摘要 | 第3-5页 |
abstract | 第5-6页 |
第1章 引言 | 第10-19页 |
1.1 镉元素的理化性质 | 第10页 |
1.2 镉在自然界中的分布情况 | 第10-11页 |
1.3 镉的雄性生殖毒性 | 第11-14页 |
1.3.1 镉对生殖上皮的影响 | 第12页 |
1.3.2 镉对血睾屏障的影响 | 第12-13页 |
1.3.3 镉对睾丸支持细胞的影响 | 第13页 |
1.3.4 镉对睾丸间质细胞的影响 | 第13-14页 |
1.4 细胞凋亡简述 | 第14页 |
1.5 细胞凋亡的信号转导通路 | 第14-17页 |
1.5.1 线粒体传导途径 | 第15-16页 |
1.5.2 死亡受体传导途径 | 第16-17页 |
1.5.3 内质网传导途径 | 第17页 |
1.6 本研究的目的和意义 | 第17-19页 |
第2章 大鼠睾丸支持细胞的分离纯化及鉴定 | 第19-28页 |
2.1 前言 | 第19页 |
2.2 材料与方法 | 第19-23页 |
2.2.1 实验材料 | 第19-20页 |
2.2.2 主要仪器设备 | 第20页 |
2.2.3 主要试剂 | 第20页 |
2.2.4 支持细胞的分离纯化 | 第20-21页 |
2.2.5 支持细胞的传代 | 第21页 |
2.2.6 支持细胞的冻存复苏 | 第21-22页 |
2.2.7 支持细胞的HE染色 | 第22页 |
2.2.8 支持细胞的油红O染色 | 第22页 |
2.2.9 支持细胞的Feulgen染色 | 第22-23页 |
2.3 实验结果 | 第23-26页 |
2.3.1 大鼠原代支持细胞形态特征 | 第23-24页 |
2.3.2 HE染色支持细胞 | 第24页 |
2.3.3 油红O染色支持细胞 | 第24-25页 |
2.3.4 Feulgen染色观察 | 第25-26页 |
2.4 讨论 | 第26-28页 |
第3章 镉诱导大鼠睾丸支持细胞氧化损伤及凋亡 | 第28-55页 |
3.1 前言 | 第28-29页 |
3.2 材料与方法 | 第29-34页 |
3.2.1 实验材料 | 第29页 |
3.2.2 主要仪器设备 | 第29页 |
3.2.3 主要试剂 | 第29-30页 |
3.2.4 MTT法检测氯化镉对大鼠睾丸支持细胞细胞增殖的影响 | 第30页 |
3.2.5 考马斯亮兰法检测蛋白含量 | 第30页 |
3.2.6 SOD活力测定 | 第30-31页 |
3.2.7 MDA含量测定 | 第31页 |
3.2.8 支持细胞超微结构的变化 | 第31-32页 |
3.2.9 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第32页 |
3.2.10 RNA的提取 | 第32页 |
3.2.11 cDNA第一链的合成 | 第32-33页 |
3.2.12 引物设计 | 第33-34页 |
3.2.13 RTFQ-PCR法 | 第34页 |
3.3 实验结果 | 第34-51页 |
3.3.1 镉对大鼠睾丸支持细胞增殖率的影响 | 第34-36页 |
3.3.2 SOD活力测定 | 第36页 |
3.3.3 MDA含量测定 | 第36-37页 |
3.3.4 镉对大鼠睾丸支持细胞超微结构的变化 | 第37-42页 |
3.3.5 流式细胞术检测大鼠睾丸支持细胞凋亡 | 第42-44页 |
3.3.6 总RNA提取 | 第44-45页 |
3.3.7 Bax,Bcl-2,Cyt-C,AIF,Caspase-3 及Caspase-9 基因的实时荧光定量表达 | 第45-47页 |
3.3.8 荧光定量PCR法检测Bax基因mRNA的表达 | 第47-48页 |
3.3.9 荧光定量PCR法检测Bcl-2 基因mRNA的表达 | 第48-49页 |
3.3.10 荧光定量PCR法检测Cyt-C基因mRNA的表达 | 第49页 |
3.3.11 荧光定量PCR法检测AIF基因mRNA的表达 | 第49-50页 |
3.3.12 荧光定量PCR法检测Caspase-3 基因mRNA的表达 | 第50-51页 |
3.3.13 荧光定量PCR法检测Caspase-9 基因mRNA的表达 | 第51页 |
3.4 讨论 | 第51-55页 |
3.4.1 镉对支持细胞增殖率的影响 | 第51-52页 |
3.4.2 镉对支持细胞抗氧化酶活性的影响 | 第52页 |
3.4.3 镉对支持细胞超微结构的影响 | 第52-53页 |
3.4.4 流式细胞术检测支持细胞凋亡情况 | 第53页 |
3.4.5 RTFQ-PCR法检测Bax,Bcl-2,Cyt-C,AIF,Caspase-3 及Caspase-9基因mRNA的表达 | 第53-55页 |
第4章 结论与展望 | 第55-57页 |
4.1 结论 | 第55页 |
4.2 进一步的工作方向 | 第55-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-67页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第67页 |