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MPP~+诱导PC12细胞Ferroptosis的研究

中文摘要第9-12页
ABSTRACT第12-15页
英文缩略词(Abbreviation)第16-18页
前言第18-20页
第一部分 Ferrostatin-1 对MPP~+损伤PC12细胞的保护作用第20-31页
    1 实验材料及仪器第20-21页
        1.1 细胞株第20页
        1.2 药物第20页
        1.3 主要试剂第20页
        1.4 主要试剂配制第20页
        1.5 主要仪器第20-21页
    2.实验方法第21-24页
        2.1 细胞复苏第21页
        2.2 细胞传代和培养第21-22页
        2.3 细胞冻存第22页
        2.4 细胞计数第22页
        2.5 MPP~+药液和Ferrostatin-1 的配制第22页
        2.6 MPP~+浓度筛选第22-23页
        2.7 实验分组第23页
        2.8 Ferrostatin-1 对MPP~+损伤PC12细胞的药物敏感性试验第23-24页
        2.9 倒置显微镜观察Ferrostatin-1 对MPP~+损伤PC12细胞形态第24页
        2.10 LDH 试剂盒检测细胞漏出率第24页
        2.11 统计学方法第24页
    3 实验结果第24-29页
        3.1 MPP~+浓度筛选第24-25页
        3.2 Ferrostatin-1 对MPP~+损伤的PC12细胞活力的影响第25-27页
        3.3 Ferrostatin-1 对MPP~+损伤PC12细胞的形态学观察第27-28页
        3.4 Ferrostatin-1 对MPP~+损伤的PC12细胞的LDH漏出的影响第28-29页
    4 讨论第29-30页
        4.1 Ferrostatin-1 对MPP~+损伤的PC12细胞存活率的影响第29页
        4.2 Ferrostatin-1 对MPP~+诱导PC12细胞损伤的保护作用第29-30页
    5 小结第30-31页
第二部分 MPP~+诱导PC12细胞损伤中Ferroptosis的存在第31-50页
    1 实验材料及仪器第31-33页
        1.1 细胞株第31页
        1.2 药物第31页
        1.3 主要试剂第31-32页
        1.4 主要试剂配制第32页
        1.5 主要仪器第32-33页
    2 实验方法第33-37页
        2.1 细胞复苏、传代、培养和冻存第33页
        2.2 实验分组及药物处理第33页
        2.3 5种抑制剂对MPP~+诱导PC12细胞的影响第33-34页
        2.4 倒置荧光显微镜及流式细胞术检测第34页
        2.5 酶标仪检测Caspase-3 在细胞中的表达第34页
        2.6 氧化应激指标的检测第34-36页
        2.7 Western blot检测Ferroportin 1(FP1)蛋白的表达第36-37页
        2.8 透射电子显微镜观察线粒体形态变化第37页
        2.9 统计学处理第37页
    3 结果第37-46页
        3.1 5种抑制剂对MPP~+诱导PC12细胞损伤的保护作用第37-38页
        3.2 MDC染色检测细胞自噬第38-39页
        3.3 流式细胞术对MDC染色的结果分析第39-40页
        3.4 Caspase-3 表达检测第40-41页
        3.5 细胞内胞质活性氧(ROS)的检测第41-42页
        3.6 细胞内脂质活性氧(ROS)的检测第42-43页
        3.7 超氧化物歧化酶(SOD)的检测第43-44页
        3.8 丙二醛(MDA)的检测第44-45页
        3.9 谷胱甘肽含量检测第45页
        3.10 Western blot检测细胞内Ferroportin 1(FP1)蛋白的表达情况第45-46页
        3.11 线粒体形态的检测第46页
    4 讨论第46-48页
    5 小结第48-50页
第三部分 MPP~+诱导PC12细胞Ferroptosis的分子机制第50-65页
    1 实验材料及仪器第50-52页
        1.1 细胞株第50页
        1.2 药物第50页
        1.3 主要试剂第50-51页
        1.4 主要试剂配制第51页
        1.5 主要仪器第51-52页
    2 实验方法第52-58页
        2.1 细胞复苏、传代、培养和冻存第52页
        2.2 实验分组及药物处理第52页
        2.3 细胞处理第52页
        2.4 细胞总蛋白提取(蛋白样品的制备)第52-53页
        2.5 蛋白含量的测定第53-54页
        2.6 SDS-PAGE凝胶电泳第54-56页
        2.7 细胞总RNA提取(RNA样品的制备)第56-57页
        2.8 cDNA的合成第57页
        2.9 聚合酶链式反应第57-58页
        2.10 琼脂糖凝胶电泳第58页
        2.11 统计学处理第58页
    3 结果第58-62页
        3.1 Western blot检测细胞Ptgs2蛋白的表达情况第58-59页
        3.2 Western blot检测细胞GPX4蛋白的表达情况第59页
        3.3 Western blot检测DJ-1 蛋白表达第59-60页
        3.4 Ptgs2基因的表达水平第60-61页
        3.5 RT-PCR法检测DJ-1 基因水平第61-62页
    4 讨论第62-64页
        4.1 氧化应激与Ferroptosis第62-63页
        4.2 DJ-1 与Ferroptosis第63-64页
    5 小结第64-65页
讨论第65-67页
总结第67-71页
参考文献第71-75页
综述第75-85页
    参考文献第82-85页
附录第85-86页
致谢第86页

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