摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 前言 | 第10-15页 |
1. 铜绿假单胞菌 | 第10-11页 |
1.1 绿脓菌素 | 第10页 |
1.2 鼠李糖脂 | 第10-11页 |
2. 双组份调节系统 | 第11-12页 |
2.1 RrhRS双组份调控系统的研究进展 | 第11-12页 |
3. 群体感应系统 | 第12页 |
3.1 群体感应系统的研究进展 | 第12页 |
4. Ⅲ型分泌系统 | 第12-13页 |
4.1 Ⅲ型分泌系统的研究进展 | 第13页 |
5. 本课题研究的目的和意义 | 第13-14页 |
6. 本研究的技术路线 | 第14-15页 |
第二章 实验材料和方法 | 第15-30页 |
1. 实验材料 | 第15-19页 |
1.1 实验中用到菌株、质粒和引物 | 第15-16页 |
1.2 试剂 | 第16-17页 |
1.3 常用的培养基及配方(见附录一) | 第17页 |
1.4 常用的感受态的制作方法 | 第17-18页 |
1.5 仪器 | 第18-19页 |
2. 实验方法 | 第19-30页 |
2.1 基因芯片分析 | 第19-21页 |
2.2 Western-blot分析 | 第21-23页 |
2.3 电泳迁移率(EMSA)和DNase Ⅰ Footprinting分析 | 第23-26页 |
2.4 LuxCDABE报告基因分析 | 第26-28页 |
2.5 C_4-HSL信号分子的检测 | 第28页 |
2.6 表型分析 | 第28-29页 |
2.7 致病性分析 | 第29-30页 |
第三章 结果与分析 | 第30-48页 |
1. rrhR基因的自调控表达 | 第30-34页 |
1.1 芯片的结果分析 | 第30-31页 |
1.2 报告基因分析 | 第31页 |
1.3 RrhR的western-blot分析 | 第31-32页 |
1.4 rrhR的EMSA和Footprinting分析 | 第32-34页 |
2. RrhR对群体感应的调控 | 第34-42页 |
2.1 基因芯片分析 | 第34-35页 |
2.2 电泳迁移率(EMSA)和DNase Ⅰ足迹法分析(Footprinting) | 第35-36页 |
2.3 报告基因分析 | 第36-37页 |
2.4 C_4信号分子(C4-HSL)的检测 | 第37-38页 |
2.5 鼠李糖脂和绿脓菌素的表型分析 | 第38-41页 |
2.6 菌株的致病性分析 | 第41-42页 |
3. RrhRS对Ⅲ型分泌系统的调控 | 第42-45页 |
3.1 电泳迁移率分析 | 第42-43页 |
3.2 Footprinting分析 | 第43-44页 |
3.3 报告基因分析 | 第44-45页 |
4. RrhR结合位点的确定 | 第45-48页 |
4.1 EMSA分析 | 第45页 |
4.2 Footprinting分析 | 第45-46页 |
4.3 报告基因分析 | 第46-48页 |
第四章 讨论 | 第48-49页 |
第五章 结论 | 第49页 |
参考文献 | 第49-53页 |
附录 | 第53-55页 |
致谢 | 第55页 |