浓度及纯度的测定第39-40页
        2.8.4 RT-PCR 的步骤第40-41页
    2.9 Western blot 检测第41-45页
        2.9.1 相关试剂的配制第41-43页
        2.9.2 实验步骤第43-45页
    2.10 细胞周期测定第45-46页
    2.11 细胞凋亡分析第46-47页
        2.11.1 Hoechst 33342 染色观察细胞凋亡第46页
        2.11.2 AnnexinⅤ-FITC/PI 双标记流式细胞术检测细胞凋亡第46-47页
    2.12 裸鼠肿瘤模型的建立第47页
    2.13 统计分析第47-49页
第3章 实验结果第49-65页
    3.1 人类肝癌细胞及肝癌组织中 MOR 的表达第49-52页
    3.2 RNA 干扰技术沉默 MOR 基因的表达第52-54页
    3.3 MOR 下调抑制人肝癌细胞的生长第54-55页
    3.4 MOR 下调促进人肝癌细胞的凋亡第55-57页
    3.5 MOR 下调阻断人肝癌细胞的细胞周期第57-59页
    3.6 MOR 下调抑制裸小鼠的肿瘤生长第59-60页
    3.7 MOR 下调增加磷酸化 MKK7 表达第60-62页
    3.8 RNA 干扰沉默MKK7 逆转MOR 下调对人肝癌细胞生长的抑制作用第62-65页
第4章 讨论第65-69页
第5章 结论第69-71页
参考文献第71-85页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第85-87页
致谢第87-88页

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