| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第一章 绪论 | 第9-23页 |
| 1.1 概述 | 第9页 |
| 1.2 表皮生长因子的研究现状和发展 | 第9-10页 |
| 1.3 芽孢杆菌表达系统研究进展 | 第10-21页 |
| 1.3.1 芽袍杆菌表达系统的宿主菌株 | 第11-15页 |
| 1.3.2 芽孢杆菌系统的载体 | 第15-18页 |
| 1.3.3 芽孢杆菌对外源蛋白的分泌表达 | 第18-21页 |
| 1.3.4 存在问题及今后发展方向 | 第21页 |
| 1.4 本研究的立题意义和研究内容 | 第21-23页 |
| 1.4.1 立题意义 | 第21-22页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第22-23页 |
| 第二章 重组人表皮生长因子在枯草芽孢杆菌中的表达 | 第23-31页 |
| 2.1 材料与方法 | 第23-28页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第23页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第23页 |
| 2.1.3 工具酶和试剂 | 第23-25页 |
| 2.1.4 工程菌构建 | 第25-27页 |
| 2.1.5 重组菌摇瓶实验及 Tricine-SDS-PAGE 检测 | 第27-28页 |
| 2.2 结果与讨论 | 第28-30页 |
| 2.2.1 表达载体及工程菌的构建 | 第28-29页 |
| 2.2.2 重组菌目的蛋白表达 Tricine-SDS-PAGE 分析 | 第29-30页 |
| 2.3 本章小结 | 第30-31页 |
| 第三章 重组人表皮生长因子在短短芽孢杆菌中的分泌表达 | 第31-39页 |
| 3.1 材料与方法 | 第31-34页 |
| 3.1.1 菌株与质粒 | 第31页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第31页 |
| 3.1.3 工具酶和试剂 | 第31页 |
| 3.1.4 工程菌构建 | 第31-34页 |
| 3.1.5 重组菌摇瓶实验及 Tricine-SDS-PAGE 检测 | 第34页 |
| 3.2 结果与讨论 | 第34-38页 |
| 3.2.1 短短芽孢杆菌细胞壁蛋白基因多启动子和信号肽编码序列的克隆 | 第34-36页 |
| 3.2.2 工程菌的构建 | 第36-37页 |
| 3.2.3 重组菌目的蛋白表达 Tricine-SDS-PAGE 分析 | 第37-38页 |
| 3.3 本章小结 | 第38-39页 |
| 第四章 工程菌的高密度发酵、目的蛋白纯化和活性检测 | 第39-49页 |
| 4.1 材料与方法 | 第39-41页 |
| 4.1.1 菌种 | 第39页 |
| 4.1.2 主要仪器及试剂 | 第39页 |
| 4.1.3 培养基 | 第39-40页 |
| 4.1.4 发酵实验 | 第40页 |
| 4.1.5 目的蛋白纯化 | 第40页 |
| 4.1.6 重组人表皮生长因子的纯度检测 | 第40-41页 |
| 4.1.7 重组人表皮生长因子的活性检测 | 第41页 |
| 4.2 结果与分析 | 第41-48页 |
| 4.2.1 工程菌 HPD31-SP3(pNY-cwpE)发酵 | 第41-42页 |
| 4.2.2 目的蛋白纯化 | 第42-46页 |
| 4.2.3 目的蛋白纯度检测 | 第46-48页 |
| 4.2.4 目的蛋白活性检测 | 第48页 |
| 4.3 本章小结 | 第48-49页 |
| 主要结论与展望 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
