| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 前言 | 第9-23页 |
| 1.1 丙酮酸的基本特性 | 第9页 |
| 1.2 丙酮酸的生产 | 第9-14页 |
| 1.2.1 化学合成法生产丙酮酸 | 第10-11页 |
| 1.2.2 生物技术法生产丙酮酸 | 第11-14页 |
| 1.3 用代谢途径改造产丙酮酸 | 第14-17页 |
| 1.4 Tn5转座子 | 第17-19页 |
| 1.4.1 Tn5转座子简介 | 第17-18页 |
| 1.4.2 pUT-mini Tn5转座子 | 第18-19页 |
| 1.5 进化工程 | 第19-20页 |
| 1.6 本课题研究内容、目的及意义 | 第20-23页 |
| 1.6.1 研究目的及意义 | 第20-21页 |
| 1.6.2 研究内容 | 第21-23页 |
| 2 实验材料和方法 | 第23-39页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第23-24页 |
| 2.1.2 主要药品和试剂 | 第24-25页 |
| 2.1.3 主要设备 | 第25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-39页 |
| 2.2.1 丙酮酸突变文库的构建 | 第25-31页 |
| 2.2.2 利用pUT-Mini Tn5 Cm转座子制备突变文库 | 第31-35页 |
| 2.2.3 基于dnaQ突变体的基因组复制工程文库的构建 | 第35-39页 |
| 3 结果与讨论 | 第39-59页 |
| 3.1 pUT-Mini Tn5 Cm转座子突变 | 第39-51页 |
| 3.1.1 构建丙酮酸筛选方法 | 第39页 |
| 3.1.2 两种方法的比较 | 第39-40页 |
| 3.1.3 Tn5转座子突变文库的构建及筛选 | 第40-43页 |
| 3.1.4 突变菌株摇瓶评价 | 第43-45页 |
| 3.1.5 基于转座子突变的 5L发酵罐发酵检测 | 第45-48页 |
| 3.1.6 对转座子突变体菌株插入位点鉴定—全基因组重测序 | 第48-50页 |
| 3.1.7 转座子插入位点验证 | 第50-51页 |
| 3.2 基于dnaQ突变体的基因组复制工程文库的突变 | 第51-59页 |
| 3.2.1 构建丙酮酸筛选方法 | 第51页 |
| 3.2.2 基于dnaQ突变体文库的构建及筛选 | 第51-54页 |
| 3.2.3 突变菌株摇瓶评价 | 第54页 |
| 3.2.4 基于dnaQ突变体的 5L发酵罐发酵检测 | 第54-55页 |
| 3.2.5 对dnaQ突变体菌株插入位点鉴定—全基因组重测序 | 第55-59页 |
| 4 结论 | 第59-61页 |
| 5 展望 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-69页 |
| 在学期间的研究成果 | 第69-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
