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镉诱导大鼠支持细胞凋亡机制的研究

摘要第3-5页
abstract第5-6页
第1章 引言第10-19页
    1.1 镉元素的理化性质第10页
    1.2 镉在自然界中的分布情况第10-11页
    1.3 镉的雄性生殖毒性第11-14页
        1.3.1 镉对生殖上皮的影响第12页
        1.3.2 镉对血睾屏障的影响第12-13页
        1.3.3 镉对睾丸支持细胞的影响第13页
        1.3.4 镉对睾丸间质细胞的影响第13-14页
    1.4 细胞凋亡简述第14页
    1.5 细胞凋亡的信号转导通路第14-17页
        1.5.1 线粒体传导途径第15-16页
        1.5.2 死亡受体传导途径第16-17页
        1.5.3 内质网传导途径第17页
    1.6 本研究的目的和意义第17-19页
第2章 大鼠睾丸支持细胞的分离纯化及鉴定第19-28页
    2.1 前言第19页
    2.2 材料与方法第19-23页
        2.2.1 实验材料第19-20页
        2.2.2 主要仪器设备第20页
        2.2.3 主要试剂第20页
        2.2.4 支持细胞的分离纯化第20-21页
        2.2.5 支持细胞的传代第21页
        2.2.6 支持细胞的冻存复苏第21-22页
        2.2.7 支持细胞的HE染色第22页
        2.2.8 支持细胞的油红O染色第22页
        2.2.9 支持细胞的Feulgen染色第22-23页
    2.3 实验结果第23-26页
        2.3.1 大鼠原代支持细胞形态特征第23-24页
        2.3.2 HE染色支持细胞第24页
        2.3.3 油红O染色支持细胞第24-25页
        2.3.4 Feulgen染色观察第25-26页
    2.4 讨论第26-28页
第3章 镉诱导大鼠睾丸支持细胞氧化损伤及凋亡第28-55页
    3.1 前言第28-29页
    3.2 材料与方法第29-34页
        3.2.1 实验材料第29页
        3.2.2 主要仪器设备第29页
        3.2.3 主要试剂第29-30页
        3.2.4 MTT法检测氯化镉对大鼠睾丸支持细胞细胞增殖的影响第30页
        3.2.5 考马斯亮兰法检测蛋白含量第30页
        3.2.6 SOD活力测定第30-31页
        3.2.7 MDA含量测定第31页
        3.2.8 支持细胞超微结构的变化第31-32页
        3.2.9 流式细胞术检测细胞凋亡第32页
        3.2.10 RNA的提取第32页
        3.2.11 cDNA第一链的合成第32-33页
        3.2.12 引物设计第33-34页
        3.2.13 RTFQ-PCR法第34页
    3.3 实验结果第34-51页
        3.3.1 镉对大鼠睾丸支持细胞增殖率的影响第34-36页
        3.3.2 SOD活力测定第36页
        3.3.3 MDA含量测定第36-37页
        3.3.4 镉对大鼠睾丸支持细胞超微结构的变化第37-42页
        3.3.5 流式细胞术检测大鼠睾丸支持细胞凋亡第42-44页
        3.3.6 总RNA提取第44-45页
        3.3.7 Bax,Bcl-2,Cyt-C,AIF,Caspase-3 及Caspase-9 基因的实时荧光定量表达第45-47页
        3.3.8 荧光定量PCR法检测Bax基因mRNA的表达第47-48页
        3.3.9 荧光定量PCR法检测Bcl-2 基因mRNA的表达第48-49页
        3.3.10 荧光定量PCR法检测Cyt-C基因mRNA的表达第49页
        3.3.11 荧光定量PCR法检测AIF基因mRNA的表达第49-50页
        3.3.12 荧光定量PCR法检测Caspase-3 基因mRNA的表达第50-51页
        3.3.13 荧光定量PCR法检测Caspase-9 基因mRNA的表达第51页
    3.4 讨论第51-55页
        3.4.1 镉对支持细胞增殖率的影响第51-52页
        3.4.2 镉对支持细胞抗氧化酶活性的影响第52页
        3.4.3 镉对支持细胞超微结构的影响第52-53页
        3.4.4 流式细胞术检测支持细胞凋亡情况第53页
        3.4.5 RTFQ-PCR法检测Bax,Bcl-2,Cyt-C,AIF,Caspase-3 及Caspase-9基因mRNA的表达第53-55页
第4章 结论与展望第55-57页
    4.1 结论第55页
    4.2 进一步的工作方向第55-57页
致谢第57-58页
参考文献第58-67页
攻读学位期间的研究成果第67页

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