| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 缩略语 | 第10-11页 |
| 前言 | 第11-14页 |
| 第一部分 5-azacytidine影响p16~(Ink4a)基因表达及Wnt/β-catenin信号通路活性并抑制胰腺癌Bxpc-3细胞增殖 | 第14-41页 |
| 1 实验材料 | 第14-18页 |
| 1.1 实验用细胞株 | 第14页 |
| 1.2 实验用主要的设备与仪器 | 第14-15页 |
| 1.3 实验用主要试剂及配制 | 第15-18页 |
| 2 实验方法 | 第18-32页 |
| 2.1 细胞培养 | 第18-20页 |
| 2.2 CCK-8法测定细胞增殖活性 | 第20-21页 |
| 2.3 细胞总RNA提取 | 第21-22页 |
| 2.4 RT-PCR反应 | 第22-24页 |
| 2.5 Western Blotting检测 | 第24-30页 |
| 2.6 流式细胞仪检测 | 第30页 |
| 2.7 甲基化PCR检测Bxpc-3细胞p16~(Ink4a).基因甲基化水平 | 第30-32页 |
| 2.8 数据处理 | 第32页 |
| 3 结果 | 第32-39页 |
| 3.1 5-azacytidine对胰腺癌细胞增殖能力的影响 | 第32-33页 |
| 3.2 甲基化PCR检测Bxpc-3细胞p16~(Ink4a).基因甲基化水平 | 第33-34页 |
| 3.3 5-azacytidine对胰腺癌细胞Wnt信号通路关键分子mRNA表达的影响 | 第34-37页 |
| 3.4 5-azacytidine对胰腺癌细胞Wnt信号通路关键分子蛋白表达的影响 | 第37-38页 |
| 3.5 5-azacytidine对胰腺癌细胞早期凋亡的影响 | 第38-39页 |
| 4 结论 | 第39-41页 |
| 第二部分 转染pcDNA3.0-p16~(Ink4a)对Wnt信号通路关键分子的影响 | 第41-51页 |
| 1. 实验材料 | 第41-43页 |
| 1.1 实验用细胞株及试剂 | 第41-43页 |
| 1.2 实验用主要的设备与仪器 | 第43页 |
| 1.3 实验用主要试剂 | 第43页 |
| 2 实验方法 | 第43-44页 |
| 2.1 细胞培养主要同前一部分所述 | 第43页 |
| 2.2 pc-DNA3.0-p16~(Ink4a)质粒转染胰腺癌细胞 | 第43-44页 |
| 2.3 细胞总RNA提取 | 第44页 |
| 2.4 RT-PCR反应实时荧光定量PCR反应 | 第44页 |
| 2.5 Western Blotting检测 | 第44页 |
| 2.6 数据处理 | 第44页 |
| 3 结果 | 第44-49页 |
| 3.1 pc-DNA3.0-p16~(Ink4a)质粒转染胰腺癌细胞效率 | 第44-47页 |
| 3.2 转染p16~(Ink4a)对胰腺癌细胞Wnt信号通路关键分子mRNA表达的影响 | 第47-48页 |
| 3.3 转染p16~(Ink4a)对胰腺癌细胞Wnt信号通路关键分子蛋白表达的影响 | 第48-49页 |
| 4 结论 | 第49-51页 |
| 第三部分 讨论 | 第51-58页 |
| 参考文献 | 第58-62页 |
| 综述 | 第62-74页 |
| 参考文献 | 第71-74页 |
| 在学期间的研究成果 | 第74-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
